202406. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a Lumbricidae családba tartozó gilisztafélékből eikozapentaénsav-észter tartalmú zsír elegy - és adott esetben ebből eikozapentaénsav tartalmú zsírsav elegy - előállítására
1 HU 202406 A 2 3. példa Az 1. példa szerint mossuk, tisztítjuk az 1. példa szerinti (Eisenia foetida) gilisztát. Ezután keverővei ellátott edénybe bemérünk 100 g aprított gilisztát és hozzá 0,01 tömegrész butil-hidroxi-toluol antioxidánst elegyítünk. Az elegy pH-ját ammónium-hidroxiddal pH 8,0-ra állítjuk be. Ezután hozzáadunk 1 tömegrész proteináz és 1 tőmegrész foszfolipáz-C (Bacillus cereus) enzimet. Az edény tartalmát homogenizáljuk, majd 4 órán át kevertetjük 37 °C-on. Ennek eltelte után a masszát liofilizáljuk. A 15 tömegrész száraz anyagot hexánnal extraháljuk úgy, hogy a száraz port 100 tömegrész hexánnal összerázzuk, majd 3 órás állás után az extrakciós maradékot és az extraktumot elkülönítjük. Az extrakciós maradékot oldószermentesítés után takarmányként alkalmazzuk. Az extraktból az oldószert rotációs bepárlón eltávolítjuk. Az így nyert termék tömege 1,2 g, ebben az EPA mennyisége 15,5 tömeg % az összes zsírsav tömegére számítva. 4. példa Az 1. példa szerint járunk el, de az enzim elegy helyett 2 tömegrész foszfolipáz-C enzimet adagolunk a gilisztához és az emésztett gilisztamasszát liofilizálás helyett porlasztva szárítjuk. Ezután a zsírtartalmat szén-dioxidos szuperkritikus extrakcióval nyerjük ki. Az extrakciót a 4 675 132 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertett módszerrel végezzük. A szuperkritikus extrakció paraméterei a következők: Az extrakció hőmérséklete: 75 °C, a nyomás: 17,6 MPa. A kitermelés: 1,2 g zsír elegy, ebben az EPA mennyisége 15 tömeg % az összes zsírsav tömegére számítva. 5. (összehasonlító) példa Mindenben az 1. példa szerint járunk el, de a kitisztított állatokat nem áztatjuk proteáz oldatba, hanem közvetlenül elvégezzük az extrakciót. Az extrakciót kétszeresre megnövelt ideig, 6 óráig végezzük. A továbbiakban mindenben az 1. példa szerint járunk el. A bepárolt zsírelegy sűrítmény tömege: 0,7 tömegrész. Ennek 15 tömeg %-a az EPA glicerin-észter alakjában. A példából kitűnik, hogy ha találmány szerinti proteáz enzimes kezelést elhagyjuk, jelentős mértékben csökken az EPA kihozatal. 6. (összehasonlító) példa Az 1. példa szerint mosott és belsőleg kitisztított állatokat fagyasztva szárítjuk, megőröljük 0,9 mm átlagszemcseméreíre. Az őrölt gilisztát 20 tömeg % etilalkohol és 80 tömeg % izotóniás nátrium-klorid oldat elegyét tartalmazó vizes oldattal extraháljuk. Az extraktumot az 1. példa szerint dolgozzuk fel. A zsírelegy mennyisége: 0,2 tömegrész és ennek EPA- észter tartalma 11 tömeg %. Az összehasonlító példából kitűnik, hogy ha az enzimes előkezelést elhagyjuk és az extrakciót vizes alkohollal végezzük, nagymértékben csökken a kinyerhető EPA-észter mennyisége. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás a Lumbricidae családba tartozó gilisztafélékből eikozapentaénsav-észter tartalmú zsírelegy- és adott esetben ebből eikozapentaénsav tartalmú zsírsavelegy - előállítására, a giliszta vizes mosás^, szárítása, majd extrakciója és az extrakt oldószermentesítése révén, azzal jellemezve, hogy a vizes mosással tisztított gilisztát nedves papírlemezek között tartjuk 4-10 °C-on 40-48 órán át, majd az így belülről is megtisztított állatokat - szárazanyag tömegükre számítva - 0,1-1,5 tömeg % enzimmel kezeljük 1-4 órán át, majd az előlezelt masszát ismert módon szárítjuk, őröljük ezután zsíroldószerrel extraháljuk vagy szén-dioxidos szuperkritikus extrakciónak vetjük alá, majd az extraktumot és az extrakciós maradékot elkülönítjük, az extraktumot ismert módon oldószermentesítjük, majd - kívánt esetben - a zsírelegyből a zsírsavakat ismert módon felszabadítjuk és az elegy eikozapentaénsav tartalmát ismert módon dúsítjuk. (Elsőbbsége: 1990. 10. 16.) 2. Eljárás a Lumbricidae családba tartozó gilisztafélékből eikozapentaénsav-észter tartalmú zsírelegy- és adott esetben ebből eikozapentaénsav tartalmú zsírsavelegy - előállítására, a giliszta vizes mosása, szárítása, majd extrakciója és az extrakt oldószermentesítése révén, azzal jellemezve, hogy a vizes mosással tisztított gilisztát nedves papírlemezek között tartjuk 4-10 "C-on 40-48 órán át, majd az így belülről is megtisztított állatokat - szárazanyag tömegükre számítva - 0,1-1,5 tömeg % proteáz enzimmel kezeljük 1-3- órán át, majd az előkezelt masszát ismert módon szárítjuk, őröljük, ezután zsíroldószerrel extraháljuk, majd az extraktumot és az extrakciós maradékot elkülönítjük, az extraktumot ismert módon oldószermentesítjük, majd - kívánt esetben - a zsírelegyből a zsírsavakat ismert módon felszabadítjuk és az elegy eikozapentaénsav tartalmát ismert módon dúsítjuk. (Elsőbbsége: 1989. 11. 13.) 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy enzimként proteáz és/vagy foszfolipáz-C enzimet alkalmazunk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az előkezelt masszát porlasztva szárítással vagy liofilizálással szárítjuk. (Elsőbbsége: 1990. 10. 16.) 5. Az 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az előkezelt masszát 80-100 °C-on végzett hőkezeléssel szárítjuk. (Elsőbbsége: 1989. 11. 13.) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Dr. Szvoboda Gabriella osztályvezető AGUILAR & TÁRSA Kft - GYŐR Felelős vezető: Javier Aguilar ügyvezető ig.
