202259. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikroorganizmusok tenyésztésére szolgáló szilárd táptalaj előállítására
1 HU 202259 B 2 donságok vizsgálata bizonyítja. A táptalaj felületén nem jelentkezik folyadék izzadmány. Összehasonlításul az E. coli 055 mikroorganizmust olyan szilárd táptalajra oltottuk, amelyet a 3430316 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban leírtak szerint készítettük. A 37 °C hőmérsékletű, 24 órás inkubáicó után a tenyészet szabálytalan alakú, lapos kolóniák formájában fejlődött ki. A szilárd táptalaj egyes szelvényein folyadék izzadmányokat tapasztalhatunk. 4. példa 2,4 g poli(vinil-alkohol)-t 250 ml vízben oldunk. Ezt az oldatot hozzáadjuk egy olyan oldathoz, amelynek összetétele: 0,25 g MBA, 0,25 ml TMED és 159 g akrilsavamid 470 ml 0,9 tömeg% nátrium- kloridot tartalmazó fiziológiás oldatban. Az oldatok elegyét pedig egy olyan oldathoz adjuk, amelynek összetétele: 0,3 g ammónium-peroxo-diszulfát 160 ml megadott koncentrációjú fiziológiás oldatban. Az elkészült reakcióelegyet a polimerizációhoz reaktorba töltjük. A reakcióelegyben az AA és a PVA tömegaránya 20:3. Egy óra elteltével a gél-pelyheket kivesszük, fiziológiás oldattal öblítjük és 4-szeres tömegnövekedésig duzzasztjuk. A kapott gélt az 1. példában leírtak szerint tápőszubsztrátummal impregnáljuk. A szubsztrátum Hottinger-féle tápoldat, amely az aminocsoportokban 200 mg nitrogénatomot tartalmaz. A teszt- mikroorganizmus: Salmonella typhimurium. A 37 °C hőmérsékletű inkubáció után a tenyészet sima felületű és peremű, enyhén domború kolóniák formájában fejlődik ki. A tenyészet tipikus tulajdonságait a morfológiai, cukorbontási és agglutinációs tualjdonságok vizsgálata bizonyítja. Az összehasonlító kísérletben a tipikus kolóniák mellett nem-tipikus, lapos, nyálkás kolóniák is növekednek. 5. példa 0,8 g poli(vinil-alkohol)-t 250 ml vízben oldunk. Ezt az oldatot hozzáöntjük egy olyan oldathoz, amelynek összetétele: 0,25 g MBA, 0,25 ml TMED és 159 g akrilsavamid 470 ml 0,8 tömeg% nátriumkloridot tartalmazó fiziológiás oldatban. Az oldatok elegyét pedig egy olyan odathoz adjuk, amelynek összetétele: 0,35 g ammónium-peroxo-diszulfát 160 ml fiziológiás oldatban. Az elkészült reakcióelegyet a polimerizációhoz reaktorba töltjük. A reakcióelegyben az akrilsavamid és a poli-(vinil-alkohol) tömegaránya 20:1,0. Egy óra elteltével a gél-pelyheket kivesszük, fiziológiás oldattal öblítjük és 4,5-szeres tömegnövekedésig duzzasztjuk. A kapott gélt az 1. példában leírtak szerint tápszubsztrátummal impregnáljuk. A szubsztrátum Hottinger-féle tápoldat, amely az aminocsoportokban 200 mg nitrogénatomot és 2% glükózt tartalmaz. A tesztmikroorganizmus: Streptococcus pyogenes, amely tipikus kolóniák formájában fejlődik ki. Az összehasonlító kísérletben szintén tipikus kolóniák fejlődnek, folyadék-izzadmányos területeken azonban a kolóniák nedvesek, nyálkásak. 6. példa A reakcióelegy előállításához az 1. példában leírtak szerint elkészített A, C és D jelű oldatokat használjuk. A B jelű oldatot úgy készítjük, hogy 4,125 g N,N’metilén-bisz-akrilsavamidot oldunk fel 500 ml, 0,9 gömeg% nátrium-kloridot tartalmazó fiziológiás oldatban, majd 470 g akrilsavamidot adunk hozzá, és a megadott koncentrációjú fiziológiás oldattal 1000 ml-re egészítjük ki. Az oldatokat A:B:C:D=12:32:52:15 térfogataranyban keverjük össze, és a reaktorban végrehajtjuk a kopoliomerizációt. A reakcióelegyben az akrilsavamid és az N,N’-metilén-bisz- akrilsavamid tömegaránya 15:0,132 és az akrilsavamid és a PVA tömegaránya 15:1,5. A kapott gélt az 1. példában leírtak szerint kezeljük, de a duzzasztásnál a tömegnövekedés 3,5-szeres, majd az 1. példában leírtak szerint tápszubsztrátummal impregnáljuk. A szubsztrátum: húspepton lé. A tesztmikroorganizmus: Shigella Flexneri. A 37 °C hőmérsékletű termosztátban 24 órán keresztül tartó inkubáció után a tenyészet fénylő, sima peremű, enyhén domború kolóniák formájában fejlődik ki. A tenyészet tipikus tulajdonságait a morfológiai, cukorbontási és agglutinációs tulajdonságok vizsgálata bizonyítja. A szilárd táptalaj felületén nem jelentkezik folyadék izzadmány. Az összehasonlító kísérletben a szabályos kolóniák mellett szabálytalan, szétfolyó peremű kolóniák képződnek. 7. példa A reakcióelegy előállításához az 1. példában leírtak szerint elkészített A, C és D jelű oldatokat használjuk. A B jelű oldatot úgy készítjük, hogy 0,594 g N-N’metilén-bisz-akrilsavamidot oldunk fel 500 ml 0,85 tömeg% nátrium-kloridot tartalmazó fiziológiás oldatban, majd 25 g akrilsavamidot adunk hozzá és a megadott koncentrációjú fiziológiás oldattal 1000 mire egészítjük ki. Az oldatokat A:B:C:D-16:32:52:30 térfogatarányban keverjük össze és a reaktorban végrehajtjuk a kopolimerizációt. A reakcióelegyben az akrilsavamid és az N,N’-metilén-bisz-akrilsavamid tömegaránya 20:0,019 és az akrilsavamid és a PVA tömegaránya 20:3,0. A kapott gélt az 1. példában leírtak szerint kezeljük, de a duzzasztásnál a tömegnövekedés 4,6-szeres, majd az 1. példában leírtak szerint tápszubsztrátummal impregnáljuk. A szubsztrátum: Hottinger-féle tápoldat, amely az aminocsoportokban 300 mg nitrogénatomot tartalmaz. A teszt-mikroorganizmus: Proteus vulgaris kultúra. A 37 °C hőmérsékletű termosztátban 24 órán keresztül tartó inkubáció után a tenyészet közepesen fénylő, enyhén domború, szabálytalan alakú kolóniák formájában fejlődik ki. A tenyészet tipikus tulajdonságait a morfológiai vizsgálat bizonyítja. A szilárd táptalaj felületén nem jelentkezik folyadék izzadmány. Az összehasonlító kísérletben nagy, lapos, nyálkás, szabálytalan formájú kolóniák képződnek. 8. példa A reakcióelegy előállításához az 1. példában leírtak szerint elkészített A, C és D jelű oldatokat használjuk. A B jelű oldatot úgy készítjük, hogy 4,135 g N,N’metilén-bisz-akrilsavamidot oldunk fel 500 ml, 0,8 tömeg% nátrium-kloridot tartalmazó fiziológiás oldatban, majd 25 g akrilsavamidot adunk hozzá, és a megadott koncentrációjú fiziológiás oldattal 1000 ml- re egészítjük ki. Az oldatokat A:B:C:D-16:32:52:10 térfogatarányban keverjük össze, és a reaktorban végre5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
