202242. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás telítetlen aminosav-vegyületek és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202242 B 2 Elemanalízis a C19H35NFO6P összegképlet alapján: számított: C 53,89; H 8,83; N 3,31%; mért: C 53,7; H 8,4; N 3,4%. e) N-[(2R)-4-Fluor-l-hidroxi-5-di(2-propil)-foszfono-pent-3-én-2-il]-karbaminsav-terc-butilészter (5) 2.3 g a d) példában leírtak szerint előállított 4 foszfonát 250 ml metanollal készített oldatát 5 g Amberlyst-15 (H+alakú) jelű ioncserélővel 20 órán át keverünk szobahőmérsékleten. Ezután szűrjük, a szűrletet bepároljuk, a maradékot 80 g szilikagélen kromatografáljuk. Etilacetáttal eluálva 1,31 g 5 alkoholt nyerünk, [alfajt)- -21,1° (c-1, CHCI3). Elemanalízis a C13H31NFO5P összegképlet alapján: számított: C 52,31; H 8,51; N 3,81%; mért: . C 50,2; H 8,2; N 3,7%. f) (2R)-2-terc-B utox i-karbonil-amino-4-fluor-5 - di(2-propil)-foszfono-3-penténsav (6) 1.3 g, az e) pontban leírtak szerint előállított 5 alkohol 80 ml acetonnal készített oldatához 0-2 °C-on 2,5 ml olyan oldatot adunk, mely krómtrioxidra 3,25 mólos és kénsavra 5,29 mólos. A reakcióelegyet 2 órán át keverjük 0-2 °C-on és 4 óra alatt hagyjuk szobahőmérsékletűre melegedni. 10 ml 2-propanolt, 100 ml etilacetátot és 50 ml 20%-os nátriumklorid oldatot adunk hozzá, a vizes fázist elválasztjuk és négyszer 100-100 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat nátriumszulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot 70 g szilikagélen kromatografáljuk. Eluálószerként 10:16:1 arányú hexán-etilacetát-ecetsav elegyet használunk. így 0,87 g 6 savat nyerünk. [alfajD- -72,9° (c-0,8, CHCI3). g) (2R)-2-Amino-4-fluor-5-foszfono-3-penténsav (7) 0,98 g, az f) pontban leírtak szerint előállított 6 vegyület és 0,84 ml N,0-bisz-trimetil-szilil-acetamid 80 ml vízmentes diklórmetánnal készített oldatát egy órán át keverjük szobahőmérsékleten. 0,98 ml trimetil-bróm-szilán hozzáadása után további 30 órán át keverjük szobahőmérsékleten. Az illékony alkotórészeket lepároljuk, a maradékot 50 ml diklórmetánban oldjuk és 0-5 °C-on 200 ml vizet adunk hozzá. A szerves fázist elválasztjuk és kétszer 50-50 ml vízzel mossuk. A vizes fázisokat nagyvákuumban 10 ml térfogatúra pároljuk be. 30 ml Dowex 50 Wx8 jelű ioncserélőn kromatografálunk és vízzel eluálunk. Az eluátumot liofilizáljuk, így 0,22 g 7 vegyületet nyerünk. [alfajD- -44,8° (c-0,5, H2O). Tömegspektrum (gyorsatomos bombázás): 214 (M+H)+. 9 * * * 13C-NMR (75 MHz, D2O): 172,7 (CO2H); 161,5 (dxd, J-263 és 12, C(4)>; 100,9 (t, J körülbelül 11, C(3)); 49,5 (C(2)); 33,5 (dxd, J-128 és 26 C(5)). A termék egy kis mennyiségét az enantiomer tisztaságvizsgálatához (R)-(+)-metoxi-trifIuormetil-fenilecetsav-kloriddal amiddá alakítjuk. 'H-NMR analízis (300 MHz) az OCH3-jelek integrálásának eredményeként adódott a következő: >90% (2R)-izomer (3,49 ppm) és <10% (2S)-izomer (3,38 ppm). 9. példa (2R)-2-Amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsav-etilészter a) (2R,3S)-2-Formil-amino-3-hidroxi-4-metil-4- penténsav-etilészter (1) aa) 1,1,3,3-Tetrametil-1,3-diszila-2-azol idin-N-ecetsav- etilészterből kiindulva 2,26 ml N-ciklohexil-N-izopropil-amin 60 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához -20 °C- on 7,6 ml 1,6 mólos, hexános butillítium-oldatot adunk. 20 perc múlva -78 °C-ra hűtjük le és 3 g l,l,3,3-tetrametil-l,3-diszila-2-azolidin-N-ecetsav-eti lészter 60 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtetjük hozzá. A reakcióelegyet egy órán át keverjük -78 °C-on és végül 142 ml körülbelül 0,035 mólos éteres ciklopentadienil-bisz(0-l ,2:5,6-diizopropilidén)-D-glükofúranozil-titán(IV)klorid oldatot csepegtetünk hozzá és további 17 órán át keverjük -78 °C-on. A reakcióoldatot acél kanül segítségével, argonnyomással egy olyan edénybe vezetjük át, mely 1,1 ml metakrolein 15 ml tetrahidrofuránnal készített -78 °C-ra hűtött oldatát tartalmazza. Ezután hagyjuk szobahőmérsékletűre felmelegedni, 2 órán át keverjük, 1,5 ml vizet adunk hozzá és szűrjük. A szűrletet 250 ml dietiléterrel hígítjuk, háromszor 250-150 ml körülbelül 10%-os nátriumklorid oldattal és telített nátriumklorid oldattal mossuk. A vizes fázist kétszer 250-250 ml dietiléterrel extraháljuk. A szerves fázisokat nátriumszulfát felett szárítjuk, bepároljuk és forrón oldjuk 150 ml ciklohexánban. Lehűtés közben az l,2:5,6-bisz-(0-izopropilidén)-D-glükofuranóz kristályosodik ki. Az anyaglúgot bepároljuk, a maradékot 120 ml tetrahidrofurán, 24 ml víz és 4,5 ml ecetsav elegyében felvesszük és 2 órán át keverjük szobahőmérsékleten. A reakcióelegyet nagyvákuumban, szobahőmérsékleten bepároljuk, így 10,6 g maradékot kapunk, mely a (2R,3S)-2-amino-3-hidroxi-4-metil-4- penténsav-etilésztert tartalmazza. Ebből egy kis mennyiséget (5 mg) 2 órán át 0,2 ml trifluor-ecetsavanhidriddel és 0,3 ml diklórmetánnal reagáltatunk. Kapillárgázkromatigráfiával vizsgálva (Chirasil®-LVal, 90-180 °C (2° per perc) az eredmény: 99,25% (2R,3S)-enantiomer (retenciós idő: Tret-10,28 perc) és 0,75% (2S,3R)-enantiomer (retenciós idő: Tret—11,48 perc). Ezután 80 ml hangyasav-etilészterben 5 és fél órán át forraljuk visszafolyatás közben. Bepárlás és kromatografálás után (szilikagélen, 1:1 arányú hexán-etilacetát eleggyel eluálva) 1,64 g 1 formamidot nyerünk. Ebből egy kis mennyiséget (5 mg) acetátja alakjában gázkromatográfiával vizsgálva (Chirasil®-L-Val, 160-180 °C, 1 °C per perc): (2R,3S)enantiomer (Tret-13,64 perc). 0,8% (2S,3R)enantiomer (Tret-13,94 perc). ab) Izociánacetsav-etilészterből kiindulva 24,88 g izociánecetsav-etilészter és 18,51 g metakrolein 220 ml 1,2-diklór-etánnal készített oldatához 50 °C-on 1,65 g (S)-N-metil-N-[2-(dimetil-amino)etil]-l-[(R)-r,2-bisz-(difenil-foszfmo)- ferrocenilj-etilamint és 1,105 g bisz-(ciklohexil-izocianid)-arany(I)tetrafluoroborátot adunk. 5 órán át keverjük 50 °C-on, argonatmoszférában, majd bepároljuk. A maradékot 400 ml dietiléterben felvesszük, szűrjük és a szűrletet bepároljuk. A bepárlási maradékot nagyvákuumban (0,004 mbar) desztilláljuk, így 33,62 g 5-(2-propenil)-oxazolin-4-karbonsav-etilészter sztereoizomerelegyet nyerünk, mely 42-52 °C-on forr; MS.: m/e-183 (2%, M+), 110 (80%), 85 (100%). Ennek a keveréknek 33 g-ját 74 ml víz és 33 ml tetrahidrofurán elegyében 3 órán át forraljuk visszafolyatás közben. Ezután vákuumban bepároljuk, így 36,1 g 2-formil-amino- 3-hidroxi-4-metil-4-penténsav-etilészter (2) sztereoizomer keveréket kapunk. Ennek egy kis mennyiségét 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
