202034. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tetraploid és biszabololdús kamilla populációk előállítására
1 HU 202034 B 2 A találmány tárgya eljárás új tetraploid és biszabololdús, javított tulajdonságú kamilla populációk előállítására, amely révén az értékes hatóanyagokban gazdagabb kamilla fajta hozható létre, mint az eddig ismert eljárások alkalmazása révén. A valódi kamillák (a Matricaria chamomilla L.-lel rokon Chamomilla recutita (L.) Rauschert) virágfejeit ezeknek antiflogisztikus és szpazmolítikus hatása következtében gyógyászati célokra széles körben alkalmazzák és ezek a növényi gyógyszerkincs fontos részét képezik. Gyógyászati szempontból különösen fontosak az (-)-a-biszabolol és a kamzulén hatóanyagok, ezért egy jó kamillagyógyszerben e két hatóanyagból a lehető legtöbbnek kell lenni. A természetben előforduló diploid kamillák hatóanyag tartalma nagymértékben változó. így például a fontos kamazulénból és (-)-ct-biszabololból esetleg csak az egyik van a növényben, egyes esetekben a növényben egyik sem található, illetve együtt is csak igen csekély a mennyiségük, amikor is az éterikus olaj fő komponense a kevéssé hatásos bizaboloidokból (biszabolonoxid A vagy B, biszabololoxid A) áll. A DEGUMILL elnevezés (2 402 802 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi leírás, Degumill Német Demokratikus Köztárság-beli fajtavédelem, 1 035 096 számú olasz szabadalmi leírás) olyan kamilla fajta ismert, amelynek egyidejűleg mind az (-)-a-biszabolol, mind a kamazulén tartalma nagy. E DEGUMILL kamilla fajtának kamazulén- és biszabolol-tartalma azonban csak akkor állandó, ha az olyan kamilla fajtákkal való keresztezést, illetve idegen beporzást megakadályozzuk, amelyeknek kamazulén és biszabolol tartalma lényegesen alacsonyabb. Ilyen szempontból a vadkamillák, az ezekkel való kereszteződés, illetve idegen beporzás veszélye majdnem mindig fenáll, mert vadkamilla gyakorlatilag mindenütt előfordul. Ezenkívül ismertek különböző tetraploid kamilla fajták (például: BODEGOLD, DDR; POHORELICKY, CSSR; ZLOTY LAN, Lengyelország; BK-2, Magyarország). Ezeknek a tetraploid kamilla fajtáknak kielégítő a kamazulén tartalma, azonban bennük az igen fontos (-)-a-biszabololból csak igen kis mennyiség van és e helyett a szokásos biszaboloidok (biszabololoxid A és B, valamint biszabolonoxid) vannak ezekben a kamilla fajtákban, amelyek az éterikus olajnak több mint felét teszik ki. A találmány feladata olyan eljárás kidolgozása, amely révén előnyös és javított tulajdonságokkal rendelkező új tetraploid kamilla fajta állítható elő. Azt találtuk, hogy a természetben általánosan előforduló kamilla populációkból és diploid vagy tetraploid tenyésztett kamillákból meghatározott kezelési, illetve eljárási műveletekkel biszabololdús tetraploid kamilla növények hozhatók létre, amelyek egyrészt már nem hajlamosak a természetben előforduló kamillákkal való idegen beporzódásra, másrészt egyidejűleg nagy kamazulén és (-)-a-biszabolol-tartalmat mutatnak úgy, hogy az (-)-a-biszabolol a kamazulén tartalmat jelentősen meghaladja és egyidejűleg a további biszaboloidok gyakorlatilag nincsenek, illetve ezeknek mennyisége igen csekély. Annak is igen nagy a jelentősége, hogy az eljárás révén nyert kamillában a fő hatóanyagok, az (-)-abiszabolol és a kamazulén- tartalom állandó, azaz minden szaporítás után azonos marad. A találmány szerinti eljárást, az jellemzi, hogy egy diploid vagy tetraploid kamilla populáció - kivéve a DEGUMILL fajtanevű diploid kamillát - 1000 és 10 000 közötti számú növényegyedeiben, mindenkor az éterikus olajban meghatározzuk az (-)-ct-biszabolol-tartalmat és kiszelektáljuk azokat a kamillanövényeket, amelyeknek 40 °C hőmérsékleten szárított virágai legalább 100 mg % kamazulént, legalább 50-100 mg % (-)-a-biszabololt és 50 mg %-nál kevesebb további biszaboloidot tartalmaznak, ezeket a kamillanövényeket a kiinduló populációból különválasztva továbbszaporítjuk és A. ezekből a növényekből legalább 10 egyedet kiszelektálunk, amelyek egyidejű virágzási időt, 20 és 40 mm közötti virágfej nagyságot és a szárazanyag-tartalomra vonatkoztatva legalább 100 mg % kamazulén, legalább 200 mg % biszabolol és kevesebb, mint 50 mg % további biszaboloid hatóanyagtartalmat mutatnak, és adott esetben ezt követően az így kiszelektált diploid vagy tetraploid tetraploid növényeket klónoljuk, amely klónolást vagy a) dugványos szaporítással végezzük oly módon, hogy növényeket visszavágjuk, 12 és 14 °C közötti hőmérsékleten újrahajthatjuk és az így nyert rövidhajtásokat magas relatív légnedvesség mellett és 12- 18 °C léghőmérsékleten tőzeg-homok-föld ültetve gyökereztetjük, vagy b) merisztem szaporítással végezzük oly módon, hogy osztódásképes szövetrészeket, így például hajtáscsúcsokat vagy hónaljrügyeket 15 °C és 30 °C közötti hőmérsékleten erre szokásos tápanyagban kezelünk, úgy, hogy járulékos szervek (járulékos rügyek, hajtások, gyökerek) képződnek, mimellett ezt a szaporítást kívánt esetben tápközegben többször is megismételjük, illetve csak egy táptalajban végezzük, és ezután az így nyert növényeket az előbbiekben ismertetett módon szintén nagy relatív légnedvesség és 10-18 "C léghőmérséklet mellett tovább termesztjük és szaporítjuk, B. az A szerint kapott növényeket elkükönített körülmények között elvirágozni hagyjuk és több hetes időtartamon keresztül vetőmag nyerésére folyamatosan learatjuk azokat a virágfejeket, amelyek olyan vegetációs stádiumban vannak, amikor egy virágfej összes csöves virágjának 30-70%-a nyitva van, a nyert virágfejeket 20 és 30 °C közötti léghőmérsékleten szárítjuk, az így nyert vetőmagvakból - elszigetelt körülmények között, 18 és 24 °C közötti nappali hőmérsékleten és 12 és 14 ° közötti éjszakai hőmérsékleten, adott esetben járulékos világítás mellett - utódokat nevelünk és az így kapott növényekből kiszelektáljuk azokat, amelyek egyidőben virágoznak, egyenletes tőlevelű elágazásiak, virágfejeik nagysága 2Ö és 40 mm között van, valamint hatóanyagként legalább 100 mg % kamazulént, legalább 200 mg % (-)-a-biszabololt és kevesebb mint 50 mg % egyéb biszaboloidot tartalmaznak, az így kiszelektált növényekből ismét vetőmagvakat nyerünk és adott esetben ezekből a vetőmagvakból különböző termőhelyeken nevelünk és az előbbiekben ismertetett követelmények alapján ezeket szelektáljuk, C. a B. szerinti műveleteket 3-5-ször megismételjük, D. a C. szerint kapott vetőmagvakból elkülönített körülmények között 18 és 24 °C közötti nappali 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
