201966. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hialuronsav-észterek és sóik, ezeket hatóanyagként vagy hordozóként tartalmazó gyógyszerkészítmények, valamint hialuronsav-észterekből képzett filmek és szálak előállítására
HU 201966 B A találmány tárgya eljárás a találmány a hialuronsav új észtereinek és ezek sóinak előállítására. Az új vegyületek a gyógyászatban és a kozmetika területén, valamint a biológiailag lebontható műanyagok között hasznosíthatók. Az utóbbiakat tartalmazó, különböző célú készítmények előállítása szintén a találmány tárgykörébe tartozik. Ilyenek különösen különféle új, többek között sebészeti célra felhasználható fóliák és szálak lehetnek. A „hialuronsav” (a következőkben „HY”-ként is jelöljük) kifejezést az irodalomban egy különböző molekulatömegű savas poliszacharid jelölésére használják, amely D-glükuronsav és N-acetil-D- glükozamin maradékokból épül fel, és amely természetben sejtek felületén, gerincesek kötőszövetének bázisos extracelluláris anyagaiban, ízületek ízületi nedveiben, a szem csarnokvizében, az emberi köldökzsinór szövetében és a kakastaréjban fordul elő. A hialuronsav fontos szerepet játszik a biológiai szervezetben, először is sok szövet sejtjeinek mechanikai támaszaként (ilyen a bőr, az bak, az izmok és a porcok), és ennek következtében a sejtközi mátrix fő komponense. De a hialuronsav más funkciókat is betölt a biológiai folyamatokban, így a szövetek hidratálásában, nedvesítésében, sejt migrációban, a sejt funkcióban és differenciálódásban. (Lásd például Balázs és munkatársai, Cosmetics and Toiletries, 5/84,8-17). A hialuronsav a fentemlített természetes szövetekből, így kakastaréjból, de bizonyos baktériumokból is extrakcióval nyerhető ki. Manapság azonban a hialuronsav már mikrobiológiai módszerekkel is előállítható. Az extrakcióval kapott teljes hialuronsav molekulatömege 8-13 millió körül van. Azonban a poliszacharid molekulatömege különböző fizikai és kémiai faktorok hatására elég könnyen csökkenthető. Ilyen tényezők lehetnek mechanikai hatások vagy sugárzás, hidrolízis, oxidáció vagy enzimatikus reagensek. Ennek következtében a természetes extraktumok szokásos tisztítási eljárásai során kisebb molekulatömegű, degradált frakciók keletkeznek (lásd Balázs fent idézett közleményét). A hialuronsavat, molekuláris frakcióit és a megfelelő sókat gyógyászati célra alkalmazzák, és említik kozmetikai célú felhasználási lehetőségeiket is (lásd például Balázs fent említett cikkét és a 2.478.468. számú francia szabadalmi leírást). Terápiás célra a hialuronsavat és sóit elsősorban ízületi bániaknak kezelésére alkalmazzák, például az állatgyógyászatban lovak ízületi bántalmainak kezelésére (Acta Vet. Scand. 167.379 /1976/). Természetes szövetek és szervek kisegítő és helyettesítő terápiás reagenseként a hialuronsavat és molekuláris frakcióit, valambt ezek sóit a szem-sebészetben alkalmazzák (lásd például Balázs és munkatársai, Modern Problems és Ophthalmology, IQ, 1970, 3, E.B. Strieff. S. Karger kiadók, Bázel; Viscosurgery and the Use of Sodium Hyaluronate During Intraocular Lens Implantation, az International Congress and First Film Festival on Intraocular Implantation, Cannes, 1979. konferencián elhangzott előadás; 4.328.803. számú USA-beli szabadalmi leírás, mely a HY szemészeti felhasználási lehetőségeinek összefoglalását tartalmazza és a 1 4.141.973. számú USA-beli szabadalmi leírás). A 49.143A 83. számú olasz szabadalmi bejelentésben (1983. október 11.) a hialuronsavnak olyan molekulatömegű frakcióját ismertetik, amely például nátriumsó formájában, intraokuláris és intraartikuláris injekciók céljára használható, amelyek a szem belső folyadékainak helyettesítésére és artopatiás terápiás célra szolgálnak. A hialuronsav számos, gyógyászati és sebészeti eszközök készítésére használt polimer anyag, így poliuretánok, poliészterek, poholefmek, poliamidok, polisziloxánok, vinil és akril polimerek és karbon szálak adalékaként is felhasználható, mert ezeket az anyagokat biológiailag kompatibilissé teszi. Ebben az esetben a HY vagy egyik sója hozzáadása például úgy történik, hogy az ilyen anyagok felületét bevonják, vagy a hialuronsavat diszpergálják ezekben vagy e két eljárás kombinációjának alkalmazásával. Ilyen anyagok felhasználhatók például különböző egészségügyi és gyógyászati eszközök, így szívszelepek, intraokuláris lencsék, és -csipeszek, pacemakerek és hasonló eszközök készítése során (lásd a 4.500.676. számú USA-beli szabadalmi leírást). Bár a „hialuronsav” kifejezést gyakran nem megfelelő értelemben használják, mint a fentiekből látható, a kifejezés a D-glükuronsav és az N-acetil-D- glükozamid váltakozásával felépülő, változó molekulatömegű poliszacharidokat, sőt ezek degradált frakcióit is jelöli, és bár ennek következtében a többes számba tett, „hialuronsavak” kifejezés tűnhetne helyesnek, a következőkben maradunk az egyes számú formánál, beleértve a molekuláris frakciókat is, és gyakran a „HY” jelölést használjuk ennek a gyűjtőfogalomnak a rövidítésére. A hialuronsav észterei közül az irodalomban említés történik egy nagy molekulatömegű hialuronsav metilészteréről, amelyet a humán köldökzsinórból extrakcióval nyertek (Jeanloz és munkatársai, J. Bioi. Chem. 186. 495-511 /1950/ és Jager és munkatársai, J. Bacteriology, 1065-1067 119191). Ezt az észtert úgy kapták, hogy a szabad hialuronsavat éteres oldatban diazometánnal kezelték, és a kapott termékben a karboxilcsoportok lényegében teljes egészében észterezett formában kerültek. Továbbá a HY körülbelül 5 és 15 közötti diszacharid egységet tartalmazó oligomerjeinek metilésztereit is leírták már (lásd Biochem. J. 167. 711-716 119111). Ugyancsak ismert a hialuronsavnak egy olyan metilésztere, amely a hidroxil alkohol-csoportok egy részének metilalkoholos észterezésével készült (Jeanloz és munkatársai, J. Bioi. Chem. 194. 141-150 /1952/; és Jeanloz és munkatársai, Helvetica Chimica Acta 262-271 /1952/). Az említett észterekkel kapcsolatban semmiféle biológiai hatást és ennek megfelelően semmiféle gyógyászati alkalmazást nem írtak le. A találmány a hialuronsavnak az észtercsoportban 2-18 szénatomos alkilcsoportot, (1-4 szénatomos alkoxi)-karbonil-(l-4 szénatomos alkil)-fenil(1-4 szénatomos alkil)-, fenil-(2-4 szénatomos alkenil)-, helyettesítetlen vagy egy 1-4 szénatomos alkilcsoporttal, 1-3 metil- vagy metoxicsoporttal vagy halogénatommal helyettesített benzilcsoportot vagy valamely kortikoszteroid alkohol maradékát tartalmazó olyan észtereinek az előállítására 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
