201578. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bottromycin A2 előállítására

7

HU 201578 B

8

tán-etil-acetát-aceton és/vagy kloroform-metanol elegyeket alkalmazhatunk.

A 85-211 jelű Streptomyces collinus törzs által termelt antibiotikum szerkezetét azonosítottuk a bottroraycin Az szerkezetével. Az izolált antibiotikum fizikai állandói, elemi analizise, valamint spektroszkópiai adatai: infravörös-, XH-NMR, 13C-NMR- és tőmegspektruma megegyezett a szakirodalomban a bottromycin A2-re közöltekkel [J. Antibiotics 36, 1076 (1983)].

A Streptomyces collinus törzs által bio- 5 szintetizált bottromycin Az biológiai hatásainak vizsgálatára végzett kísérleteink eredményeit az alábbiakban foglaljuk össze. Az antibiotikum antibakteriális spektrumát a 2. táblázat mutatja:

2, táblázat

A bottromycin M antibakteriális spektruma

Módszer: Makrodiluciós eljárás, 3 ml táptalaj (Penassay Broth, BACTO B-243, DIFCO). Inkubációs idő: 24 óra. Methods of testing combinations of Antimikrobial Agents (Hoffmann-La Roche Chemotherapy Department 1984 - New Yersey)

Tesztorganizmusok MIC (mg/1)

Bacillus subtilis ATCC 6633 0,08

Staphylococcus aureus SMITH 0,31

Staphylococcus aureus 1110 0,62

Streptococcus faecalis 0,31

Streptococcus pneumoniae 0,06

Streptococcus pyogenes A 118 0,06

Streptococcus pyogenes A 115 ROBB 0,12

Acinetobacter anitratus 150001 25,0

Alcaligenes faecalis 140001 12,5

Bordetella bronchiseptica ATCC 4617 6,2

Escherichia coli K12 50,0

Escherichia coli 6R 50,0

Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 3,1

Proteus inconstans NCTC 8055 100,0

Proteus vulgaris XL 100,0

Pseudomonas pyocyanea NCTC 10490 50,0

SalmoneUa typhi-murium 51 50,0

Serratia marcescens 100,0

Shigella sonnei 25,0

MIC = legkisebb gátló töménység

Az antibiotikum melegvérűek sejtjeire kifejtett toxicitását a 3. táblázat tartalmazza. 50

3. táblázat

A bottromycin Az szövettoxicitásának vizsgálata

Módszer: S. Horváth: Toxicology 16, 59

(1980).

Szövet: HeLa sejttenyészet

55

60

Vegyület

CTo (mg/1)

CTso (mg/1)

Bottromycin Á2

0,158

1,26

CTo = a hatóanyag olyan legnagyobb

koncentrációja, amely a HeLa sejtekre még mérhető károsodást nem fejt ki.

CTso = a hatóanyag olyan koncentrációja, amely a HeLa sejtek felén látható toxikus hatást okoz.

HeLa sejt = human cervix-carcinoma laboratóriumi tenyészetben fenntartott sejtvonala.

Vizsgáltuk a termelt antibiotikumot 2 mg/1 töménységű oldatban Ames tesztben is [mutagenitásra utaló baktérium teszt - D.M. Maron, B.N. Ames: Mutation Research 113, 173 (1983)]. A kísérletek során nem találtunk mutagén tulajdonságokra utaló jeleket.

6