200939. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rekombináns DNS technikával előállított hTNF stabilizálására

HU 200939 B

vitás-mérésnek vetjük alá az in vivo mérési módszámítjuk ki, mint az 1. példában. Az eredményeket

szerrel. A megmaradó aktivitást (3) azonos módon a 6. Táblázat mutatja be.

41 42

5. Táblázat (2. rész)

2. példa

Körülmények

Fagyasztás (-70 °C)

Tárolás szobahőmérsékle-és felengedtetés

ten, (liofilezett készítmény)

Aktivitás-In

mérési

in vitro

vitin vivo

módszer

ro

Stabi- Konlizáló centismétlés

nanapok

szer ráció

pok

mg/ml

1 3

7

7

Semmi

(kontroll)

40 14

35

+4, -1

HSA 0,1

95 85

92

+ + +3, + +2

HSA 1

99 95

101

+ + +4, +1

BSA 1

101 95

97

+ + +3, + +2

Az oszlopokban „in vitro alatt található számok

megadtuk.

jelentik a megmaradó aktivitást, amint ezt feljebb

HSA: a Sigma Chemical Co., USA terméke

meghatároztuk. Az oszlopokban

„in vivo alatt talál-BSA: az

Armour Pharmaceutical CO., USA,

ható számok jelentik az egereg számát.

terméke

A (-, +, + + , stb.) jelek jelentését korábban

6. Táblázat

Stabilizáló szer

Koncentráció

Megmaradó aktivitás, % Tárolás 4 “Chőmérsékleten 7 napon át

Semmi (kontroll)-14

HSA

1 mg/ml

96

Glicin

0,1 mól/liter

13

L-lizin

0,1 mól/liter

10

L-arginin

0,1 mól/liter

17

L-glutaminsav

0,1 mól/liter

15

CaCl2

1 mmól/liter

14

MgCl2

1 mmól/liter

18

EDTA

1 mmól/liter

12

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

55

1. Eljárás humán tumor nakrózis faktor (hTNF)

stabilizálsára, azzal jellemezve, hogy rekombináns DNS technikával előállított hTNF-t tartalmazó vizes oldathoz vagy porhoz 0,01-10 mg/ml koncentrációban albumint adunk. 60

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hTNF-ként az alábbi (I) képlettel jellemezett aminosav-szekvenciával rendelkező polipeptidet alkalmazzuk:

Ser Ser Ser ARG Pro Ser Asp Lys Pro Val Alá 65

His Val Val Ala Asn Pro Gin Ala Glu Gly Gin Leu Gin Trp Leu Asn Arg Arg Ala Asn Ala Leu Leu Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg Asp Asn Gin Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr Ser Gin Val Leu Phe Lys Gly Gin Gly Gys Pro Ser Thr His Val Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gin Thr Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gin Arg Glu Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gin Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Ser Ala Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Glu Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala

22