201962. lajstromszámú szabadalom • Eljárás renin-gátló dipeptidek és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 201962 B mérsékleten keverjük. A csapadékot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel és telített nátrium-klorid oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (3,8 g) közepes nyomású oszlopkromatográfiával (Kiesel-gélen metilénklorid/metanol 98:2, 95:5, 9:1 eleggyel) tisztítjuk, így 1,8 g (68%) cím szerinti vegyületet kapunk. Rf = 0,46 (metilén-klorid/MeOH 9:1) MS (FAB): 827 (M +1). le) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Phe- His(DNP)-amino)-3S-hexanol 72 mg l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Boc- Phe-His(DNP))-amino-3S-hexanolt 0-5 °C hőmérsékleten 2 ml jéghideg trifluor-ecetsawal elegyítünk, és két órán keresztül ezen a hőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük. Kitermelés 83 mg cím szeirnti vegyület bisz(trifluor-acetát) formájában. lf) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butilamino-tio-karbonil-Phe-His(DNP-amino]-3S-hex anol 88 mg (0,092 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)- 2S-[N-(Phe-His(DNP))-amino]-3S-hexanolt (le példa) 2 ml abszolút dimetil-formamidban oldunk, majd az oldathoz 0,06 ml (0,42 mmól) trietilamint és 0,061 ml (0,46 mmól) terc-butil-izotiocianátot adunk, a reakcióelegyet 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, egy hétvégén keresztül állni hagyjuk, majd egy órán keresztül 40 °C hőmérsékleten keverjük, majd azonos mennyiségű terc-butilizotiocianáttal elegyítjük és további 2 órán keresztül 40 °C hőmérsékleten, majd 9 órán keresztül 60 CC hőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután jeges vízre öntjük, etU-acetáttal extraháljuk és az egyesített extraktumot telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel és telített nátriumklorid oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (85 mg) MPLC segítségével Kiesel-gélen metilénklorid/MeOH 95:5,9:1 eleggyel tisztítjuk. Kitermelés: 39,3 mg (51%) cím szerinti vegyület. Rf = 0,39 (metilén-klorid/MeOH 9:1) MS (FAB): 842 (M +1). lg) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butilamino-tio-karbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanol 39 mg (0,046 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)- 2S-[N-(terc-butil-amino-tiokarbonil-Phe-His(D NP))-amino]-3S-hexanolt (lf példa) 5 ml acetonitrilben 0,1 ml (1 mmól) tiofenollal elegyítünk és 4 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután vákuumban bepároljuk és a nyersterméket MPLC segítségével Kiesel-gélen metilén-klorid/MeOH 95:5 és 9:1 eleggyel tisztítjuk. így 24,3 mg (78%) cím szerinti vegyületet kapunk. Rf = 0,14 (metilén-klorid/MeOH 9:1) MS (FAB): 676 (M +1). 7 2. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-am ino-tiokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol 2a) Boc-Phe-Nva-OMe 15.0 g (0,056 mól) Boc-Phe-OH és 9,4 g (0,056 mól) Nva-OMe-hidroklorid 250 ml abszolút metilén-kloridban felvett oldatához jeges hűtés közben először 38,6 ml (0,28 mól) abszolút trietilamint, majd 36,4 ml propán-foszfonsavanhidridet (50 tömeg%-os, metilén-kloridban) csepegtetünk. A reakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. A hidrolízishez jeges vízre öntjük, 2 órán keresztül intenzíven keverjük, a szerves fázist elválasztjuk és 10 tömeg%-os citromsav oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Kitermelés 20,8 g (98%) cím szerinti vegyület. Rf = 0,69 (metilén-klorid/MeOH 9:1) MS (DCI): 378 (M +1). 2b) Boc-Phe-Nva-OH 20.1 g (0,053 mól) Boc-Phe-Nva-OMe (2a példa) 30 ml vízben és 30 ml dioxánban felvett szuszpenziójához szobahőmérsékleten 2,5 g (0,106 mól) lítium-hidroxidot adunk és három órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 10 tömeg%-os nátrium-hidrogén-szulfát oldattal megsavanyítjuk, a terméket szűrjük és diizopropiléterrel eldörzsöljük. Kitermelés: 19,1 g (98%) MS (DCI): 364 (M +1). 2c) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Boc-Phe- Nva)-amino)-3S-hexanol 1,7 g (3,36 mmól) 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidrokloridból (le példa) és 1,22 g (3,36 mmól) Boc-Phe-Nva-OH-ból (2b példa) az ld példával analóg módon 0,8 g cím szerinti vegyületet kapunk. Rf = 0,53 (metilén-klorid/MeOH 9:1) MS (FAB): 623 (M +1) 2d) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Phe-Nva)amino)-3S-hexanol 97 mg l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Boc- Phe-Nva)-amino)-3S-hexanolból (2c. példa) az le példával analóg módon 92 mg cím szerinti vegyületet kapunk dihidroklorid formájában. 2e) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butilamino-tiokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol 101 mg (0,17 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)- 2S-[N-(Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol (2d példa) 4 ml abszolút dimetil-formamidban felvett oldatát szobahőmérsékleten egymás után 104 jU (0,73 mmól) frissen desztillált trietilaminnal és 22,5 jxl (0,17 mmól) terc-butil-izotiacianáttal elegyítjük. A reakcióelegyet egy éjszakán keresztül keverjük, majd ismét 10 púi (0,076 mmól) terc-butilizotiocianátot adunk hozzá, és további 8 órán keresztül szobahőmérsékelten keverjük. Az oldószert magas vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot etilacetátban felvesszük, telített nátrium-hidrogén-8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
