202058. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiolkarbonátok és klór-acetanilidek kulturnövényeket károsító hatásának csökkentésére alkalmas bioantidótumok előállítására és alkalmazására
1 HU 202058 B 2 vált, bioantidótumként használható mikro- és makrószervezeteket szükség szerint tartósítjuk és/vagy feldolgozzuk. A kezelési eljárás során az (I) általános képletű vegyületekből képződő bomlástermékek, amelyek előnyösen a (II)—(VII) általános képletű vegyületek valamelyike, vagy ezeknek a keveréke, vagy ezeknek észterezett vagy acilezett származékai lehetnek, herbicidet antidotáló hatással rendelkeznek, s a mikro- vagy makroszevezetekhez kötődnek, így végeredményül antidótumhordozó élő szervezeteket, úgynevezett bioantidótumokat kapunk. Találmányunk tárgya továbbá az előbbi eljárásokkal előállított biontidótumok alkalmazási eljárása az (I) általános képletű tiolkarbamátok és a (VIII) általános képletű klór-acetanilidek kultúrnövényeket károsító hatásának csökkentésére. Ezen bioantidótumokat frissen vagy liofilezéssel vagy valamely hordozóanyagra való felvitellel történő tartósítás után, eredeti formájukban vagy zúzással, porítással, extrahálással, szárítással vagy egyéb módon való feldogozásuk után, a herbicidekkel való kezelés előtt, vagy azzal egyidőben (gyári kombináció vagy tankkeverék formájában) vagy azután, a kultúrnövény csírázásáig bármikor, alkalmazzuk a széntóföldi talajok kezelésére, megnövelve ezzel az (I) és (VEI) általános képletű herbicid hatású vegyületeknek a kultúrnövényekkel - előnyösen a kukoricával - szembeni szelektivitását. A találmány szerinti eljárásokat a következő példákon mutatjuk be, melyek nem korlátozzák az oltalmi kört. 1. példa Az (I) általános képletű herbicid hatűanyagok közé tartozó EPTC-vel előkezelt talajnak, mint az antidotumhatású, mikrobiális eredetű anyagcseretermékek hordozójának vizsgálata. Szántóföldi talajt, amelynek kémhatása pH=5,7 kötöttsége=46 Arany-féle kötöttség, összes sótartalmad,03% humusztartalma: 1,9%; és N03+N02-14.8 ppm; P205=735 ppm; K20=853 ppm; Mg=246 ppm; Na=60 ppm; Zn=2,l ppm; Cu=3,2 ppm; Mn=151 ppm tartalmú, az EPTC herbicid hatóanyag kiszerelt formáinak, a 72% hatóanyagtartalmú Witox 72 EC-nek 8 liter/hektáros dózisával, illetve a 72% EPTC-t és 8% AD-67 [N- (2,2-di-klóracetil)l-oxa-4-azabiciklo-(4,5)-dekán] antidótumot tartalmazó Alirox 80 EC-nek 8 liter/hektáros dózisával előkezeltük. Ebből a talajból tenyészedényenként 600-600 g-ot bemértünk és ebbe vetettük a Pioneer-3707 hibridkukorica 10-10 szemét, valmint gyomként 20-20 szem Alföldi-1 szemescirkot. A vetéstől számított 11. napon a HGMIF-400/D napfénypótló lámpák alatt, 15k lx fényerősségen 16 órás megvilágítási periódussal nevelt, naponta a talaj vízkapacitásáig öntözött növények zöldtömegét, valamint a kukorica hajtáshosszát lemértük, illetve a kukorica küllemét a következő bonitálási skála segítségével értékeltük: 4: erős torzulás, csavarodás 3: közepes torzulás, csavarodás 2: enyhe fitotoxicitás 1: ép, egészséges növény Ezt követően az első vetéstől számított 14. napon a tenyészedényekbe a növényeket újra elvetettük, majd a 72% EPTC-t tartalmazó Witox 72 EC 8 1/ha és 20 1/ha dózisával kezeltük a talajt. A második vetéstől számított 11. napon a növények zöldtömegét és a kukorica hajtáshosszát lemértük. Az I. táblázatban foglalt adagokból megállapíthatjuk, hogy az EPTC-vel, valamint az AD-67- tel antidotált EPTC-vel előkezelt talaja vetett Pioneer 3707 hibridkukorica az EPTC 81/ha és 20 1/ha dózisát is jól tűrte, amíg a gyomként vetett cirok elpusztult. I. táblázat A Pioneer-3707 hibridkukorica hajtáshosszának, zöldtömegének, küllemének alakulása, valamint az Alföldi-1 cirok zöldtömegének változása EPTC-vel való kezelések hatására. kezeletlen EPTC dózisa kontroll 8 1/ha 20 1/ha kukorica hajtáshossza (cm/egyed) 1. vetés 21 8 2. vetés kukorica zöldtömeg (g/egyed) 19 19 19 1. vetés 0,56 0,49-2. vetés bonitálás (kukorica) 0,5 0,59 0,63 1. vetés 1 3-2. vetés 1 1 1 cirok zöldtömeg (g/edény) 1. vetés 0,15 0-2. vetés 0,14 0 0 2. példa Laboratóriumi tenyészedényes kísérletet végeztünk a különböző tiolkarbamát típusú hatóanyagoknak és a bioantidótumnak (NCAIM (p) B 001020 letéti számú Arthrobacter törzssel készített NI- 86/21 EPTC 250 baktériumszuszpenzió) egymásra kifejtett hatásának vizsgálatára. 1) Anyag, eszköz módszer 1.1) Az Arthrobacter Nl-86121 baktérium-szuszpenzió és az NI- 86/21 -EPTC-250 bioantidótum előállítása A talajból izolált, EPTC bontó Arthrobacter NI- 86/21 baktérium tiszta törzstenyészetét 5 ml ferde Nutrient-táptalajra, melynek összetétele: Húskivonat 1 g élesztő 2 g pepton 5 g NaCl 5 g Agár 20 g desztillált víz 1000 ml pH 7,4 oltottuk, majd 3-4 napnál idősebb, de 120 napnál fiatalabb kultúrát használtunk fel. Ezt követően a kémcsőben felszaparodott baktériumot 10 ml sterilizált, desztillált vízbe mostuk. A szuszpenzió így kb. 109 baktériumot tartalmazott milliliterenként. 500 ml-es Erlenmeyer lombikokba 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3