201775. lajstromszámú szabadalom • Eljárás interferon tisztítására
HU 2017^5 B i) a negatív töltésű szennyező proteineket gyengén bázisos anioncserélő gyantával eltávolítjuk, és adott esetben az oldatot koncentráljuk; ii) a pozitív töltésű szennyező proteineket gyengén savas kationcserélő gyantával eltávolítjuk, és adott esetben az oldatot koncentráljuk; iii) a kisebb és nagyobb molekulatömegű anyagokat gélszűréssel eltávolítjuk; és kívánt esetben az így kapott interferon hatású tisztított polipeptidet tartalmazó oldatot dializáljuk, és kívánt esetben koncentráljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy interferon hatású polipeptidként GIF146 vagy GIF143 jelű, humán gamma interferon aktivitással rendelkező polipeptidet vonunk ki. 3. Az 1. vagy 2, igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az interferon hatású polipeptidet a W3110/pIN5T4N143 jelű törzs vagy a W3U0/pIN5T4 jelű törzs tenyészetéből vonjuk ki. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzaljellemezve, hogy cinksóként 0,5- mmól/liter cink-kloridot vagy rézsóként 0,05-3 mmól/liter réz-szulfátot alkalmazunk. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a poli(etilén-imin)-t 0,5— 21 12 1,5 tömeg/térfogat% koncentrációban használjuk. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy anioncserélő gyantaként egy kvaterner amino-etil gyantát, kationcserélő gyantaként egy karboxi-metU gyantát, gélszűrőként oephadex G-100-at vagy Sephacryl S-200-at használunk. 7. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az ioncseréket és a gélszűrést oszlopkromatográfiás módszerrel végezzük. 8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a negatív és/vagy pozitív töltésű szennyező proteinek eltávolítása után az interferon hatású polipeptidet tartalmazó oldatot ammónium-szulfátos lecsapással vagy ultraszűréssel koncentráljuk. 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dialízist ciszteint tartalmazó pufferral szemben oxigénmentes körülmények között végezzük. 10. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dializált oldatot ultraszűréssel koncentráljuk. 22 5 10 15 20 25
