202415. lajstromszámú szabadalom • Eljárás átmenő pórusokkal rendelkező membrán szerkezetek előállítására és hatékony pórusméretének változtatására
3 HU 202415 B 4 lásával és/vagy kémiailag, adott esetben french-sajtolóval, illetve enzimesen tárjuk fel. A találmány szerinti eljárás további előnyös kiviteli módjai szerint hordozóként az alábbiakat alkalmazzuk:- porózus réteg, adott esetben raikroszűrő és/vagy- segédréteg, amely adott esetben a membrán alkalmazása előtt eltávolítható, vagy- ionotróp gélekből álló testek, amelyeket a felvitt sejtfalfragmensek teljesen körülvesznek. A találmány szerinti eljárás további előnyös kiviteli módjai szerint a sejtfalfragmenseket- permetezéssel és/vagy ráöblitéssel visszük fel a hordozóra, és/vagy- nyomás vagy szívás hatásával juttatjuk a hordozóra, vagy- mechanikus erővel sajtoljuk a hordozóra. A találmány egy további kiviteli módja szerint polimerekből álló hordozó alkalmazása esetén a hordozó polimerizálódása vagy megdermedése közben ágyazzuk be a sejtfalfragmenseket a kialakuló porózus hordozóanyagba. A találmány szerinti eljárás egy további előnyös kiviteli módja szerint a sejtfalfragmensek és a hordozó közötti kötést hőkezeléssel (adott esetben felületi hőkezeléssel) erősítjük. Előnyős az is, ha a mono- és/vagy bifunkcionális molekulákkal végzett kezelés gyanánt gáznemű és/vagy folyékony halmazállapotú térhálósitót juttatunk a sejtmembránokra vagy fragmenseire, amikor is a gáznemű vagy folyékony halmazállapotú térhálósitóval végzett kezelések előnyösen időben egymást követik. Előnyös az is, ha a hordozót és/vagy a sejtfalfragmenseket - mielőtt a hordozóra felvinnénk - a tórhélósitóval kezeljük, majd miután felvittük a fragmenseket a hordozóra, a térhálósitót aktiváljuk. Előnyős az is, ha - mielőtt a sejtfalfragmenseket a hordozóra felvinnénk - a hordozón és/vagy a sejtfalfragmensek molekuláin a kovalens térhálósodást és/vagy másodlagos kötést szolgáló reaktív csoportokat alakítunk ki és/vagy vezetünk be. A találmány szerinti eljárás egy további előnyös kiviteli módja szerint a sejtfalfragmensek kovalens térhálós! tását egyidejűleg végezzük a fehérjemolekulák vagy fehérjetartalmú molekulák térhálósításával. Egy másik előnyös kiviteli mód szerint a hordozóra felvitt sejtfalfragmenseket a térhálósitó(k) felvitele előtt porózus védőréteggel lefedjük, amelyet a térhálósitás után kívánt esetben eltávolítunk. Egy utolsó előnyős kiviteli mód Bzerint a sejtburát nem törjük fel, hanem a szerke- 4 zet kiépítéséhez nem szükséges sejtrészeket, így citoplazma-membrán, citoplazma stb. a sejtbura pórusain keresztül kioldjuk. A találmány szerint előállított szerkezetek az alábbiak szerint alkalmazhatók.:- ultraszüröként, gáz szeparálásához vagy ioncserélő eljáráshoz elválasztó szervként,- egyéb szemipermeábilis membránok hordozójaként, ahol az egyéb szemipermeábilis membrán a szerkezet membránjainak pórusaira feszül, és adott esetben az egyéb szemipermeábilis membrán a szerkezet membránjainak fehérje- vagy fehérjetartalmú molekuláival karboxilcsoportokkal és/~ vagy aminocsoportokkal és/vagy szulfhidrilcsoportokkal és/vagy hidroxilcsoportokkal közvetlenül vagy bifunkcionális idegen molekulákon keresztül térhélósítva van. Az egyéb szemipermeábilis membránok előnyösen az alábbiak lehetnek: hiperszűrőmembránok, adott esetben tenzidvagy tenzidszerű lipoid-hiperszűrómembránok, elválasztó szerv gáz-szeparáláshoz, ioncserélő eljáráshoz vagy pervaporáló eljáráshoz, vagy oldatdiffúziós membrán,- az áthatolási kromatográfia területén elválasztó anyagként; ez esetben a szerkezet fel nem tárt sejtekből áll, amelyekből a felesleges komponenseket kioldottuk, majd a megmaradt sejtburkokat térhálósitottuk. A találmány kivitelezésének néhány előnyös útja Az alábbiakban először bemutatjuk, miképpen lehet a közeg tulajdonságainak megválasztásával a hatékony pórusméretet megváltoztatni a 0 154 620 sz. európai szabadalmi leírás 2. példájában leírt, ultraszűróként alkalmazható szerkezet esetén. Ez az ultraszűrómembrán egymás mellett elhelyezkedő glikoproteinmolekulákból felépülő membránokat tartalmaz, és minden membránpórust 6 határoló glikoproteinmolekula vesz körül. Feltételezhető, hogy a közeg tulajdonságainak változása révén a pórusok szabad méretében beálló változás hasonló mechanizmuson alapul, mint az oldott állapotban lévő proteinmolekulák esetében, amelyek csak két állapotban vannak jelen: teljesen kisimult vagy teljesen öBszetekeredett, és környezetváltozásra cBak az egyik, illetve a máBik állapotban lévő molekulák száma változik meg. A pórus közelében lévő glikoproteinmolekulák konformációja számára és/vagy az ott kötött töltések számára viszonylag ki6 számú diszkrét állapot létezik, és ezen állapotok előfordulási gyakorisága a környező feltételektől, így például a pH-értéktől, az inoerősségtől 5 lü 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65