201095. lajstromszámú szabadalom • Az immunrendszer működését gátló új peptidek, az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás ezen peptidek és készítmények előállítására
11 12 HU 201095 B [cC]20d=+1,0° (c=1,0, 10%-os ecetsav-oldatban). Aminosav analízis: D-Asp=l,03, Lys=l,00, Arg=0,98. A fentiek szerint előállított (1)—(16) képletű célvegyületek fizikai jellemzőit a 6. táblázat tartalmazza. 2. példa Lys(Arg)-Asp előállítása (.B ’ módszer) 4,77 g (10,0 mmól) Boc-Lys(Z)-OSu-t és 3,69 g (11,0 mmól) H-AsptO'BuJ-C^Bu-oxalátot 60 ml etil-acetátban reagáltatunk 3,08 ml trietil-amin hozzáadása után. Másnap a reakcióelegyet 20 ml vízzel, háromszor 20 ml 1 mól/1 koncentrációjú sósav-oldattal, háromszor 5%-os kálium-hidrogén-karbonát-oldattal és 20 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. Az olajszerú bepárlási maradékként kapott védett dipeptidet (5,6 g, ^=0,85) 60 ml metanolban oldjuk, 1,0 g csontszenes palládiumkatalizátort adunk hozzá, majd keverés közben 2 órán át hidrogéngázt buborékoltatunk át a szuszpenzión. Ezt követően a szuszpenziót szűrjük, a szűrlethez 1,1 g oxálsav-dihidrátot adunk, majd az oldószert lepároljuk. A maradék kristályos anyagot éterben szuszpendáljuk, majd szűrjük és megszárítjuk. Az Így kapott 4,4 g Boc-Lys-AspíC^BuJ-O^u-oxalát olvadáspontja 135- -138 °C. Ri«=0,35. A kapott oxalát-sót az 1. példában megadott módon, vegyes anhidrides kapcsolással a Lys £-amino-csoportján acilezzük, majd a kapott védett tripeptidröl ugyancsak az 1. példában megadott módon távolitjuk el a védőcső portokat. A fenti módon kapott védett és szabad peptidek fizikai állandóit az 5. és a 6. táblázat tartalmazza. 3. példa Arg-Lys(Arg)-Asp előállítása (.C módszer) 1,85 g (5,5 mól) H-AspfC^BuJ-O^u-oxalátot 50 ml éterben szuszpendálunk rázótölcsérben, majd a szuszpenzióhoz 20 ml 5%-os kálium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk. Az elegyet oldódásig rázzuk, majd a vizeB fázist leengendjük. Az éteres oldatot még 20 ml 5%-08 kálium-hidrogén-karbonát-oldattal és 20 ml vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban 20 ml térfogatig bepároljuk. Az oldathoz hozzáadunk 2,49 g (6,0 mmól) Z-Lys(Z)-0H védett lizint, majd 0 °C-ra hűtve hozzáadunk 1,20 g (5,8 mmól) diciklohexil-karbodiimidet. A reakcióelegyet 30 percig 0 °C-on tartjuk, majd szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Másnap a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szűrletet háromszor 10 ml 1 mól/1 koncentrációjú sósav-oldattal, háromszor 10 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és 10 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal 5 megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. Az olajszerű bepárlási maradékként kapott 3,0 g védett dipeptidet (Rí*=0,80) 50 ml metanolban oldjuk, 1,0 g csontszenes palládiumkatalizátort adunk hozzá és 2 órán át hid- 10 rogéngázt buborékoltatunk át a szuszpenzión. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrlethez 1,18 g (9,34 mmól) oxálsav-dihidrátot adunk, majd 10 ml térfogatra bepároljuk vákuumban. A kapott szuszenziót éterrel 100 ml 15 térfogatra hígítjuk, a kivált csapadékot szűrjük és éterrel mossuk. Az így kapott 1,49 g H-Lys-AspíC^BuJ-OTOu-oxalátot (Rf^- 0,25) az 1. példában ismertetett vegyes anhidrides kapcsolással acilezzük a lizin mind- 20 két amino-csoportján, majd a kapott védett tetrapeptidról ugyancsak az 1. példában megadott módon távolltjuk el a védőcsoportokat. A védett és a szabad tetrapeptid fizikai 25 állandóit az 5., illetve a 6. táblázat tartalmazza. 4. példa 30 D-Arg-Lys-Asp-Val előállítása (.D' módszer) 6,3 g (30 mmól) H-Val-O^u • HC1 és 11.2 g (26,8 mmól) Z-AsptOtBuJ-OSu 110 ml 35 dimetil-formamidban készült szuszpenziójához 4.2 ml (30 mmól) trietil-amint adunk. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, az olajszerű bepárlási maradékot 200 ml etil-acetátban oldjuk, és az oldatot kétszer 40 40 ml 1 mól/1 koncentrációjú sósav-oldattal, 40 ml vízzel, 40 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és 40 ml vízzel mossuk vízmentes nátrium-szulfáttal megszáritjuk, szűrjük, majd a szűrletet vákuumban bepá- 45 roljuk. A bepárlási maradékként kapott 13,0 g védett dipeptidet (Rf!=0,80) 100 ml metanolban oldjuk, az oldathoz 1,5 g csontszenes palládiumkatalizátort adunk, majd 2 órán át 50 keverés közben hidrogéngázt vezetünk át a szuszpenzión. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk. Az olajszerú bepárlási maradékot 100 ml éterben oldjuk és annyi metanolos hidrogén-klorid- 55 -oldatot adunk hozzá, hogy pH-ja 5 legyen. A kapott szuszpenziót 5 órán át hidegen tartjuk, majd szűrjük, a csapadékot éterrel mossuk, szárítjuk. Az így kapott 9,0 g (88,0 mmól) H-Asp(OtBu)-Val-OtBu • HC1 só 60 olvadáspontju 187-189 °C. Rf*=0,40. A továbbiakban az 1. példában megadott módon járunk el. A kapott védett és szabad tetrapeptid fizikai állandóit az 5., illetve a 6. táblázat 65 tartalmazza. 8
