201240. lajstromszámú szabadalom • Bőrregeneráló kozmetikai kompozíció
HU 201240 B sebesség: 80 cm/óra.) A hexánt ledesztilláljuk. EPA: 22 tömeg%, DHA: 35 tőmeg%. 3. példa Telítetlen zsírsavak kinyerése 2 kg nátrium-hidroxidot 70 liter 95 tömeg%-os alkoholban oldunk, majd melegen 10 kg szardíniaolajat adunk hozzá. Az elegyet 2 órán keresztül nitrogénatmoszférában forraljuk, keverés közben 10 cC-ra lehűtjük. Ekkor a telített zsírsav nátriumsója kiválik. A kristályokat kiszűrjük, kevés alkohollal mossuk. Az alkoholos szűrletet koncentráljuk, és 20 liter kiforralt vizet adunk hozzá. Az el nem szappanosítható vegyületeket, mint a koleszterol, 5 liter hexánnal extraháljuk, így azokat teljesen eltávolítjuk. Híg kénsavval pH 2-ig savanyítjuk, majd 15 liter hexánnal extrahálunk. A szerves fázist vízzel mossuk, majd bepároljuk. 3,2 kg koncentrált olajat kapunk. DHA tartalom: 36,8 tömeg%, EPA-tartalom: 31,8 tömeg%. Az olaj barna, és halszagú, ezért a koncentrált olajhoz fullerfoldet (agyagot) keverünk és nitrogén atmoszférában 105 eC hőmérsékleten 10 percig melegítjük, majd forrón szűrjük. A szagtalanítást vákuum-gőz-desztilládóval 133 Pa nyomáson 170 °C hőmérsékleten 3 órán keresztül végezzük. Világossárga, íztelen, szagtalan terméket kapunk. 4. példa Telítetlen zsírsavak kinyerése 20 tömeg%-os etanolos jód-oldatot készítünk, ezt az oldatot 300 g tőkehalmájolajhoz lassan hozzáadagoljuk. A jód-oldat adagolását addig kell folytatni, amíg el nem tűnik a jód okozta elszíneződés. A reakció kevergetés közben, szobahőfokon megy végbe. A jódozott olajos oldatot 2 órán keresztül 20 tömeg%-os KOH etanolos oldatával szappanosítjuk el. A jódozott zsírsav (260 g) könnyen kiextrahálható az elszappanosított keverékből. Ezt követően sósavas metanollal etilezünk. (5 tömeg%-os sósav oldattal) Oszlopkromatográfiával tisztítást végzünk, 150 g szilikagélt (0,06^0,2 mm, Merck) alkalmazunk; az eluálást 5 liter hexán-éter-ecetsav 85:10:5 arányú keverékével végezzük. Az első frakció a jódozott DHA-t, a második a jódozott EPA-t tartalmazza. A jódozott zsírsavakat 10 tömeg%-os vizes ezüst nitrát-oldattal kell külön-külön összerázni. Az ezüst-jodidot leszűrjük, a két fázist elválasztjuk. A műveletet annyiszor kell megismételni, amíg ezüstjodid kiválás el nem marad. Hozam: 90%; tisztaság: 95-100%. (EPA: 22 tömeg%, DHA: 43 tömeg%). 5. példa Telítetlen zsírsavak kinyerése 24 kg tőkehalmájolajat feloldunk 60 °C hőmérsékleten 16 liter metanolban; keverés közben becsepegtetünk 8 kg 40 tömeg%-os NaOH-oldatot, majd az elegyet 60 °C-on tartva további 45 percig kevertetjük. Mintegy 60 °C hőmérsékleten 20 kg 15 tömeg%-os HCl-at adunk az oldathoz; a fázisokat elválasztjuk, majd még 10 kg 15 tömeg%-os HCl-al mossuk, és mintegy 180 liter forró csapvízzel semlegesre mossuk, elválasztjuk. Az olajhoz 100 liter 3 acetont adunk, felmelegítjük mintegy 45 °C-ra és hozzáöntünk 30 liter vízben feloldott 3,8 kg Li- OHJl20-t. Fél óra keverés után egy éjszakán át állni hagyjuk. Leszűrjük, az acetonos szűrletet bepároljuk. 8 kg 15 tömeg%-os HCl-al megsavanyítjuk, és hexánnál háromszor kirázzuk, majd bepároljuk. 6,4 kg tisztított halolajat nyerünk. Jódszám: 258; savszám: 160. A tisztítási művelet során végig N2 atmoszférában dolgozunk. A fenti módon tisztított tőkehalmájolaj 1 kg-ját hozzácsepegtetjük 60 °C hőmérsékleten 3 kg karbamid 9 liter metanolban készült oldatához. Az elegyet 2 órán át ezen a hőmérsékleten kevertetjük. Lehűlés után egy éjszakán át mélyhűtőben áll. Leszűrjük, a szűrletet bepároljuk. 2^5 liter 1:1 HCl-al 15 percig kevertetjük. Hexánnal kirázzuk, semlegesre mossuk, Na2S04-al szárítjuk, bepároljuk. 0,34 kg ut-3 zsírsavat nyerünk. Jódszám: 315; EPA: 24%; DHA: 42%. Hozam: 88%, tisztaság: 93-98%. 6. példa Alga-tenyésztés 10 literes algatenyésztő üvegbe töltünk 8 liter Knop-Pringsheim-féle tápoldatot, amelyet kiegészítünk 40 mg nátrium-szelenittel. A rendszert 121 °C hőmérsékleten 30 percig sterilezzük 1 bar túlnyomáson. A steril oldatot beoltják Ácenedesmus obtisiusculus alga színtenvészttel (28,5 ml oltóanyag/10 liter; sejtszám: 5.10° mól). A tápoldathoz 25 °C hőmérsékleten 5 térfogat% szén-dioxidot tartalmazó steril levegőt buborékoltatunk át, fénycsöves megvilágítás mellett. 14 nap tenyésztési ciklus után az algát a tápoldattől elkülönítjük, majd a kapott algamasszát ultrahanggal feltárjuk. Hozam: 6,3 g szárazalga; 260 jig Se/g alga. 7. példa Alga-tenyésztés Mindengen az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy Scenedesmus obtisiusculus helyett Chlorella vulgaris alga törzset alkalmazunk. Hozam: 7,1 g szárazalga; 180 y.g Se/g alga. 8. példa Homogenizátum előállítása 150 g 65%-os dúsított (5. példa szerinti) tőkehalmájolajhoz (EPA: 24%, DHA: 42%) 100 g Se-algát keverünk (Se tartalom: 260 p.g/g). A homogenizátumot 0,1 tömeg% E-vitaminnal tartósítjuk. 9. példa Alga-szelén komplex előállítása A biológiailag aktív tulajdonságokkal rendelkező szelén tartalmú alga tenyésztésre az irodalomban ismert összetételű tápoldatot (Knop- Pringsheim) 300 p.g Se/ml koncentrációig szelén sóval kiegészítjük, majd a 10 liter tápoldatot 120 °C hőmérsékleten sterilizáljuk. Ezt követően szelénre rezisztens alga színtenyészettel (28,5 ml/10 liter) beoltjuk. Scenedesmus alga törzset alkalmazunk. A tápoldaton 5 tf% széndioxidot tartalmazó steril levegőt buborékoltatunk át, majd 24 °C hőmérsékleten történő 21 napos tenyésztés után az algákat elkülönítjük és ismert fizikai módszerekkel feltár-4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
