202034. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tetraploid és biszabololdús kamilla populációk előállítására
1 HU 202034 B 2 kamilla esetén ilyen kamilla populációból nyerünk vetőmagvakat és ezeket a vetőmagvakat tetraploidizáljuk (anélkül, hogy a szülő növények biszabolol tartalmára tekintettel lennénk és/vagy ezt ismernénk). Egy tetraploid kiinduló kamilla esetében a vetőmagvakat azután közvetlenül a következő kiválasztási és szaporítási műveleteknek vetjük alá. A megfelelő diploid és tetraploid kiinduló kamillákat az egyes növények vizsgálata révén szelektáljuk ki. Általában egy kiinduló populációból például 1000- 10 000 egyedet kell megvizsgálni ahhoz, hogy néhány olyan egyedet találjunk, amelyek az előbb ismertetett követelményeknek megfelelően olyan magas (-)-abiszabolol tartalommal rendelkeznek, ami ezeket a kiinduló kamilla szerepére alkalmassá teszi. Az így kikeresett egyedekből azután szokásos módon vetőmagvakat nyerünk és ezeket tetraploidizáljuk. A tetraploidizálás lezárása után a tetraploid növényeket a többi, diploidnak maradó növények közül kiszelektáljuk. Az így nyert tetraploid növényekből - adott esetben megelőző szaporítás után - mindazokat a növényeket kiszelektáljuk, amelyeknek 40 °C hőmérsékleten szárított virágai legalább 100 mg % kamazulént, legalább 200 mg % (-)-a-biszabololt és 50 mg %-nál kevesebb további biszaboloidot tartalmaznak. E virágok aratását a tenyészidőnek abban a szakaszában végezzük, amelyben a virágfej valamennyi csővirágának 30-70%-a kinyílt állapotban van. Adott esetben ezután további kiválasztási és szaporítási műveletek következhetnek, amelyek célja például a következő jellemzők, illetve tulajdonságok javítása: Egyidejű virágzási idő, egyenletes tűlevelű elágazás, kis magassági határértékek közötti virágmagasság (azaz jobb alkalmasság a gépi betakarításra), nagy virágfejek, a gyűgyárú jobb eltarthatósága, különleges aromás illat. Amikor már eleve egy tetraploid kamilla fajtából indulunk ki, csupán, azoknak a növényeknek megadott szelektálását végezzük el, amelyeknek 40 °C hőmérsékleten szárított virágai legalább 100 mg % kamazulént, legalább 200 mg % (-)-a-biszabololt és a szokásos biszaboloidokból kevesebb mint 50 mg %-ot tartalmaznak. Ekkor is a virágok betakarítását a tenyészidőnek abban a szakaszában végezzük, amikor a virágfej csővirágainak 30-70%-a már kinyílt állapotban van. Ebben az esetben is további kiválasztási és szaporítási műveletek végezhetők annak érdekében, hogy az előzőekben ismertetett módon további javulásokat érjünk el. Egy különösen előnyös kamillát nyerünk, ha a kamazulén és (-)-a-biszabolol szerinti választást ismert vagy a találmány szerint létrehozott olyan növényeken végezzük, amelyeknek kamazulén tartalma legalább 200 mg %, előnyösen 250 mg %, továbbá (-)-a-biszabolol tartalma legalább 300 mg %, előnyösen 400 mg % a szokásos biszaboloid tartalom pedig 50 mg % alatti. A tetraploidizálás például önmagában ismert módon növényrészek (magvak, gyökerek, sarjcsúcsok, csirák, hónaljrügyek) vagy a diploid kiinduló kamilla növények szövetének kémiai anyagokkal, röntgensugarakkal, gamma-sugarakkal vagy ibolyántúli sugarakkal való kezelése révén történik. Végezhető továbbá lefejező-kallus- módszerrel, portok kultúrával, vagy magas, sőt alacsony hőmérsékletek alkalmazásával is, amelyek a kamilla növényekre, illetve ezek növényrészeire vagy szövetére hatnak. Ezzel kapcsolatban utalunk Wemr Gottschalk „Die Bedeutung der Polyploidie für die Evolution der Pflazen” című könyvére (Gustav Fischer Verlag, Stuttgart, 1976, főként a 13-22 oldalak). A kémiai anyagokkal való tetraploidizálásához kémiai anyagként használhatók a Kolhicin, acenaftén, alkaloidák, mint az atropin, veratrin, nikotin, szangvinarin, benzol derivátumok, difenilek és fenantrének, naftalin derivátumok, difenilamin, tribróm-anilin, para-diklór-benzol, metil-naftokinon, metil-naftohidro- Kinon, szalicilsav és ezzel rokon anyagok, hexaklórhexán, metamfetamin, (hidroklorid), alkil-alkálikarbamátok, mint isopropil-nátrium-karbamát, fenil-uretán, kakodilsavak sói (például nátriumsó), Convallaria glikozidjai, mint konvallarin, konvallatoxin és konvallamarin, heteroauxin, germizan (fenilmercuri-pirokatehin), szerves higanyvegyületek mint etii-higanyfoszfát, etil-higany-klorid, fenil-higany-hidroxid, fenil-higany-dinaftil-metándiszulfonát, kloroform kéjgáz (N2O), valamint ezeknek az anyagoknak keverékei. Ezeken kívül figyelembe vehető, illetve alkalmazható olajpogácsa, komposzt és tehéntrágya is. Ä felsorolt anyagokkal való kezelés például 0 és 35 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen 12 °C és 30 közötti hőmérsékleten, főként 15 °C és 25 °C közötti hőmérsékleten végezhető. Az alkalmazás végezhető például magvak, sarjcsúcsok, gyökerek (főként gyökércsúcsok vagy csírák gyökerei), gyümölcscsomók, levelek vagy száraz vágott felületei, merisztem szövetből levő sejtszuszpenziók, kalluszkultúrák kezelése vagy bazális szárrászekbe való injektálás, továbbá tengelybimbók terébe való injektálás révén is, A kémiai anyagokat általában vizes oldat, gyengén alkoholos (az alkohol tartalom lényegében 5% alatt van) vagy gyengén savas oldat alakjában alkalmazzuk. A gyengén savas oldatok pH értéke például 5,5 és 6,5 között lehet, amely esetben a savasítás kis szénatomszámú szerves alifás savakkal, például esetsavval történik. Ha alkoholos oldatokat használunk, ezek is lehetnek gyengén savasak. Ezekben az oldatokban a kémiai anyagok koncentrációja például 0,01-0,5% , előnyösen 0,02-0,2%, főként 0,05-0,1% lehet. Gázállapotú anyagok is használhatók, adott esetben például 1-10 bar nyomáson. A kezelési időtartam például 1-36 óra, előnyösen 2- 12 óra, főként 4-6 óra lehet. A leghatásosabb koncentrációkat, valamint időtartamokat célszerű mindig előkísérletekkel meghatározni. A kolhicinnel való kezelés különösen előnyösen például 0 és 35 “C közötti hőmérsékleten, előnyösen 12 és 30 °C közötti hőmérsékleten, főként 15 és 25 °C közötti hőmérsékleten. Az előkísérletek például úgy végezhetők, hogy a kiinduló diploid kamilla magvait egy 0,01-0,2%-os, előnyösen 0,02-0,1%-os, főként (7,05%-os kolhicin oldatban duzzadt állapotba hozzuk vagy a kicsírázott, 5-7 nap idős, jól kifejlődött, diploid kiinduló kamillából nyert csírákat (a csíralevelekkel lefelé) 0,01-0,2%-os, előnyösen 0,02-0,1 %-os, főként 0,05%-os kolhicin oldatba merítjük. Az utóbbi eljárásnál a környező atmoszférának közel 100% relatív nedvességtartalmúnak kell lenni. A kolhicin kezelés időtartama például 3-36 óra, előnyösen 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
