200785. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gonadotropin releasing hormon antagonistái előállítására
3 HU 200785 B 4 nősen, ha az oC-szénatom is metilezve van. A benzolgyűrűk helyettesítője a para-(4-es) helyzetben foglal helyet, és előnyösen klóratom vagy fluoratom. ELőnyös, ha a peptidlénc 2-es helyzetében levő csoport kétszeresen helyettesített, mégpedig egyrészt az oC.-szénatomon, mási'észt a benzolgyűrün. Ilyen aminosav az oC-metil-(4-klór)-fenil-alanin. A peptidlánc 6-os helyzetében előnyösen D-tirozin vagy D-arginin van. A 10-es helyzetben tetszés szerinti csoport lehet. Mivel ezek a peptidek nagymértékben gátolják a luteinizáló hormon felszabadulását, gyakran a gonadotropin releasing hormon antagonistáinak nevezzük őket. E peptidek a proösztrusz idején (az ovulációt megelőző napon) igen kis dózisokban meggátolják a nőstény emlősök ovulációját, és, ha közvetlenül a fogamzás után alkalmazzuk őket, akkor a megtermékenyitett petesejtek felszívódáséhoz vezetnek. Az ilyen peptidek him emlősökön is fogamzásgátló hatást mutatnak. Részletesebben, a találmány tárgya eljárás az Ac-Ri-R2-R3-Ser-Rs-R6-Leu-Arg-Pro-Rio általános képletű, ahol Rí jelentése 0-(2-naftil)-D-alanil-, dehidro-prolil- vagy D-(4-klór)-fenilalanil-csoport, Rí jelentése D-(4-klór)-fenilalanil-, D-(4-fluor)-fenilalanil- vagy D-cC-metíl-(4-klór)-fenilalanil-csoport, Rs jelentése D-triptofenil- vagy 0-(2--naftil)-D-alanil-csoport, Rs . jelentése arginilcsoport, Rß jelentése D-tirozil-, 0-(2-naftil)-D-alanil- vagy D-arginilcsoport, és Rio jelentése glicin-amid- vagy D-alanil-amid-csoport, vagy Rs jelentése D-arginil-csoport, R3 és R6 jelentése 0-(2-naftil)-D-alanil-csoport, R2 jelentése a fenti, és Rio jelentése D-alanil-amid-csoport, dekapeptid-származékok előállítására. A 0-(naftil)-D-alanin az alanin D-izomerjének a 0-szénatomos naftilcsoporttal helyettesített származéka, amelyet 3-(naftil)-D-alaninnak is nevezhetünk. Előnyösen 0-(2-naftil)-D-alanint használunk, amelyben az alanin B-szénatomja a naftalin gyűrürendszer 2-es helyzetéhez kapcsolódik; a 0-(l-naftil)-D-alanint is egyenértékűnek tekintjük. A jelen találmány szerinti kiindulási peptideket előállíthatjuk oldatban lefolytatott, klasszikus szintézis-módszerekkel vagy szilárd fázisú módszerrel, klór-metilezett gyantán, metil-benzhidril-amin (MBHA) típusú gyantán vagy benzhidril-amin (BHA) típusú gyantán. A szilárd fázisú szintézist úgy hajtjuk végre, hogy a peptidláncban szereplő egyes aminosavakat egymás után (stepwise) kapcsoljuk össze, amint ezt a 4 211 693 számú amerikai szabadalmi leírás részletesen ismerteti. A szerin, tirozin és arginin megfelelő csoportjait előnyösen önmagéban ismert csoportokkal megvédjük, a triptofán megfelelő csoportjait pedig adott esetben ugyancsak önmagában ismert védőcsoportokkal megvédjük, és így kapcsoljuk a gyantához kötött állapotban kiépített peptidlánchoz. Ezzel a módszerrel a gyantához kötött pepiidet mint köztiterméket teljesen védett formában állítjuk elő. A jelen találmány szerinti peptidek előállításához használt köztitermékeket az Ac-Ri-R2-R3(X2)-Ser(X3)-Rs-(X5)-R6(X4 vagy X5)-Leu-Arg(X5)-Pro-X6 általános képlettel jellemezhetjük. X2 jelentése hidrogénatom vagy az indolgyűrű nitrogénatomjának védésére szolgáló védőcsoport, például formilcsoport vagy benzilcsoport; azonban sok peptid előállítása során nem szükséges a triptofán indolgyürűjének nitrogénatomját megvédeni. X3 jelentése hidrogénatom vagy a szerin alkoholos hidroxilcsoportjának védésére szolgáló védöcsoport, például acetilcsoport, benzoilcsoport, tetrahidro-piranil-csoport, tércier-butil-csoport, tritilcsoport, benzilcsoport vagy 2,6-diklór-benzil-csoport. Előnyösen benzilcsoportot alkalmazunk. X4 jelentése hidrogénatom vagy a tirozin fenolos hidroxilcsoportjának védésére szolgáló védöcsoport, például tetrahidro-piranil-csoport, tercier-butil-csoport, tritil-csoport, benzilcsoport, benziloxi-karbonil-csoport, 4-bróm-benziloxi-karbonil-csoport vagy 2,6-diklór-benzil-csoport. Előnyösen 2,6-diklór-benzil-csoportot használunk. X5 jelentése az arginin nitrogénatomjainak védésére szolgáló védöcsoport, például nitrocsoport, tozilcsoport, benziloxi-karbonil-csoport, adamantiloxi-karbonil-csoport vagy tercier-butoxi-karbonil-csoport; Xs jelentése lehet hidrogénatom is, ami azt jelenti, hogy az arginin oldalláncában szereplő nitrogénatomok nem viselnek védócsoportokat. Előnyösen tozilcsoportot használunk. X6 jelentése Gly-0-CH2-(gyanta); D-Ala-0-CH2-(gyanta); Gly-NH-(gyanta); D-ala-NH-(gyanta); vagy glicin-amid vagy D-alanin-amid. A fenti vegyületekről a védőcsoportokat a peptidkémióban önmagéban ismert módszerekkel hasítjuk le. Az oldalláncokban szereplő reakcióképes csoportok védésére szolgáló X^X5 védőcsoportokat úgy kell megválasztanunk, hogy e védöcsoportok a szintézis egyes lépéseiben az cC-amino-csoport védőcsoportjának lehasitésa során alkalmazott reakciókörülmények és reagensek hatására ne hasadjanak le. Szükséges továbbá, hogy e védőcsoportok a kapcsolási reakció körülményei között ne hasadjanak le, valamint, hogy a kívánt peptidlánc felépítése után e védőcsoportokat olyan reakciókörülmények között lehessen lehasitani, amelyek nem változtatják meg a peptidláncot. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
