202053. lajstromszámú szabadalom • Stabilizált izotiazolon készítmények
1 HU 202053 B 2 csökkenése alapján számítjuk. A számítást úgy vé- log csökkenés 90%-os pusztulásnak, 2 log csökkenés gezzük, hogy a vizsgálandó vegyülettel nyert MPN/ml 99%-os pusztulásnak, 3 log csökkenés 99,9%-os pusztizes alapú logaritmusából levonjuk a vizes kontroll tulásnak, stb. felel meg. alapján kapott MPN/ml tizes alapú logaritmusát. Egy VIII. táblázat A pusztítási sebesség vizsgálatának eredményei Hatóanyag: (I) általános képletű vegyület 3 rész (R'-Cl, Y-CH3)+1 rész (R'-H, Y-CH3) A minta száma Hatóanyag % Stabilizálószer Stabilizálószer % Oldószer PS szintetikus kemény vízben PS Mg9 tápban 30 perc 4 óra 30 perc 4 óra 5,00 log csökkenés 1. 14 TEOF 9 BCA 0/8 >5,00 250 ppm 32 ppm 2. 14 TEOF 9 BCA 0/8 >5,00 250 ppm 32 ppm 3. 14 magnézium-nitrát 15 víz 0/8 >5,00 250 ppm 32 ppm 4. 1,5 TEOF 2 DPG 1/8 >5,00 250 ppm 32 ppm 5. 1,5 magnézium-nitrát 1,6 VÍZ 0/8 >5,00 250 ppm 32 ppm réznitrát 0,15 34. példa Meghatároztuk a nitráttal stabilizált és az ortoformiáttal stabilizált izotiazolon minimális gátló koncentráció értékét (MIC), az értékeket azonosnak találtuk. A minimális gátló koncentráció vizsgálata A minimális gátló koncentráció (MIC) vizsgálatot a tartósítási alkalmazásra szolgáló vizsgálandó vegyület antimikróbás hatásának értékelésére végezzük. A MIC értéket a következő módon nyerjük. 1% hatóanyagot tartalmazó térfogatú törzsoldatot komplett folyékony tápközegben oszlatunk el úgy, hogy 250 ppm vizsgálandó vegyület kiindulási koncentrációt érjünk el. A vizsgálat kezdetén a hígítási sor minden edénye, kivéve az elsőt, azonos térfogatú vizsgálandó vegyület mentes folyékony tápközeget tartalmaz. Az első edény kétszeres térfogatú, a vizsgálandó anyagot a 250 ppm kiindulási koncentrációban tartalmazó folyékony tápközeget tartalmaz. Az első edényben lévő folyékony tápközeg felét áttöltjük a második edénybe. A második edényben lévő anyagot elegyítjük, és tárfogatának felét a harmadik edénybe visszük át. A cilust 8-12 alkalommal megismételjük a hígítási sor tagjainak kívánt számától függően. így a vizsgálandó vegyületet tartalmazó 25 folyékony tápközeg kétszeres hígítási sorát állítjuk elő. Minden edényben lévő anyagot beoltunk a megfeleő teszt organizmus sejtszuszpenziójával. A baktériumokat húslevesben, a gombákat ferde agaron szaporítjuk a vizsgálandó fajnak megfelelő hőmérsékleten 30 és megfelelő időtartamon át. A szaporodási időszak végén a húslevest a sejtek eloszlatására megkeverjük. Gombák esetén a spórákat úgy mossuk le, hogy az agar felületére vizet pipettázunk, és a spórákat steril kaccsal távolítjuk el. A sejt/spóra szuszpenziókat az 35 inkubációs idő és hőmérséklet, valamint a hígítószer térfogatának szabályozásával standarizáljuk. Amikor az egyes edények tartalmát már beoltottuk, azokat megfelelő hőmérsékleten inkubáljuk, és vizsgáljuk, hogy észlelhető-e bennük növekedés. A minimális 40 gátló koncentráció (MIC) a vizsgált vegyületnek azt a legalacsonyabb koncentrációját jelenti, amely a vizsgált organizmus szaporodását teljesen gátolja. IX. táblázat Minimális gátló koncentráció (ppm hatóanyag) Hatóanyag: (I) általános képleltű vegyületek: 3 rész (R‘=C1, Y=CH3)+1 rész (R*=H, Y-CH3) A minta Ható- Stabilizálószer Stabili- Oldószer Mikroorganizmusok száma anyag % zálószer % Psfl Psae Saur Ecol Calb Anig Apui 1. 14 TEOF 9 BCA 2 8/4 16 4 1 2 1 2. 14 TEOF 9 BCA 2 4 16 8 2/1 2 1 3. 14 magnézium-nitrát 15 víz 2 4 16 8 2 2 1 4. 1,5 TEOF 2 DPG 2 8 16 4 2 2 2 5. 1,5 magnézium-nitrát 1,6 víz 2 4 16 4 2 2 2/1 réz-nitrát 0,15 Psfl-Pseudomonas fluorescens Psal-Pseudomonas aeruginosa Saur-Staphylococcus aureus Ecol-Escherichia coli Calb-Candida albicans Anig-Aspergillus niger Apul-Aureobasidium pullulans 7
