201032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzglutaminázgátló izoxazolok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201032 B 7. előállításmód (II. reakcióvázlat—F lépés) 5-Aminometil-3-klór-4,5-dihidroizoxazol-hidr oklorid 2,12 g 5-[N-(terc-butoxi-karbonil)-amino-metiI]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol 300 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatát jégfürdőben 0 °C-ra hűtjük. 5-6 g (nagy felesleg) vízmentes hidrogén-kloridot buborékoltatunk bele kb. 1 órán át. Ezután a hűtőfürdőt eltávolítjuk, és a lombikot bedugva négy napon át keverjük az elegyet. A terméket szűréssel elkülönítjük, és a kristályos anyagot éter és hexán elegyével alaposan mossuk. A szűrlet bepárlásával és a kivált szilárd anyag szűrésével további terméket kapunk. A szilárd anyagokat egyesítve 5,9 g 3-klór-dihidroizoxazol-hidroldoridot kapunk. Megjegyzés: A reakció előrehaladását a C NMR-spektrumban a 3-klór-vonal (kb. 154,9 ppm) megjelenése és a 3-bróm-vonal eltűnése segítségével követhetjük. 1. példa (I. reakció vázlat — C lépés) ő-fN^benzil-oxi-karbonib-L-fenilalaninami do-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol 700 mg N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninallil-amid 40 ml etil-acetáttal és 0,75 ml vízzel készült oldatához 870 mg nátrium-hidrogén-karbonátot és kis részletekben 631 mg dibróm-formaldoximot adunk. A reakció előrehaladását vékonyrétegkromatográfiásán (40% etil-acetátot tartalmazó hexánban) követjük. A reakció befejeződése után (2-4 óra) a reakcióelegyet választótölcsérbe viszszük és egymást követően 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal, telített nátrium-klorid-oldattal mossuk és magnézium-szulfáton szárítjuk. Szűrés és bepárlás után halványsárga viszkózus olajat kapunk. Kovasavgélen, 15% etil-acetátot tartalmazó hexánnal kromatográfiásan tisztítjuk, így a sztereoizomereket 1:1 arányban tartalmazó terméket kapunk. Kloroform és hexán elegyéből kristályosítva a termék 122-125 °C-on olvad. Elemanalízis a C2iH22BrN3C>4 összegképletre: számított: C: 54,79, H: 4,82, N: 9,13%, talált: C: 54,82, H: 4,70, N: 8,94%. 13C NMR (20 MHz, CDCb): delta 172,0,171,9 (-CON-), 155,82 (-OcONH), 137,7, 137,6 (BR£=N), 136,2,135,9 (Ph) 126,9-129,2 (Ph), 80,2 (-£HO-), 66,9 (Ph£H20-), 56,3 (-CHN-), 43,8, 43,6 (-CH2CHO-), 41,1, 41,6 (-CH2N-), 38,4,38,5 ((PhCHa-). Az egyes izomereket kovasavgélen nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel (HPLC) választjuk el. A polárosabb izomer 151-153 °C-on olvad. IR (KBr): 3320,1690,1650,1522 cm1. 1NMR (300 MHz,CDCb) delta: 7,12-7,41 (m, 10H, Ph), 6,18-6,41 (m, 1H, -NH), 5,27 (d, 1H, - NH), 5,07 (s, 2H, PhCH20-), 4,55-4,92 (m, 1H, - CHO-), 4,28-4,56 (m, 1H, -CHN-), 3,4-3,57 (m, 2H, -CH2NH), 3,08 (d, 2H, PhCH2-), 2,62-3,21 (m, 2H, -CHjCHO-). [alfapD = + 49,6° (c = 0,03, kloroform). A kevésbé poláros izomer 155-157 °C-on olvad. IR(Kbr): 3320,1688,1650,1528 cm'1. aH NMR (300 MHz, CDCb): delta 7,13-7,39 11 (m, 10H, Ph), 6,21-6,28 (széles, 1H, -NH). 5,23 (d, 1H, -NH), 5,1 (s, 2H, PhCH20-), 4,66-4,78 (m, 2H, -CHO-), 437-4,46 (m, 1H, -CHN-), 3,46-3,53 (m, 2H, -CH2N-), 3,17 (dd, 1H, -CHHO-), 3,08 (d, 2H, PhCH2-).2,84 (dd, 1H, -CHCOH-). [alfa] d = -58,7° (c= 0,03, kloroform). A 2. előállításmódnál felsorolt vegyületekbői hasonló módon állítjuk elő a megfelelő 3-bróm-4,5-dihidroizoxazolokat: S-p^-íbenzil-oxi-karbonilj-L-para-tirozinami do-metü]-3-bróm-43-dihidroizoxazol; 5-[N“-(benzü-oxi-karbonil)-D-(para-klór-feni l)-alaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol; 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-feilalaninamido-metü]-3-bróm-43-dihidroizoxazol; S-J^-íbenzil-oxi-karbonilj-L-glutaminsav-alf a-amido-metil]-3-bróm-4,5-djhidroizoxazol; 5-[Na-(benziI-oxi-karbonil)-N-epszilc*,-(terc-bu toxi-karbonil)-L-lizinamido-metil]-3-bróm-4,5-di hidroizoxazol; 5-[N®-(benzil-oxi-karbonil)-glicinamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol; ő-J^-íbenal-oxi-karbonilJ-L-treoninamidometil)-3-bróm-43-dihidroizoxazol; 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-L-fenilal aninamido-metil]-3-bróm-43-dihidroizoxazol; 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-D-fenil-alaninami do-meti0-3-bróm-43-dihidroizoxazol; 5-[N^(benzil-oxi-karbonil)-D,L-meta-tirozina mido-metíi]-3-bróm-43-dihidroizoxazol; 5-[Nct-(benzil-oxi-karbonil)-L-meta-tirozinami do-metfi]-3-bróm-43-dihidroizoxazol; 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-(3-metoxi-fenil)-alaninamido-metil]-3-br6m-4,5-dihidroizoxazoI; 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-(4metoxi-fenil)-alaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol; 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-(3,4dihidroxi-f enil-alaninamido-metü]-3-bróm-43-dihidroizoxa zol; S-p^-fbenzil-oxi-karbonilJ-L-triptofánamido -metU]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol; ö-f^-ibenzil-oxi-karbonilj-L-S-hidroxi-tripto fánamido-metil]-3-bróm-43*dihidroizoxazol; 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-3-metOffl-tirozi namido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol; 5-[N°-(benzil-oxi-karbonil)-L-3-metoxi-tirazi namido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol; 5-[Nct-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalanil-L-al aninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol és S-fN^íbenzil-oxi-karbonilJ-L-alanil-L-fenilal aninamido-metil]-3-brőm-4,5-dihidroizoxazol. 2. példa (I. reakció vázlat — C lépés) 5-[Na-(Benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninami do-metifl-3-bróm-43-dihidroizoxazol 1 g N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalanin-allilamid, 1,1 g diklór-formaldoxim és 120 ml száraz tetrahidrofurán elegyéhez keverés közben, lassan 2,0 g ezüstnitrátot adunk. A reakdóelegy hőmérsékletét 13 órán át kb. 60-65 °C-on tartjuk, majd 50 ml metilén-kloridot adunk hozzá, és az elegyet celiten keresztül szüljük. Az oldószert eltávolítjuk és a maradékot metilén-kloridban felvesszük, majd 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal és telített nátriumklorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
