202117. lajstromszámú szabadalom • Eljárás növekedést serkentő hormon stabilitására és stabilizált hormonkészítmény előállítására
HU 202117B A találmány tárgya eljárás stabilizált növekedési hormon előállítására, továbbá eljárás állatok növekedésének serkentésére alkalmas stabilizált növekedési hormon készítmények előállítására. A stabilizátorok csökkentik az oldhatatlan csapadékok képződésének lehetőségét, és védik az oldott növekedési hormon bioaktivitását a vizes közegben. A növekedési hormon bevitelének egyik fő problémája, hogy a natívglobuláris struktúra denaturálódása miatt aggregálódik a hormon, és a csapadék képződéssel csökken a növekedési hormon rendelkezésre álló aktív mennyisége. A csapadékképződés következtében elzáródhatnak a beültetett adagolókészülékek csövei, membránjai vagy különféle pumpái is. A rendszer hibái csaknem mindig ilyen csapadékképződésre vezethetők vissza. A csapadékképződés mellett, a növekedési hormon bevitelének másik problémája az oldott állapotban levő hormon bioaktivitásának megtartása. A növekedési hormonkészítmény stabilizátorának tehát csökkentenie kell az oldhatatlan csapadék képződését, és meg kell őriznie az oldott hormon bioaktivitását. A szakterületen különféle stabilizátorok ismeretesek, melyek védik a proteinek szerkezetét a lebomlástól. Gekko és munkatársai [Biochemistry, 20,4666-76 (1981)] például glicerint használnak a különféle proteinek aktivitásának stabilizálására. A cikkükben példaként kimotripszinogén A (borjú hasnyálmirigyből), ribonukleáz A (borjú hasnyálmirigyből), ß-laktoglobulin (tejből), borjúszérumalbumin, inzulin (borjú hasnyálmirigyből), tojásfehérje lizozim és a-kimotripszin fehérje szerepel. A 4 179 337 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás ismertet egy eljárást, melyben a polipeptidet, például egy enzimet vagy az inzulint 500-20000 Dalton molekulatömegü polietilén-glikollal vagy polipropilén-glikollal párosítva védik. A polipropilén-glikolról és a polietilén-glikolról megállapítják, hogy megvédik a polipeptidet az aktivitásának csökkenésétől, és a készítmény beinjektálható anélkül, hogy bármiféle immunreakciót váltana ki. A 4 439 181 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás leír egy eljárást, mely megakadályozza, hogy a protein (pl. inzulin) kiváljon a hatóanyagot szolgáltató rendszerben, melynek megfelelő működése az infuzátum fluiditásától függ. Az eljárás abból áll, hogy a protein oldatot egy poliollal keverik össze, mielőtt bevinnék a hatóanyagot szolgáltató rendszerbe. A leírás szerint a poliol lehet glicerin vagy 4-18 szénatomszámú biokompatibilis poliol. Ilyen poliol például az eritritol, arabinóz, xilóz, ribóz, adonitol, arabitol, ramnóz, inozitol, fruktóz, galaktóz, glükóz, mannóz, szorbóz, maltóz, szaccharóz, melezitóz és raffinóz. A szilárd poliolokat feloldják a standard vizes inzulinoldatban vagy először vizes oldatukat készítik el, és ezt adják az inzulinoldathoz. A proteinnel egyensúlyban levő poliol végső koncentrációja 10-90 százalék (tömeg/térfogat). A szabadalom további proteinekként említi a növekedési hormont, glikagont és hasonlókat, melyeknél ugyanolyan kicsapódási problémák lépnek fel. Az eddigi szakirodalom számos különféle stabilizátorral foglalkozik, de sajnos az a tény, hogy egy 1 adott stabilizátor egy adott proteinnel kapcsolatban hatásos, nem jelenti szükségszerűen azt is, hogy az adott stabilizátor a növekedést serkentő hormont is stabilizálja. Fellép ezért az igény egy olyan, a növekedést serkentő hormont stabilizáló eljárásra, mely csökkenti a csapadékképződést és megvédi az oldott hormon bioaktivitását. A találmány stabilizált állati növekedésserkentő hormonnal és ipari méretű előállításával foglalkozik. Az eljárás csökkenti a csapadékképződést és megvédi az oldott növekedésserkentő hormon bioaktivitását vizes közegben. A stabilizált növekedési hormont úgy állítjuk elő, hogy a hormont összekeverjük egy vagy több stabüizátorral, mely lehet: a) egy poliol: nem redukáló cukor, cukoralkohol, cukorsav, pentaeritritol, laktóz, vízoldékony dexttói és Ficoll [(Pharmacia Co„ Inc., Piscataway, NJ.USA); nemionos szintetikus szacharóz polimer]; b) aminosav: glicin, szarkozin, lizin vagy sói, szerin, arginin vagy sói, bétáin, NJí-dimetü-glicin, aszparaginsav vagy sói, glutaminsav vagy sói; c) fiziológiás kémhatással elektromos töltéssel rendelkező oldalláncot hordozó aminosav polimerje;és d) kolinszármazék: kolin-klorid, kolin-dihidrogén-citrát, kolin-hidrogén-tartarát, kolin-hidrogén-karbonát, trikolin-citrát, kolin-aszkorbát, kolinborát, kolin-glükonát, kolin-foszfát, di(kolin)szulfát, és dikolin-mukát. Az 1. ábra grafikusan mutatja az állati szervezetbe való bejuttatást követő adott időben vett vérminta szérumában a sertés növekedési hormon átlagos koncentrációját ng/ml értékekben kifejezve. A találmány szerinti stabilizátorok nemcsak az oldhatatlan csapadékképződést csökkentik, de védik az oldott növekedési hormon bioaktivitását is. A találmány eljárása szerint a növekedésserkentő hormont az állatba való bejuttatás előtt valamüyen stabilizátor hatásos mennyiségével keverjük össze. A találmány egyik megvalósítási formája, hogy a stabilizált növekedési hormont beinjektáljuk az állatba. Ebben az esetben a stabilizált növekedési hormon vizes oldat formájában van, ami az oldott növekedési hormont és az oldott stabilizátort tartalmazza. Egy másik megvalósítási módnál a stabüizált növekedési hormont egy beültetett eszköz segítségével juttatjuk a szervezetbe. E szerint az eljárás szerint a stabilizált növekedési hormon lehet folyékony vagy szilárd állapotban. Amennyiben egy beültetett eszköz segítségével visszük be a hormont, előnyösen a szilárd növekedési hormon és a szüárd stabilizátor száraz keverékét alkalmazzuk, ami a vizes közegbe kerülve, nedvesedik és elkezd beoldódni. A stabilizátorok különösen alkalmasak az állati növekedésserkentő hormonok tartósítására. Ilyen hormonok például a borjú, a ló, a madarak, a juh, a sertés, de az ember növekedésserkentő hormonja is. Előnyös a borjú és a sertés növekedésserkentő hormon. Noha a készítményben a növekedési hormon koncentrációja változhat a kívánt dózistól és a növekdési hormon jellegétől függően, általában a készítmény 1-97,5 tömegszázalékában van jelen. Szájon át történő adagolásnál a készítmény előnyösen 5-50 százalékban tartalmaz növekedésserkentő 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
