201332. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfortartalmú 2-izoxazolinok és -izoxazolok, valamint ilyen vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
63 HU 201332 B 64 amelyek a fentiekben ismertetett vizsgálat során az első fertőzés után a 34. példa szerinti vegyületből 4 x 10 mg/kg dózisú i.p. kezelést kaptak, mind a tizen túlélték a második fertőzést és közülük csupán 2 állatnál (20X) találtunk csírát a májban. 14. táblázat Listeria monocytogen által fertőzött egerek betegségének lefolyására gyakorolt hatás vizsgálata Vizsgálati csoport A betegség lefolyása a második fertőzés után Mortalitás A túlélő állatok májában talált csirafertőzés (%) Kontroli-csoport (kezeletlen) 4/10 100 Dózis-csoport 34. példa szerinti vegyülettel kezelve 4 x 10 mg/kg i.p. 0/10 20 A vizsgálati anyag ennek megfelelően egy szekunder fertőzéssel szemben jelentős védelmet nyújt. 9. Immunszupprimált egerek staphylococcus aureus fertőzése ellen kifejtett hatás vizsgálata Ismeretes, hogy kísérleti állatok citosztatikummal való többszöri kezelése jelentős immunszupressziót okoz, ami a fertőzésre való hajlam fokozódásában és a mortalitás drasztikus növekedésében nyilvánul meg. A kísérlet során azt vizsgáltuk, hogy valamely (I) általános képletű vegyülettel történő kezelés az elhullás mértékét csökkenti-e. A kísérlethez B6DF21 törzsű nőstény egereket három egymást követő napon minden nap 7,5 mg/kg ad amicinnel intravénásán kezeltünk, majd az 5. napon 2 x 106 staphylococcus aureus baktériumcsirával fertőztük az állatokat és a 45. kísérleti napig meghatároztuk a mortalitást (pozitív kontroli-csoport). Egy másik ugyancsak fertőzött, azonban adriamycines előkezeléssel nem immunszuprimált állatcsoport negatív kontrollként szolgált. A három dózis-csoport immunszuprimált állatait 4 egymás követő napon, a megfertőzés előtti napon kezdődően a vizsgálati anyaggal intraperitoniálisan kezeltünk, mégpedig 0,1 1 illetve 10 mg/kg dózisokkal. Valamennyi vizsgálati csoport 20 állatból állt. A 15. táblázatban összefoglalt vizsgálati eredmények azt mutatják, hogy a mortalitás az adriamycinnel indukált immun-gyenge pozitív kontroli-csoport állatainál a negativ-kontroll-csoport érintetlenül hagyott immunitású állataihoz képest drasztikusan emelkedett, továbbá a vizsgálati anyaggal történt kezelés az immunszuprimált állatok elhullásának mértékét jelentősen csökentette. 15. táblázat A hatás vizsgálata Staphylococcus fertőzéssel immunszupprimált egereken Vizsgálati csoport Dózis mg/kg (4 x i.p.) Mortalitás Negativ kontroll 0/20 Pozitív kontroll 13/20 Dózis-csoportok (a 34. példa sze-0.1 5/20 rinti vegyület-1.0 8/20 tel kezelve) 10.0 8/20 10. Escherichia Coli elpusztult csiráival szembeni és tetanusz-toxoid elleni antitest-reakció vizsgálata egereken Mindegyik csoportban 5 Naval Medical Research Institute eredetű 18-20 g-os nőstény egereket vagy hőkezeléssel elpusztított 10s Escherichia Coli baktériumokkal intravénásán vagy 300 Limes floculationis Tetanusz-toxoiddal szubkután kezelünk. Az antigén-beadással egyidejűleg az állatokat vizsgálati anyag fiziológiás sóoldattal 5, 10, 20, 40 illetőleg 80 mg/kg dózisokkal vagy a tiszta vivőanyaggal (kontroli-csoport) orálisan kezeljük. 10 és 20 nap múlva az egerek szemüreg mögötti (retroorbitális) vénás fonadékából vért vettünk és az ebből nyert szérumból a szakember számára ismert ELISA-teszt segítségével meghatároztuk az Escherichia coli elpusztult csírákat illetőleg a Tetanusz-toxoid ellen képződött IgG- és IgM-antitesteket, miközben az Escherichia coli illetőleg Tetanusz-toxoid lipo-poliszacharid-homológjait használtunk antigénekként. A fotometriásan mért extinkciós értékek nagysága a képződött antitestek mennyiségét jellemzik. A kapott eredményeket a 16. táblázat foglalja össze, amely szerint a vizsgálati anyaggal történt orális kezelés után az antitest-reakció mindkét antigénre nézve a kezeletlen állatokéihoz képest szignifikánsan emelkedett. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 34
