200782. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új andrasztán-17 ß karbonsav és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
19 HU 200782 B 20 8. Aeroszol orális és nazális inhalálásra Szteroid, mikronizált 0.1 tömegX Szorbitán-trioleát 0.7 tömeg% Triklór-fluor-metán 24.8 tömeg* Diklór-tetrafluor-raetán 24.8 tömeg* Diklór-difluor-metán 49.6 tömeg* 9. Porlasztható oldat Szteroid 7.0 mg Propilénglikol 5.0 g Vízzel kiegészítve 10.0 g-ra 10. Por inhalálásra Zselatin kapszulát a következő eleggyel töltünk meg: Szteroid, mikronizált 0.1 mg Tejcukor 20 mg A por inhalálásra alkalmas készülékkel inhalálható. Hatásvizsgálat Az új androsztán-17béta-karbonsav-észterek affinitása a glükokortkoid receptorhoz A találmány szerinti minden szteroid fiziológiásán aktív vegyület. Az új androsztán-l’7béta-karbonsav-észtereknek a glükokortikoid receptorhoz való affinitásét használtuk modellként a gyulladás gátló hatás meghatározásához.« A receptor-affinitásukat a budezonidhoz, a (22R,S)-16alfa-, 17alfa-butilidéndioxi-17béta, 21-dihidroxi-pregna-l,4-dién-3,20- -dionéhoz hasonlítottuk, amely nagyon hatásos glükókortikoid, kedvező lokális és szisztémás hatáBaránnyal [Thalén és Brattsand, Arzneim. Forsch. 29, 1687-96 (1979)]. A vizsgálathoz 1-2 hónapos him Sprague-Dawley patkányokat használtunk. A csecsemőmirigyet eltávolítottuk és jéghideg sóoldatba helyeztük. A szövetet Potter Elvehjem készülékben 10 ml pufferben homogenizáltuk, amely 20 mM trisz-puffert (pH 7,4), 10 .vegyesX-os glicerines oldatban), 1- mM EDTA-t, 20 mM nátrium-molibdenátot és 10 mM merkapto-etanolt tartalmazott. A homogenizátúmot 15 percig 20 000 x g-n centrifugáltuk. A felülúszó 230 /ul-es részleteit 24 óra hosszat 0 °C-dn 100 pl fenil-metil-szulfonil-fluoriddal (észterázgátló, végső koncentráció 0,5 mM), 20 pl nem jelzett kompetitorral és 50 pl (3H)dexametazonnal inkubáltuk. A kötött és szabad szteroidot úgy választottuk el, hogy az elegyet 60 pl 2,5X-os szénnel és 0,25% dextránt T70-nel 20 mM trisz-pufferben (pH 7,4), 1 mM EDTA és 20 mM . nátrium-molibdenát jelenlétében 10 percig 0 °C-on inkubéltuk. Ezután az elegyet 500 x g-n 10 percig centrifugáltuk, a felülúszó 230 pl-ét 10 ml Insta Gel-ben Packard szcintillációs spektrofométerben számláltuk. A felülúszókat a) (3H)dexa-metazonnal, b) (3H)dexametazon és ezerszeres feleslegben vett nem jelzett dexamet^izon elegyével és c) (3H)dexametazon és 0,03-300-szoros feleslegben vett kompetitor elegyével inkubáltuk. A nemspecifikus kötődést akkor határoztuk meg,, amikor a nem jelzett dexametazont ezerszeres feleslegben adtuk a (3H)dexametazonhoz. A jelzett dexametazon százalékos specifikus kötődését úgy kapjuk meg, hogy a kompetitor jelenlétében a receptorhoz kötődő radioaktivitást osztjuk a kompetitor távollétében mért receptorhoz kötődő radioaktivitással és az eredmény százszorosát vesszük. Minden kompetitor koncentrációra kapott %-os specifikusan kötött radioaktivitást ' a kompetitor koncentráció logaritmusának függvényében ábrázolunk. A görbéket az 50X-os specifikus ■ kötésszintnél összehasonlítjuk,' és a budanozidra vonatkoztatjuk, Így a budenozidra vonatkoztatott relatív kötődési affinitást kapjuk (RBA). Vegyület a példa száma szerint RBA Budezodin 1 1 (B epimer) 0.80 2 (B epimer) 0.14 3 (B epimer) 0.47 4 (B epimer) 0.69 6b 0.42 7b 0.95 8b 1.50 9b 0.39 10b 0.82 13b 1.3 14b 1.2 15b 0.54 16b 0.51 19b 0.53 22b 0.77 24b 0.55 26b 0.45 28b 1.0 32b 0.86 US-A-3 828 080 sz. leírás 68. példájának vegyülete 0.12 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (I) általános képletű androsztán-17béta-karbonsav-é8zterek - a .képletben Xi klór-, bróm- vagy fluoratom, X2 hidrogén-, klór-, bróm- vagy fluoratom, Rí béta-hidroxi-csoport, R2 alfa- vagy béta-metil-csopórt, Rs 1-6 szénatomos alkanoilcsoport, Rí hidrogénatom és Rs 1-4 szénatomos alkilcsoport, vagy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 GO 65 12
