201117. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenil-(2,3-epoxi-1-propil)-éterek sztereospecifikus előállítására
3 HU 201117 B 4 fajhoz (a faj mintáját az NCIB-ben 8704 nyilvántartási szám alatt helyezték letétbe) tartoznak. Az allil-fenil-éter epoxidálására alkalmas mikroorganizmus a Mycobacterium WM1 (NCIB-11626 nyilvántartási szám alatt helyeztek letétbe) tenyészetéhez tartoznak. A (4-allil-oxi-fenil)-acetamid epoxidálására alkalmas mikroorganizmusok a Pseudomonas oleovorans faj (a faj mintáját az ATCC-ben 29347 nyilvántartási szám alatt helyezték letétbe) tenyészetéhez tartoznak. A jelen találmány szerinti eljárás előnyös megvalósításának gyakorlatában allil—í4— -(2-metoxi-etil)-fenil]-éter legalább 90 tömeg%-ban S-konfigurációjú glicidil-[4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éterré való átalakítására képes mikroorganizmust kell szelektálni az előbb említett mikroorganizmusokból, 0,5-10 napig tenyészteni kell, majd a baktériumsejteket el kell különíteni a tenyészfolyadékból, a sejteket folyékony táptalajban kell szuszpendálni, és az allil-[4-(2-metoxi-etil)-fenil]-étert a sejtek hatásának kell kitenni. A jelen találmányban felhasznált, epoxidáló hatást mutató mikroorganizmusokat körülbelül 0,5-10 napig tenyészteni kell, majd a sejteket valamilyen folyékony táptalajban, előnyösen valamilyen folyékony miniméi táptalajban kell szuszpendálni, és a (II) általános képletü vegyületet a sejtek hatásának kell kitenni. Az előbb említett körülbelül 0,5- -10 napos tenyésztés után a sejteket elkülönítjük a tenyésztáptalajtól, mielőtt a sejteket a minimál táptalajban szuszpendáljuk. A (II) általános képletü vegyületek sztereoszelektív epoxidálására használt mikroorganizmusok tenyésztésére valamilyen asszimilálható szénforrást (például glükózt, tejsavat, szénhidrogéneket, igy tetradecént stb.), valamilyen nitrogénforrást (például ammónium-szulfétot, ammónum-nitrétot, ammónium-kloridot stb.), valamilyen szerves hatóanyagkivonatot (például élesztőkivonatot, malátakivonatot, peptont, húskivonatot stb.) és valamilyen szervetlen tápanyagforrást (például foszfátot, magnéziumot, káliumot, cinket, vasat és más fémeket nyomnyi mennyiségben) tartalmazó közönséges táptalajt használhatunk. Adott esetben valamilyen indukáló anyagot (például dietoxi-raetánt) is adunk a tápoldathoz. A hőmérsékletet 0 °C és 45 °C között és a pH-t 3,5 és 9 között tartjuk a mikroorganizmusok tenyésztése közben. A mikroorganizmusokat előnyösen 20 °C és 37 °C közötti hőmérsékleten és 5 és 8 közötti pH-nál tenyésztjük. A mikroorganizmusok tenyésztése alatt szükséges aerob körülmények bármely jól megtervezett módszerrel fenntarthatok, feltéve hogy az oxigénellátás elegendő a mikroorganizmusok anyagcsereszükségletének kielégítésére. Ez legkönnyebben gáz alakú oxigén, előnyösen levegő formájában való biztosításával érhető el. A (II) általános képletü vegyület (I) általános képletü vegyületté való átalakítása alatt a mikroorganizmusok növekedési szakaszban vannak, és az előbb említett közönséges táptalajt hasznosítják. A mikroorganizmusok valamilyen koszubsztráttal is elláthatók. A (II) általános képletü vegyület (I) általános képletü vegyületté való átalakítása alatt a mikroorganizmusok előnyösen lényegében nem növekedési szakaszban tarthatók valamilyen minimál táptalaj alkalmazásával. Minimál táptalajként szükség esetén valamilyen asszimilálható szénforrást (például glükózt, laktátot, szénhidrogéneket, így tetradecént stb.), szükség esetén valamilyen nitrogénforrást (például ammónium-szulfátot, ammonium-nitrátot, ammónium-kloridot stb.), szükség esetén valamilyen szerves hatóanyagforrást (például élesztőkivonatot, malátakivonatot, peptont, húskivonatot stb.) és szükség esetén valamilyen szervetlen tápanyagforrást (például foszfátot, magnéziumot, káliumot, cinket, vasat és más fémeket nyomnyi mennyiségben) tartalmazó közönséges tenyésztő táptalaj használható. A mikroorganizmusok a nem növekedési szakaszban tarthatók például az asszimilálható szénforrás megvonásával vagy a nitrogénforrás megvonásával. A hőmérsékletet ebben a szakaszban 0 °C és 45 °C között és a pH-t 3,5 és 9 között tartjuk. A mikroorganizmusokat előnyösen 20 °C és 37 °C közötti hőmérsékleten és 5 és 8 közötti pH-nál tartjuk. Az ebben a szakaszban szükséges aerob körülmények az előbb említett eljárásokkal tarthatók fenn, feltéve, hogy az oxigénellátás elegendő a mikroorganizmusok anyagcsereszükségletének kielégítésére, valamint a (II) általános képletü vegyületek (I) általános képletü vegyületekké való átalakításához. A mikroorganizmusok által termelt (I) általános képletü vegyület, amint előbb említettük, bármely megfelelő eljárással elkülöníthető és megtisztítható. A jelen találmány szerint előállított (la) és (Ib) általános képletü vegyületek - amely képletekben Rí jelentése az (I) általános képletnél megadottakkal azonos -vagy ezek elegyei izopropil-aminnal vagy tercier-butil-aminnal reagáltatva (Illa), (Illb) általános képletü (mely képletekben Rí jelentése izopropil- vagy tercier-butil-csoport) vegyületekké, illetve ezek elegyévé alakíthatók át. A jelen találmányt a továbbiakban a példákkal és a mellékelt ábrákkal részletesebben szemléltetjük, anélkül azonban, hogy a jelen találmány oltalmi köre csak ezekre a példákra korlátozódna. Az ábrák rövid magyarázata: 1. ábrák (+) és (i)-glicidil-[4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éter europium shift-reagens jelenlétében felvett 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
