202280. lajstromszámú szabadalom • Eljárás funkcionális humán urokináz fehérjék előállítására
SZABADALMI IGÉNYPONTOK 35 HU 202280 B 1. Eljárás az A ábra 1-412 aminosavai közti aminosav-szekvenciát tartalmazó humán urokináz polipeptid, valamint ennek egy, az 5 említett humán urokináz polipeptidet kódoló DNS szekvenciával hibridizáló DNS által kódolt, urokináz-aktivitást mutató részei vagy variánsai előállítására, azzal jellemezve, hogy a 3A - 3C ábrák szerinti, az említett teljes 10 hosszúságú humán urokináz polipeptidet vagy az említett DNS szekvenciával hibridizáló részeit vagy variánsait kódoló DNS szekvenciát egy megfelelő expressziós vektorba építjük be, az Így kialakitott vektort 15 , valamely, az említett polipeptidet az expreszsziós vektorból való kifejezés útján termelni képes E. coli vagy emlős sejttenyészet gazdasejtbe transzformáljuk, a kapott transzformánsokat megfelelő tápközegben tenyésztjük, 20 az expressziós terméket elkülönítjük, kivánt esetben a kapott terméket hasítjuk és így az említett polipeptidet biológiailag aktív urokináz alakjában kapjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal 25 jellemezve, hogy a pUK33 trpLEi., pUK33 trpLEs, pUK33 trp 103, pUK54 trp 207-1 vagy p-preUK54 trp207-l plazmidokat alakítjuk ki, és ezek valamelyikével végezzük a gazdasejtek transzformálását. 30 3. Az igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a lényegében biológiailag inaktív fehérjét az A. ábra szerinti 158-159 közti helyen, a Lys-Ile-Ile-Ile-Gly-Gly szekvencia Lys-Ue kapcsolódásnál hasitjuk. 35 Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: dr. Szvoboda Gabriella osztályvezető R 4981 - KJK 91.3911.66-13-2 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Szabó Viktor vezérigazgató 20
