202088. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diétás készítmény előállítására
HU 202088 B juk lehűlni 37 *C-ra. Akivált alacsony telítctlcnségű zsírsav-etil-észter karbamid-adduktot leszűrjük. Az alkoholos oldatot beszűkítjük, és 251 vizet és 425 lhexántadunkazelegyhez.Akarbamidavizesfázisba kerül, az etil-észter pedig a hexán-fázisban marad. Akét fázist hagyjuk szétválni, majd elválasztva a szerves fázist 40 *C hőmérsékletű 850 liter vízzel ötször mossuk. Szárítjuk, majd a karbamid teljes eltávolítását szilikasav-oszlopon keresztülfolyatva végezzük. (Belső átmérő: 10 cm; magasság: 27 cm; átfolyási sebesség: 80 cm/óra). Ahexánt ledesztiüáljuk. EPA: 22%, DHA: 35%. 3. példa Telítetlen zsírsavak kinyerése 2 kg nátrium-hidroxidot 70 liter 95%-os alkoholban oldunk, majd melegen 10 kg szardíniaolajat adunk hozzá. Az elegyet 2 órán keresztül nitrogénatmoszférában forraljuk, keverés közben 10 *C-ra lehűtjük. Ekkor a telített zsírsav nátrium-sója kiválik. A kristályokat kiszűrjük, kevés alkohollal mossuk. Az alkoholos szűrletet koncentráljuk, és 20 liter kiforralt vizet adunk hozzá. Az el nem szappanosítható vegyületeket mint a koleszterin, 51 hexánnal extraháljuk, így azokat teljesen eltávolítjuk. Híg kénsavval pH 2-ig savanyítunk, majd 15 liter hexánnal extrahálunk. A szerves fázist vízzel mossuk, majd bepároljuk. 3,2 kg koncentrált olajat kapunk. DHA tartalom: 36,8%, EPA tartalom: 31,8%. Az olaj barna, és halszagú, ezért a koncentrált olajhoz fullerföldet (agyagot) keverünk és nitrogén atmoszférában 105 ‘C-on 10 percig melegítjük, majd forrón szűrjük. A szagtalanítást vákuum-gozdesztillációval 1.102 Pa nyomáson 170 *C-on 3 órán keresztül végezzük. Világossárga, íztelen, szagtalan terméket kapunk. 4. példa Telítetlen zsírsavak kinyerése 20%-os etanolos jód-oldatot készítünk, ezt az oldatot 300 g tőkehalmájolajhoz lassan hozzáadagoljuk. A jód-oldat adagolását addig kell folytatni, amíg el nem tűnik a jód okozta elszíneződés. A reakció kevergetés közben, szobahőfokon megy végbe. A jódozott olajos oldatot 2 órán keresztül 20%-os KOH etanolos oldatával szappanosítjuk el. A jódozott zsírsav (260 g) könnyen kiextrahálható az elszappanosított keverékből. Ezt követően sósavas metanollal metüezünk (5%-os sósav oldattal). Oszlopkromatográfiával tisztítást végzünk, ISO g szflikagélt (70-230 mesh Merck) alkalmazunk; az eluálást 5 liter hexán-éter-ecctsav 85:10:5 arányú keverékével végezzük. Az első lejövő frakció a jódozott DHA-t, a másodüt a jódozott EPA-t tartalmazza. A jódozott zsírsavakat 10%-osvizesezüst-nitrátoldattal kell külön-külön összerázni. Az ezüst-jodidot leszűrjük, a két fázist elválasztjuk. A műveletet annyiszor kell megismételni, amíg ezüst-jodid kiválása el nem marad. Hozam: 90%; tisztaság:95-100%. 5. példa Telítetlen zsírsavak kinyerése 24 kg tőkehalmáj olajat feloldunk 60 *C-on 16 litermetanolban; keverés közben becsepegtetünk 8 kg 40%-os NaOH-oldatot, majd az elegyet 60 'C-on 3 tartva további 45 percig kevertetjük. Mintegy 60 'C hőmérsékleten 20 kg 15%-osHCl-at adunk az oldathoz; a fázisokat elválasztjuk, majd még 10 kg 15%os HCl-al mossuk, és mintegy 1801 forró csapvízzel semlegesre mossuk, elválasztjuk. Az olajhoz 100 liter acetont adunk, felmelegítjük mintegy 45 *C-ra és hozzáöntünk 30 liter vízben feloldott 3,8 kg Li- OHifcO-ot 1/2 óra keverés után 1 éjszakán át állni hagyjuk. Leszűrjük, az acctonos szűrletet bepároljuk. 8 kg 15%-os HCl-al megsavanyítjuk, és hexánnal háromszor kirázzuk, majd bepároljuk. 6,4 kg tisztított halolajat nyerünk. Jódszám: 258; savszám: 160. A tisztítási művelet során végig N2 atmoszférában dolgozunk. A fenti módon tisztított tőkehalmájolaj 1 kg-ját hozzácsepegtetjük 60 'C-on 3 kg karbamid 9 liter metanolban készült oldatához. Az elegyet 2 órán át ezen a hőmérsékleten kevertetjük. Lehűlés után 1 éjszakán át mélyhűtőben áll. Leszűrjük, a szűrletet bepároljuk. 2,5 liter 1:1 HCl-al 15 percig kevertetjük. Hexánnal kirázzuk, semlegesre mossuk, Na2S04-al szárítjuk, bcpároljuk. 0,34 kg to-3 zsírsavat nyerünk. Jódszám: 315; EPA: 24%; DHA: 42%. 6. példa Alga-tenyésztés 10 literes alga tenyésztő üvegbe töltünk 8 liter Knop-Pringsheim-fclc tápoldatot, amelyet kiegészítünk 40 mg nátrium-szelenittel. Arendszert 121 'C-on 30 percig sterüezzük 1 bar túlnyomáson. A sterü oldatot beoltjuk Scenedesmus obtisiusculus (VövJiat.Mg. 68,179.) alga színtenyészettel. A tápoldathoz25 'C-on 5 tf% széndioxidot tartalmazó sterü levegőt buborékoltatunk át, fénycsöves megvilágítás mellett. 14 nap tenyésztési ciklus után az algát a tápoldattól elkülönítjük, majd a kapott algamasszát ultrahanggal feltárjuk. 7. példa Alga-tenyésztés Mindenben az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy Scenedesmus obtisiusculus helyett Chlorella vulgaris (Növ.hat. Mg 68,173) törzset alkalmazunk. 8. példa Homogenizálum előállítása 150 g 65%-os dúsított tőkehalmájolajhoz (EPA: 22%, DHA: 43%) 100 g Se-algát keverünk (Se tartalom: 26 pg/g). A homogenizátumot 0,1% E-vitaminnal tartósítjuk. 9. példa Alga-szelén komplex előállítása Abiológiaüag aktív tulajdonságokkal rendelkező szelén tartalmú alga tenyésztésre az irodalomban ismert összetételű tápoldatot 0,2 jx.g—500 pg Se/ml koncentrációig szelén sóval kiegészítjük, majd a tápoldatot 100-140 *C közötti hőmérsékleten sterilizáljuk, ezt követően szelénre rezisztens alga színtcnyészcttel beoltjuk. Előnyösen Chlorella vagy Scenedesmus alga törzset alkalmazunk. A tápoldaton 0,1-10 tf% szén-dioxidot tartalmazó steril levegőt buborékoltatunk át, majd 10-40 *C közötti hőmér-4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
