200481. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, természetes LH-RH antagonista hatású peptidek, valamint az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 200481 B 2 A találmány tárgya eljárás új, természetes LH-RH (luteinizáló hormon felszabadító hormon) antagonista hatású peptidek, valamint az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. Az utóbbi években számos kísérlet történt szelektív és nagyon hatékony LH-RH antagonista vegyületek előállítására. Az új vegyületeket az eredeti LH-RH molekula módosításával hozták létre. Az ilyen típusú antagonisták iránti érdeklődést az magyarázza, hogy az LH-RH antagonisták nemcsak az endokrin szektor, hanem különböző rákfajták kezelésére is alkalmazhatók. Különlegesen aktív LH-RH antagonista vegyületeket ismertet a 8.877 számú európai közzétett szabadalmi bejelentés. A találmány szerinti peptidek legalább akkora aktivitással rendelkeznek, mint a korábban ismert peptidek, de könnyebben és olcsóbban előállíthatók, és nem rendelkeznek a korábban ismert peptidek bizonyos mellékhatásaival. Az új, (I) általános képletű peptidek képletében X-R1 -Rí-R3-Ser-Tyr-R4-R5-L-Arg-L-Pro-D-Ala-NH2 (I) X jelentése 2-5 szénatomos alkanoilcsoport, R* jelentése D-Bal(2), D-Bal(3), D-Nal(2), D-Phe vagy D-pCl-Phe, R2 jelentése D-Phe vagy D-pQ-Phe, R3 jelentése D-Trp, D-Bal(2) vagy D-Bal(3), azzal a feltétellel, hogy az R1 és R3 csoport közül legalább az egyik D-Bal(2) vagy D-Bal(3) csoportot jelent, R^ jelentése D-Arg, D-Lys vagy D-(l-4 szénatomos dialkil)-homo Arg csoport, R5 jelentése L-Leu, L-Met, vagy L-Ser 1-4 szénatomos alkilcsoporttal, vagy L-Cys 1-4 szénatomos alkil- vagy 7-10 szénatomos fenil-alkil-csoporttal képzett étere. A találmány szerinti (I) általános képletű peptidek a peptidszintézisben szokásos módon állíthatók elő. Általános módszer a találmány szerinti vegyületek előállítására a kívánt aminosavak homogénfázisú vagy például úgynevezett szilárdfázisú kondenzációval való kapcsolása, mely után az így kapott peptidet védőcsoportjaitól megszabadítjuk és/vagy a szilárd fázisról felszabadítjuk. A homogén fázisú kondenzáció a következő módon hajtható végre: a) egy szabad karboxil-csoportot és védett egyéb csoportokat tartalmazó vegyületet (aminosav vagy peptid) egy szabad aminocsoportot és egyéb védett reaktív csoportokat tartalmazó vegyülettel (peptiddel vagy aminnal) reagál tatjuk egy kondenzáló ágens jelenlétében, b) egy aktivált karboxil-csoportot és adott esetben más védett reaktív csoportokat tartalmazó vegyületet (aminosavat vagy peptidet) egy szabad aminocsoportot és adott esetben más reaktív csoportokat tartalmazó vegyülettel (aminosav, peptid vagy amin) kondenzáljuk, és c) egy szabad karboxil-csoportot tartalmazó és más védett csoportokat tartalmazó vegyületet (aminosavat vagy peptidet) egy aktivált aminocsoportot és adott esetben más, védett reaktív csoportokat tartalmazó vegyülettel (aminosavval, peptiddel vagy aminnal) kondenzáljuk, majd a védőcsoportokat eltávolítjuk. A karboxilcsoport aktiválása inter alia is lejátszódhat a karboxilcsoportnak savhalogeniddé, aziddá, anhidriddé, imidazoliddá vagy aktivált észterré, mint N-hidroxi-szukcinimiddé, N-hidroxi-benztriazollá, p-benztriazollá vagy p-nitrofenil-észterré való átalakításával. Az aminocsoportot foszfit-amiddá való átalakítással vagy a „foszforazo” módszer segítségével aktiválhatjuk. A legáltalánosabban használt módszerek a fenti kondenzációs módszerek végrehajtására a karbodiimid-módszer, az azid-módszer, a vegyes anhidrides módszer és az aktivált észterek módszere, mint ezt „The Peptides” c. könyv 1. kötete Schröder, E., Lübke, K. (1965, Academic Press) leírja. Az (I) általános képletű vegyületek Merrifield „szilárd fázisú” módszerével [J. Am. Chem. Soc., 85, 2149 (1963)] is előállíthatók. A peptidek aminosavainak kapcsolása a karboxil-terminális oldalról kezdődik. Ezért egy szilárd hordozó alkalmazása szükséges, amelyen a reaktív csoportok jelen vannak, vagy amelyhez ezek a csoportok kapcsolhatók. Ilyen hordozó lehet például a reaktív klór-metilcsoportokat tartalmazó sztirol- vagy divinil-benzol- vagy hidroxi-metil- vagy benzil-amincsoportok révén reaktívvá tett polimer hordozó. Ha például klór-metilcsoportokat tartalmazó hordozót alkalmazunk, az első alfa-amino-védett aminosav hordozóhoz való kapcsolása egy észter kötésen keresztül valósul meg. Az alfa-aminocsoportján védett aminosav a jelen esetben D-Ala vagy Gly. Jelen esetben a hordozóhoz való kötés a következő anyag kialakulását eredményezi: R-NH-A-C-0-CH2-polimer II O '---------------------v----------------—;------------V-------------------' aminosav szilárd hordozó ahol R jelentése alfa-amino-védőcsoport. Ha benzilamin csoportokat tartalmazó hordozót használunk, a kapcsolás egy amin-kötésen keresztül valósul meg, és a következő szerkezetű anyag jön létre: R-NH-A-C(0)-NH-CH2-Phe-polimer aminosav szilárd hordozó Az R csoport eltávolítása után a következő alfa-amino-védett aminosav (jelen esetben L-Pro vagy L-tiaprolil-csoport) kapcsolható, majd ehhez a következő aminosav kapcsolható az alfa-aminocsoport védőcsoportjának eltávolítása után, stb. A kívánt aminosav-szekvencia szintézise után a teljes peptidet felszabadítjuk a hordozóról. A hordozó és a kívánt peptid-származék természetétől és típusától függően ezt a lehasítást hidrolízissel, alkoholízissel, aminolízissel vagy hidrogénezéssel hajthatjuk végre. A találmány szerinti peptid esetén, melyben a C-terminális csoport egy karboxamidcsoportot tartalmaz (-D-Ala-NH2 vagy -Gly-NH2) olyan hordozók és eltávolítási módszerek előnyösek, amelyek közvetlenül ilyen amincsoportot eredményeznek. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
