200479. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunimpressziós aktivitással rendelkező peptidek és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 200479 B 2 3 1 -etil-3-(3-dimetilamino-propil)-karbodiimid-HCl-dal konjugált BSA egyedül b a BSA-val konjugált peptid koncentrációja. 7. példa 5 A *H-timidin beépülés gátlása különböző peptidek által anti-T3-ra érzékenyített limfocitákban Humán perifériális mononukleáris Ieukocitákat (MNL) izolálunk várból, Ficoll-Hypaque sűrűség szerinti ülepítéssel. Az MNL-t (105) anti-T3-mal te- 10 nyésztjük (1:10,000 hígítás, Ortho Diagnostics (0,1 ml DNEM-ben, amelyet 2 % FCS-sel egészítettünk ki, 96 helyes mikrotitráló lemezeken. 72 órás inkúbálás után (37 ”Q - amely magában foglal, a tenyésztés utolsó 18 órájában, egy 1 jiCi (3)TdR-rel 15 végzett besugárzást - a sejteket izoláljuk és az aktivitást a 6. példában leírt módon meghatározzuk. Vegyület Peptidb 3H-timidin beépítés |iM cpm Gátlás,% 20 BSA kontroll3 0 43934 ± 5076 — 0 57388 ±6153 — 3. példa 24 14027 ± 867 68 12 31667 ± 4729 45 25 1. példa 18 21984 ± 3824 50 9 38521 ± 5349 33 2. példa 28 20041 ± 3331 54 14 44151 ± 2151 23 4. példa 8 39248 ± 5251 11 30 4 54331 ± 4717 5 a 1 -etil-3-(3-dimetilamino-propil)-karbodiimid-HCl-lel konjugált BSA egyedül b a BSA-val konjugált peptid koncentrációja. 35 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás Tn-A-B-C-D-Tc általános képletű peptidek - a képletben Tn jelentése hidrogénatom, 40 A jelentése -Leu-Arg-Lys-Leu-Arg-, -Thr-Arg-Leu-Thr-Arg-,-Leu-Gin-Asn-,-Glu-Val-Val-Leu-Gln-Asn-, és 45 valamennyi peptidrészben a Leu helyett Ile, az Asp helyett Glu, az Asn helyett Gin szerepelhet, B jelentése 2 aminosav-maradékot tartalmazó peptid-fragmentum, amely aminosav Arg vagy Lys lehet, 50 C jelentése 2 aminosav-maradékot tartalmazó peptid-fragmentum, amely aminosav Gly, Leu, De lehet, D jelentése-Arg-Asp-Ala-Asp-Asp-Leu-, 55 -Lys-Leu-Ala-Thr-Ala-Leu-,-Asp-Leu-Leu-Phe-Leu-Lys-Glu-Gly-Gly-Leu-,-Leu-, és Te jelentése egy karboxi-terminális maradék, mégpedig - OH vagy amino-csoport -, előállítására szilárd fázisú szekvenciális és blokkszintézissel, azzal jellemezve, hogy egy megfelelően védett aminosavat - amely az A csoport karboxil-terminális aminosavának felel meg - hozzákapcsolunk egy aktivált gyanta-hordozóhoz, majd egymás után az A, B, C és D csoport többi, alfa-amino-védett aminosavait visszük fel a növekvő peptidlánc terminális amino-csoportjára, a karboxil-terminálistól az amino-terminálisig vett sorrendben, miközben a növekvő peptidláncot az amino-védőcsoport eltávolításával szabaddá teszszük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan Tn-A-B-CD-Tc általános képletű vegyületek előállítására, amelyekben C jelentése egy 2 aminosav-maradékot, mégpedig Gly-t vagy Leu-t tartalmazó peptidfragmentum, Tn, A, B, D és Te jelentése az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített kiindulási anyagot alkalmazzuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás H-Leu-Arg-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Leu-Leu-Arg-Asp-Ala-Asp-Asp-Leu-NH2 képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített kiindulási anyagokat alkalmazzuk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás H-Thr-Arg-Leu-Thr-Arg-Lys-Arg-Gly-Leu-Lys-Leu-Ala-Thr-Ala-Leu-NFfc képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített kiindulási anyagokat alkalmazzuk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás H-Leu-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu- Phe-Leu-Lys-Glu-Gly- Gly-Leu-NH2 képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített kiindulási anyagokat alkalmazzuk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás H-Glu-Val-Val-Leu-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Leu-OH képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített kiindulási anyagokat alkalmazzuk. 7. Eljárás az immunrendszer és a limfocita rendszer működésének, valamint a limfociták szaporodásának elnyomására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárással előállított Tn-A-B-C-D-Tc általános képletű peptidet, e képletben a helyettesítők jelentése az 1. igénypontban megadott, vivőanyaggal és adott esetben adalékanyaggal összekeverve gyógyszerkészítménnyé feldolgozzuk. Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Dr. Szvoboda Gabriella osztályvezető SZÜV LASER GYŐR Felelős vezető: a Számítóközpont igazgatója
