201806. lajstromszámú szabadalom • Eljárás géntechnológiai uton módosított mikroorganizmusok által termelt tisztított növekedési hormon kinyerésére
HU 201806 B komponensektől. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás állati növekedési hormon vagy analógja kinyerésére, azzal jellemezve, hogy a megfelelően transzformál baktériumsejtekből indulunk Id. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás szarvasmarha növekedési hormon vagy analógja kinyerésére, azzal jellemezve, hogy a megfelelően transzformált baktériumsejtekből indulunk Id. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás olyan szarvasmarha növekedési hormon-analóg kinyerésére, amely a természetes szarvasmarha növekedési hormon fenilalanin-formájának N-terminálisához adva Met-Asp-Gln aminosav-szekvendát is tartalmaz, azzal jellemezve, hogy Escherichia coli ATCC 39806 törzs baktériumsejtjeiből indulunk ki. 5. A 3. igénypont szerinti eljárás olyan szarvasmarha növekedési hormon-analóg kinyerésére, amely a természetes szarvasmarha növekedési hormon fenilalanin-formájának N-terminálisához adva egy metionin-gyököt is tartalmaz, azzal jellemezve, hogy Escherichai coli ATCC 39785 törzs baktérium-sejtjeiből indulunk ki. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás emberi növekedési hormon vagy analógja kinyerésére, azzal jellemezve, hogy a megfelelően transzformált baktériumsejtekből indulunk ki. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás olyan emberi növekedési hormon-analóg kinyerésére, amely a természetes emberi növekedési hormon Met14 helyénél kezdődik, azzal jellem esve, hogy Escherichia coli ATCC 39386 törzs baktérium-sejtjeiből indulunk ki. 8. A 6. igénypont szerinti eljárás olyan emberi növekedési hormon-analóg kinyerésére, amelyben a természetes emberi növekedési hormon aminosav-szekvendáját egy metionin-csoport előzi meg az N-terminálisnál, azzal jellemezve, hogy Escherichia coli ATCC 39384 törzs baktérium-sejtjeiből indulunk ki. 9. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a megfelelően transzformált baktériumsejtekből indulunk ki. 10. A 9. igénypont szerinti eljárás olyan sertés növekedési hormon-analóg kinyerésére, amely a természetes sertés növekedési hormon fenilalaninformájának N-terminálisához adva egy metioningyököt is tartalmaz, azzal jellemezve, hogy Escherichia coli ATCC 39804 törzs baktérium-sejtjeiből indulunk ki. 11. A 2. igénypont szerinti eljárás csirke növekedési hormon vagy analógja kinyerésére, azzal jellemezve, hogy a megfelelően transzformál baktériumsejtekből indulunk ki. 12. A11. igénypont szerinti eljárás olyan csirke növekedési hormon-analóg kinyerésére, amely a természetes csirke növekedési hormon fenilalaninformájának N-terminálisához adva egy metioningyököt is tartalmaz, azzal jellemezve, hogy Escherichia coli ATCC 39792 törzs baktérium-sejtjeiből indulunk ki. 13. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a baktérium-sejteket vagy fragmenseit a sejtfal szétzúzása előtt a fermentléből tartjuk szuszpenzióban, vagy megfelelő, semleges pH-jú 19 pufferolt oldatban szuszpendáljuk. 14. A 13. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szuszpenzió pH-ját 7,4-re állítjuk be. 15. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a sejtfal szétzúzását mechanikus úton végezzük. 16. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lizátumot megfelelő mennyiségű ionmentesített vízzel hígítjuk, mielőtt a 2. lépés szerint a szemcsés anyagot elkülönítjük. 17. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a 2. vagy 5. lépésben az elkülönítést centrifugálással végezzük. 18. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a folyadék és szilárd anyagok közötti kontaktus biztosítására végzett kezelést egy poliszacharidok emésztésére képes enzim segítségével végezzük. 19. A 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy enzimként lizozimot alkalmazunk. 20. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a 4. lépésben a folyadék és a szilárd anyagok közti kontaktus elérésére ultrahangos kezelését alkalmazunk. 21. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy folyadék-szilárd anyag kontaktus biztosítására végzett kezelést felületaktív anyag jelenlétében végezzük. 22. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az 5. lépés szerint a folyadék-szilárd anyag kontaktust szolgáló szuszpenzióból elkülönített részben vagy teljesen kicsapott anyagot megfelelő mennyiségű alkalmas közegben újra szuszpendáljuk, és az ijgy készített szuszpenziót a 6. lépés szerinti oldatba vitel előtt megfelelő körülmények között kezeljük a folyadék és a szilárd anyagok közti kontaktus elérésére és az így létrejött kicsapott anyagot elkülönítjük a folyadékszilárd anyag kontaktust szolgáló szuszpenzióból. 23. A 22. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy alkalmas közegként pufferolt vagy nem pufferolt vizes közeget alkalmazunk. 24. A 22. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a végül létrejött kicsapott anyagot legalább még egyszer újra szuszpendáljuk, kezeljük a folyadék és a szilárd anyagok közti kontaktus elérésére és az így létrejött kicsapott anyagot elkülönítjük. 25. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a csapadéknak a 9,0-12,0 közti pH értéken végzett oldatba vitele után a pH értéket 10,5-re állítjuk be. 26. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a 6. lépésben nyert oldathoz nátriumborát megfelelő koncentrációjú vizes oldatának alkalmas mennyiségét adjuk. 27. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hormont vagy analógját tartalmazó derített oldat elérésére a 6. lépésben nyert oldatot derítjük az oldatot kezelve megfelelő körülmények között a folyadék és szilárd anyagok közti kontaktus elérésére, a folyadék-szilárd anyag kontaktust szolgáló oldatot megfelelő körülmények közt centrifugálva, a felülúszó folyadékot elkülönítve és a folyadékot szűrve. 20 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
