201559. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szacharid-származékok előállítására
1 HU 201559 B 2 Az acilezést előnyösen alacsony hőmérsékleten, például körülbelül 4 °C-on végezzük. E reakciót előnyösen közömbös (inert) oldószerben - például valamilyen szénhidrogénben vagy diklór- metánban - játszatjuk le. Az acilezőszert diciklohexil- karbodiimid és 4-(dimetil-amino)-piridin hozzáadásával kiegészíthetjük. A (III) általános képletű vegyületek például úgy állíthatók elő, hogy egy (IV) képletű vegyületet megfelelő, védett formába viszünk, és hidroxil-, valamint aminocsoportjait a szacharidok kémiája területén általánosan ismert módszerekkel szubsztituáljuk. A védőcsoportokat a hidroxil- és aminocsoportok helyzetétől függően választjuk meg, és azt a hidroxil-, illetve aminocsoportot, amelyet a következő lépésben acilezni kívánunk, védőcsoporttól mentesen tartjuk. Az első acilezési lépés az amino- és/vagy egy hidroxilcsoport acilezése, amelyet védőcsoport-eltávolítás követ. A védőcsoport-eltávolítást követi egy szelektív védőcsoport bevezetése, aminek során egy vagy több hidroxilcsoport védetlen formában marad. Ezt követően ismét acilezést végezhetünk egy másik, alkalmas acilcsoporttal. Hasonló reakciólépések ismétlése lehetővé teszi olyan vegyületek előállítását, amelyekben az acilcsoportok különbözők. A (IV) képletű vegyületben az 1-es helyzetű hidroxilcsoport konfigurációja lényegtelen; a foszfátcsoport bevezetése olyan vegyületeket eredményez, amelyek konfigurációja a megfelelő helyzetben a (ül) általános képletű vegyület konfigurációjával azonos. Megjegyezzük, hogy bármely esetben, minden egyes acilező lépés során a 6-os helyzetű hidroxilcsoportot védenünk kell, mert a hidroxilcsoportot nem kívánjuk acilezni. Ugyanez érvényes a foszfátcsoportra is, amelyet minden egyes acilező lépés előtt védőcsoporttal kell ellátnunk. A foszfátcsoport például úgy vezethető be, hogy a (IV) képletű vegyületet vagy annak parciálisán acilezett származékát fémorganikus vegyülettel - például butil-lítiummal - reagáltatjuk, aminek során az alkalmazott (IV) képletű vegyületnek vagy parciálisán acilezett származékának 6-os helyzetében lévő hidroxilcsoport adott esetben védett formában van, és ezt követően a reakcióelegyhez például dibenzil-foszforokloridátot adunk. A fémorganikus vegyülettel végbemenő reakciót közömbös oldószerben, például valamilyen gyűrűs éterben, így tetrahidrofuránban végezzük. Előnyösen alacsony hőmérsékleten, például -50 °C-on dolgozunk. Oldószerként alifás szénhidrogént, például hexánt használunk. A foszfátegység hidroxilcsoportjait például benzilcsoportokkal védhetjük. Ha a kiinduló anyagok előállítását külön nem írjuk le, akkor azok vagy ismertek, vagy ismert eljárásokkal, vagy ismert eljárásokhoz analóg módon, például az alábbi példákban leírt eljárásokhoz hasonló módszerrel állíthatók elő. Az (I) általános képletű vegyületek vagy gyógyászati szempontból elfogadható sóik (továbbiakban: a találmány szerinti vegyületek) farmakológiai hatásokkal rendelkeznek, s így gyógyszerként való alkalmazásuk indokolt. Közelebbről a találmány szerinti vegyületek a nem-specifikus mikróbaellenes ellenálló képességre gyakorolnak hatást, s ez például az alábbi vizsgálatokból tűnik ki: 1. Az endotoxin-hatékonyság meghatározása a limulus-amőbocita- lizátum vizsgálatával 2. Endotoxin-sokk kiváltása egéren 3. Mikrobiális szepszis előidézése neutropéniás egéren (egerenként például a következő csíraszámmal: Pseudomonas aeruginosa A12: körülbelül 6xl04; E. coli A120: körülbelül 2xl06; Staph, aureus Al 13: körülbelül 2xl06; Candida albicans A124: körülbelül 2xl04) A találmány szerinti vegyületek - a fertőzött, kezeletlen kontrollállatokkal összehasonlítva, Gramnegatív mikrobákkal (például Pseudomonas-szal vagy E. coli-val) vagy Gram-pozitív mikrobákkal (például Staph, aureus-szal) vagy élesztővel (például Candida albicans-szal) végzett kísérleti fertőzések során - parenterálisan adagolva az állatok túlélési idejét és a túlélő állatok arányát jelentősen javították. 4. Az emberi vérben lévő neutrofilek oxidativ metabolizmusának az aktiválása 5. A szén-clearance próba 6. Herpesz-fertőzés egéren HSV-1 vírussal végzett kísérleti fertőzés során a találmány szerinti vegyületek a kezelt állatok kórállapotát, túlélési idejét és a túlélők arányát a kezeletlen kontrollállatokéval összehasonlítva figyelemre méltó mértékben javították. Ezeket a hatásokat már egyetlen, a 0. és 6. napok között, vagy a -1. és 6. napok között intraperitoneális vagy szubkután kezelés után is megfigyeltük. 7. A kolónia-serkentő faktor indukciója („CSF”-„stimulating factor”. A találmány szerinti vegyületek a CSF-anyagokat egerekben különböző mértékben indukálják, és ennek következtében a CSF- aktivitások időbeli kinetikájában különbségek figyelhetők meg, ami terápiás alkalmazás során előnyös lehet. 8. Az interleukin-1 (JL-1) indukciója A találmány szerinti vegyületek különböző mértékben (0,1-50 mg/ml koncentrációkban) képesek indukálni az JL-1 termelődést makrofágokban. 9. Az LPS (endotoxin) tűrőképesség (letalitás-tolerancia) indukciója A találmány szerinti vegyületek ezt a tűrőképességet egerenként már egyetlen 0,25 mg-os intraperitoneális dózis után kiváltják. Előkezelt (tűrőképes) egereket intraperitoneálisan kezeltünk 0,01 pg LPS anyaggal és 8 mg galaktózaminnal különböző időkön át (1 naptól 3 hétig) az utolsó kezelés után. Az előkezelést nem kapott kontrollállatokkal összehasonlítva az előkezelt állatok nagyobb arányban élték túl az LPS hatását, különösen ha a kezelést (3 ízben) megismételtük. Ezenkívül a találmány szerinti vegyületek gyulladáscsökkentő hatással rendelkeznek, különösen a nem- specifikus, immunológiai okokból bekövetkező vagy túlérzékenység következtében fellépő gyulladásos állapotokban és allergiás reakciókban. . ~~ -E hatásuk különböző vizsgálati módszerekkel - például az in vitro és in vivo prosztaglandin-bioszintézisre gyakorolt hatásuk vizsgálatával - igazolható. Azt találtuk, hogy a találmány szerinti vegyületek az LPS anyaggal vagy a zimozánnal kiváltott prosztaglandin-E2 (PGE2) termelődést jelentős mértékben gátolják. Megmértük egerek hashártyájából származó leukociták LPS-kiváltotta PGE2 termelését a vizsgá-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
