201608. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vankomicin típusú antibiotikumok meghatározására , az ehhez szükséges analitikai készlet és eljárás a specifikus antitest előállítására
17 HU 201608 B 18 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás vankomicin típusú antibiotikumok) előnyösen vankomicin, teikoplanin, aktaplanin, ristocetin, avoparcin, aktinoidin, LL-AM-374 antibiotikum, A 477 antibiotikum, OA 7653 antibiotikum, A 35 512 B antibiotikum, A 515 668 antibiotikum, AAD 216 antibiotikum, A 41 030 antibiotikum, A 47 934 antibiotikum vagy ezek valamely komponense, származéka vagy aglükonja meghatározására, azzal jellemezve, hogy I) egy meghatározandó oldatot érintkezésbe hozunk egy felülettel, amely egy, az erre a felületre adszorbeálódó megfelelő makromolekuláris hordozóval konjugált D-alanil-D-alanin dipeptidet vagy D-alanil-D-alanin kar boxi-terminális oligopeptidet hordoz; II) öblítés után a meghatározandó anyag elleni specifikus antitesteket adagolunk; és III) a stacionárius fázisban az antigénhez kötött antitesteket az ilyen megkötött antitestek ellen irányuló, kimutatható markerhez kapcsolt species-specifikus anti-IgG-antitesttel kimutatjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás teikoplanin vagy ennek egyik komponense, származéka vagy aglükonja meghatározására, azzal jellemezve, hogy a II) lépésben teikoplanin elleni specifikus antitestet alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy D-alanil-D-alanin karboxi-terminális oligopeptidként epszilon-aminokaproil-D-alanil-D-alanint használunk fel. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy makromolekuláris hordozóként fehérjét alkalmazunk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy makromolekuláris hordozóként albumint használunk fel. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hordozó felületként mikrotitréló lemezek üregeit, kémcsöveket vagy műanyag lapokat alkalmazunk. 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hordozó felületként polietilén vagy polistirol mikrotitráló lemezek üregeit alkalmazzuk. 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy specifikus antitestként nyúl-antitestet és species-specifikus anti-antitestként nyúl-IgG-k elleni kecske-antiszérumot alkalmazunk. 9. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy specifikus antitestként monoklonális antitestet alkalmazunk. 10. Analitikai készlet az 1. igénypont szerinti eljárásban való alkalmazásra, azzal jellemezve, hogy a készlet áll; I) analitikai eszközből, amely felületén az erre adszorbeálódni képes valamely megfelelő makromolekuláris hordozóval konjugált D-alanil-D-alanint vagy D-ala- 5 nil-D-alanin karboxi-terminélis oligopeptidet hordoz, II) antitest-készítményből, amely a meghatározandó anyag ellen irányuló specifikus antitesteket tartalmaz, és 10 Hl) egy species-specifikus anti-antitest-készitményból, amely specifikusan a meghatározandó anyag ellen irányuló .első* antitestet szolgáltató állatfaj immunoglobulinjai ellen irányuló antitesteket tarig talraaz és kimutatható markerrel vannak ellátva az antitestek. 11. A 10. igénypont szerinti készlet, azzal jellemezve, hogy D-alanil-D-alanin karboxi-terminális oligopeptidként epszilon-amino-2o kaproil-D-alanil-D-alanint tartalmaz. 12. A 10. igénypont szerinti készlet, azzal jellemezve, hogy makromolekuláris hordozóként valamely fehérjét tartalmaz. 13. A 10. igénypont szerinti készlet, az- 25 zal jellemezve, hogy makromolekuláris hordozóként albumint tartalmaz. 14. A 10. igénypont szerinti készlet, azzal jellemezve, hogy analitikai eszközként mikrotitráló lemezek üregeit, kémcsöveket 30 vagy műanyag lemezeket tartalmaz. 15. A 10. igénypont szerinti készlet, azzal jellemezve, hogy analitikai eszközként polietillén vagy polisztirol mikrotitráló lemezek üregeit tartalmazza. 35 16. Eljárás anti-teikoplanin nyúl antiszérum előállítására, azzal jellemezve, hogy nyulakba ismételt injekciókkal egy teikoplanin-albumin konjugátum - amelyet úgy állítunk elő, hogy 1-10 tömegrész teikoplanint 40 és 1 tömegrész szarvasmarha-szérumalbumint összekapcsolunk - anti-teikoplanin antitest képződés kiváltása szempontjából hatásos mennyiségét visszük be, az analitikialag hatékonynak mért antitest-képződés eléréséhez 45 szükséges idő eltelte után az állatokat elvéreztetjük, a kapott antiszérumot kinyerjük és adott esetben megtisztítjuk azt az anti-szarvasmarha-szérumalbumin immunoglobulinektől oly módon, hogy körülbelül azonos 50 térfogatú mátrix-szal hozzuk érintkezésbe, amelyet úgy állítunk elő, hogy kb. 1 tömegrész szarvasmarha-szérumalbumint kb. 100 térfogatrész duzzasztott agarózzal kapcsolunk össze. 55 17. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az analitikailag hatékonynak mért antitest-képződést ELISA módszerrel mutatjuk ki, teikoplanin bevonatú mikrolemezekkel, kimutatható vizsgáló minta- 60 ként nyúl IgG-k elleni torma-peroxidázzal jelzett kecske-antiszérumot alkalmazva. Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest - A kiadásért felel: dr Szvoboda Gabriella osztályvezető R 4971 - KJK 91.3524.66-13-2 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Szabó Viktor vezérigazgató 11
