201771. lajstromszámú szabadalom • Eljárás amikacin előállítására
HU 201771 B A keveréket 1 éjjelen át szobahőmérsékleten erőteljesen kevertetjük, majd a szerves oldószert 40 °C alatti hőmérsékleten ledesztilláljuk és a pH-t ecetsavval 4,2-re állítjuk be. A három benziloxi-karbonil-védőcsoport eltá- 5 volítását a szokásos módszerrel végezzük, az oldathoz 50 g 2,5%-os Pd/C-t adva és szobahőmérsékle-7 ten, csepegtetéssel 50 ml hangyasavat adagolva. A szenet Decalite-n kiszűrjük és vízzel mossuk. Áttetsző oldatot kapunk, amely a Táblázatban megadott reakcióterméket tartalmazza az acilezési fázisban beállított különböző pH értékek függvényében. 8 1. Táblázat pH érték víztérfogat (ml) hidrogenolízisután amikacin mg/ml; g mg/ml BBK11 mg/ml DI(HABA)KANA mg/ml kanamicin sztöchiomerikus amikacin kitermelés az amikacinszulfát tömege (g) (IV)-ből 7 1820 12,4; 22,7 0,466 2,85 2,1 61,1% 26,7 6 1950 12,3; 24,02 0,256 1,05 3,49 64,7% 28,97 5,5 2100 1056; 22,18 0,166 0,71 4,53 59,7% 25,44 5 2300 9,52; 21,9 0,207 0,6 4,4 59,2% 25,76 4,5 1840 9,9; 18,35 0,28 0,46 6,7 49,4% 21,58 Az oldatot gyengén savas alakban jelenlevő, Zeolit típusú (a Rohm és Haas cég védjegye) ioncserélő gyantán adszorbeáltatjuk, a pH 7,5-re való beállítása után. A kanamicint 0,5 N-1,5 N lineáris ammónia grádiens alkalmazásával eluáljuk. Ez lép ki elsőként az oszlopból, majd követi az amikacin. A 300-350 frakciót összegyűjtjük és vákuumban betöményítjük, az ammónia teljes eltávolítására és 20% amikacin-végkoncentráció elérésére. A pH-t 50 tömeg/térf.% kénsavval 2,5-re állítjuk be és aktívszenes kezelést végzünk. Szobahőmérsékleten 30 percen át végzett kevertetés után a szenet kiszűrjük, a maradékot mossuk és az amikacin-diszulfátot metanollal kicsapjuk. 2 órán át szobahőmérsékleten végzett kevertetés után a kapott fehér színű szilárd anyagot szűrjük. Mosás és vákuumban 45 °C-on 16 órán át végzett szárítás után ennek súlya az 1. Táblázat utolsó oszlopában megadott értéknek felel meg. Az amikacin-bázis tisztasága minden esetben 68%, HPLC-vel meghatározva (mikrobiológiai titere 690 |ig/mg); más jellemzői az amikacin-szulfátéinak felelnek meg. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (I) képletű amikacin szintézisére a kanamicin-A (IIÁ) általános képletű kétszeresen védett származékának acilezése révén — e képletben R jelentése benziloxi-karbonil-, helyettesített benziloxi-karbonil-, alkoxi-karbonil-, ftaloil-, halogénezett alkil-karbonil-csoport, és R’ és R” jelentése hidrogénatom — acilezést az L-(-)-4-amino- 2-hidroxi-vajsav (L-HABA) egy reakcióképes származékával végezve, mimellett a kiindulási védőcsoportokat ismert módszerekkel távolítjuk el a reakciótermékből, azzal jellemezve, hogy a (IIA) általános képletű vegyületet vízben oldjuk, és ezt az L-HABA reakcióképes származéka aprotikus, vízben gyengén oldódó oldószeres oldatával acilezzük, a pH-értéket 3 és 10 között szabályozzuk, a reakcióelegy hőmérsékletét 0-60 °C között tartjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakcióelegy pH-ját 4,5-6,5 közötti értékre állítjuk be. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy R helyén benzil-oxi-karbonil-, p-nitro-benzil-oxi-karbonil- vagy p-metoxi-benzil-oxi-karbonil-csoportot tartalmazó (IIA) általános képletű vegyületet alkalmazunk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az aprotikus oldószert alifás szénhidrogének és halogénezett alifás szénhidrogének közül választjuk ki. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az aprotikus oldószert metilén-klorid, kloroform és 1,2-diklór-etán közül választjuk ki. 30 35 40 45 50 5
