201950. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-hidroxi-3-(N-metil-N-propil-amino)-propán-1, 1-difoszfonsav és sói, valamint az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 201950 B juk meg, a pirofoszfátra (Mrei = 1) vonatkoztatva. 1. példa 1-Hidr oxi-3- (N-metil-N-propil-amino) -propá n-l,l-difoszfonsav 5 18 g 3-(N-metil-N-propilamino)-propilamino)propionsavat összekeverünk 15 gfoszforossawal és 32 ml foszfor-trikloriddal 90 ml klór-benzolban, 100 °C-on 12 órán át állni hagyjuk. Ezután az oldószert dekantálással eltávolítjuk és a maradékot 10 250 ml 6n hidrogén-klorid-oldattal 2 órán át keverjük, visszafolyató hűtő alkalmazásával. A kevés oldhatatlan maradékot szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet bepároljuk és Amberlite-oszlopra (IR120, H+forma) visszük. A vízzel való eluálást elektroforeti- 15 kusan követjük. A kívánt frakciókat egyesítjük, bepároljuk, aceton/metanol eleggyel kikeverjük és a kapott kristályokat elkülönítjük. íly módon 14, lg nyersterméket kapunk. Víz/metanol elegyből végzett átkristályosítás után 9,8 g = 20 27% analitikai tisztaságú terméket kapunk (x 1,5 H20). Mrci: 0,4. Olvadáspont 96-120 °C (108 °C-on bomlik). A kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő: 25 N-metil-N-propil-amint [JACS 22,4720 (1957)] toluolban akrilsav-metil-észterrel 1:3 mólarányban reagáltatunk és a 84%-os kitermeléssel kapott észtert desztillálás nélkül 1 n nátrium-hidroxid-oldattal elszappanosítj uk. íly módon 92%-os kitermelés- 30 sei az olajszerű savat kapjuk, amit további tisztítás nélkül alkalmazunk. 2. példa 10 g 3-(N-metil-N-propil-amino)-propionsavat 35 80 °C-on 10 perc alatt 11,4 g foszforossawal összeolvasztunk. Eltávolítjuk az olajfürdőt, lassan 12 ml foszfor-trikloridot csepegtetünk hozzá és további 16 órán át 80 °C-ra melegítjük. Ezután a foszfor-triklorid feleslegét ledesztillál- 40 juk, hozzáadunk 140 ml 6 n hidrogén-klorid-oldatot és 100 °C-on 3 órán keresztül keverjük. A keletkezett kis mennyiségű oldhatatlan részt szűréssel eltávolítjuk, az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, és ioncserélőn kromatográfiásan tisztítjuk, Amber- 45 lite IR-120-on (H+-forma), az 1. példában leírtak-3 kai azonos módon. Mrei: 0,4. Kitermelés 6,95 g= 35% (x 1,4 H20). Olvadáspont 96-102 °C (108 °C- on bomlik). 3. példa 15 g 3-(N-metil-N-propil-amino)-propionsavat, a 2. példában leírtakkal analóg módon eljárva, 17 g H3P03-mal melegítünk és 19 ml POCb-mal elegyítünk. 80 °C-on 18 órán át végzett kezelés után a POCb feleslegét ledesztilláljuk és 210 ml 6n hidrogén-klorid-oldat hozzáadásával és 100 °C-ra való kétórás melegítéssel hidrolizálunk. A nyersterméket (az 1. példában leírtakkal analóg módon eljárva [Amberlite IR-120 (H+-forma)] ioncserélőn kromatográfiásan tisztítjuk. Miéi: 0,4. Kitermelés: 16,2 g= 54% víz/metanol elegyből végzett átkristályosítás után. Op.: 96-102 °C (108 °C-on bomlik). Az l-hidroxi-3-(N-metil-N-propil-amino)-propán-l,l-difoszfonsav mono- illetve dinátriumsóját a szabad savat egy, illetve két egyenértéknyi mennyiségű nátrium-hidroxiddal vagy nátriumhidrogén-karbonáttal reagáltatva állítjuk elő. A mononátriumsó olvadáspontja 160 °C (bomlik), a dinátriumsó 365 °C fölött van. Vizsgálati eredmények Mintegy 160 g tömegű Wistar-himpatkányokat az 1. nap thyroparthyroidektomizáltunk. Az 5. nap ellenőriztük az operáció sikerét oly módon, hogy egy éjszakai böjtölés után meghatároztuk a kalcémiát. Ettől a naptól kezdve valamenyi állat ugyanolyan mennyiségű eledelt kap. Ezen túlmenően, 3 napos intervallummal szubkután injekciókat kapnak, amelyek közül az egyik 25 p.g szintetikus retinoidot (hiperkalcémia indukálására), a másik a vizsgálandó difoszfonátot tartalmaz. Ezen túlmenően az összes állat a kezelés első és utolsó napján 2 p.g tiroxint kap. 24 órával az utolsó retinoid — és difoszfonát-injekció után és egy éjszakai böjtölés után retroorbitálisan vért veszünk, éteranesztézia közben. A plazma-kalcium-koncentrációját atomabszorpcióval határozzuk meg. Az eredményeket a következő táblázat mutatja. 4 mgP/kg A vegyület jele 0,001 0,01 0,1 1,0 10 A 0 + + + B 0 + + + + + C + + + + D (+) + + + E (+) + + F + + + + + + + + + 0= a hiperkalcémia csökkenése — 0,99- től + 0,99 mg%-ig ( + )= hiperkalcémia csökkenése 1,0-tól 1,99 mg%-ig + = a hiperkalcémia csökkenése 2,0-tól 2,99 mg%-ig + + = a hiperkalcémia csökkenése 3,0-tól 3,99 mg%-ig 3
