200473. lajstromszámú szabadalom • Eljárás difluor-ciklosztatint tartalmazó polipeptidek és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 200473 B 2 végzünk, és ily módon 155 mg kívánt terméket kapunk. IC. 5-Ciklohexil-(S)-4-amino-(R)-3-hidroxi-2 2- -difluor-pentánsav-N-metil-amid-hidroklorid 139 mg 5-ciklohexil-(S)-4-terc-butoxi-karbonil-amino-(R)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentánsavat 2 ml 4 n dioxános sósavban oldunk 25 'C hőmérsékleten. 1 óra elteltével az elegyet vákuumban bepároljuk, és a maradékot szárítva 119 mg cím szerinti, sárga, poralakú terméket kapunk. ID. BocPheHis(imBoc)-2,2-difluor-ciklohexilSta-N-metil-amid 115 mg 5-ciklohexil-(S)-4-amino-(R)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentánsav-N-metil-amid-hidroklorid 1 ml metilén-kloriddal készített oldatához 0 ”C hőmérsékleten 0,069 ml trietil-amint, 211 mg BocPheHis (imBoc)-t, 97 mg 1-hidroxi-benzotriazolt és néhány perces keverés után 87 mg diciklohexil-karbodiimidet adunk. Az elegyet 0 °C hőmérsékleten, 5-6 órán át keverjük, majd 25 “C hőmérsékletre hagyjuk melegedni, ahol a keverés további 12 órán át folytatjuk. Az elegyet szűrjük, a szilárd anyagot metilén-kloriddal mossuk, és a mosófolyadékot és szűrletet egyesítjük, majd szárazra pároljuk. A maradékot etil-acetátban újra oldjuk, és az oldatot kétszer 2 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, és vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert vákuumban lepároljuk, és a maradékot 13 g szilikagélen kromatografáljuk, 200-200 ml, 0,5, 1,0, 2,0, 4,0 és 6,0 %-os metilénkloridos etanollal. A megfelelő frakciókat egyesítjük és szárazra pároljuk, ily módon színtelen habként 209 mg terméket kapunk. IE. BocPheHis-2,2-Diflnor-ciklohexilSta-N-metil-amid 200 mg BocPheHis(imBoc)-2,2-difluor-ciklohexilSta-N-metil-amid 1,6 ml jégecettel készített oldatához 0,4 ml vizet adunk, és a reakcióelegyet 25 °C hőmérsékleten 2,5 órán át, majd 0 °C hőmérsékleten 15 órán át keverjük. Az elegyet vákuumban bepároljuk, és a kapott maradékot dietil-éterrel ismét bepárolva 180 mg fehér, poralakú terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum, DMSO-dő, 250 mHz, részleges, ppm TMS-ből: 1,32 (s, 9H, Boc), 2,69 (d, 3H, CH3N), 3,38 és 4,17 (m, 2H ea), 3,97, 4,48, 8,09 és 8,82 (m, 1H ea), 6,87 és 7,58(s, 1H ea,imidazolil CH),7,58 (m, 1H) 7,08 (d, 1H), 7,15-7,35 (m, kb. 6H, aromás). 2. példa BocPheHis-2,2-Difluor-epi-ciklohexilSta-N-metil-amid 1(1) általános képlet, ahol X = (b) képletü csoport és Rí = -NHCH3] 2A. 5-Ciklohex\l-(S)-4-terc-butoxi-karbonil-amino-(S)-3-hidroxi-2 2 -difluor-pentánsav-N-metil-amid 122,5 mg etil-5-ciklohexil-(S)-4-terc-butoxi-karbonil-amino-(S)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentanoátból (1A. példa) kiindulva, és az 1B. példa szerinti eljárást megismételve, azzal a különbséggel, hogy a rekcióelegyet 4 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, a kívánt terméket fehéres porként 97 %-os kitermeléssel nyerjük. 2B. 5-Ciklohexil-(S)-4-amino-(S)-3-hidroxi-2 2- -difluor-pentánsav-N -metil-amid-hidroklorid Az IC. példában leírtak szerint járunk el, és 99 mg 5-ciklohexil-(S)-4-terc-butoxi-karbonil-amino-(S)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentánsav-N-dimetil-amidból indulunk ki. Ily módon a kívánt terméket sárga porként kvantitatív kitermeléssel állítjuk elő. 2C. BocPheHis( imBoc )-2 2 -Difluor-epi-ciklohexil-Sta-N-metil-amid Az 1D. példában leírtak szerint járunk el mindenben, azonban kiindulási anyagként 82,6 g 5-ciklohexil-(S)-4-amino-(S)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentánsav-N-metil-amid-hidrokloridot alkalmazunk, és így a kívánt terméket színtelen habként 62 %-os kitermeléssel állítjuk elő. 2D. BocPheHis-2 2 -Difluor-epi-ciklohexilSta-N-metil-amid Mindenben az 1D. példában leírtak szerint járunk el, kiindulási anyagként 119,7 mg BocPheHis (imBoc)-2,2-difluor-epi-ciklohexilSta-N-metil-amidot alkalmazva. A kívánt terméket kvantitatív kitermeléssel, színtelen porként állítjuk elő. •H-NMR-spektrum, DMSO-dö, 250 mHz, részleges, ppm TMS-ből: 1,32 (3, 9H, Boc), 2,70 (d, 3H, NCH3), 3,0 (m, 2-3H), 3,96-4,27 (átfedés m, 3H), 4,51 (q, 1H), 6,88 és 7,48 (s, 1H ea, imidazolil CH), 7,1-7,35 (m, 6-8H, aromás és NH), 7,84, 7,95 és 8,60 (m, 1H ea, NH). 3. példa BocPheHis-2 2 -Difluor-ciklohexilSta-etil-észter [(I) általános képlet, ahol X = (a) képletü csoport] és R] = -OC2H5] 3A. Etil-5-ciklohexil-(S)-4-amino-(R)-3-hidroxi-22- -difluor-pentanoát-hidroklorid 76 mg etil-5-ciklohexil-(S)-4-terc-butoxi-karbonil-amino-(R)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentanoátot 2 ml 4 n dioxános sósavval kezelünk 25 °C hőmérsékleten 30 percen át. Az elegyet vákuumban szárazra párolva 57 mg cím szerinti terméket kapunk, színtelen porként. 3B. BocPheHis(imBoc)-2,2-Difluor-ciklohexilSta-etil-észter Az 1D. példában leírtak szerint járunk el, oly módon, hogy 53 mg etil-5-ciklohexil-(S)-4-amino-(R)-3-hidroxi-2,2-difluor-pentanoátot 0,5 ml metilén-kloridban 0,03 ml trietil-aminnal semlegesítünk, majd 89 mg BocPheHis(imBoc)-al kapcsolunk 42 mg 1- -hidroxi-benzotriazolt és 36 mg diciklohexilkarbodiimidet alkalmazva. A terméket 4 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 2 % etanolt tartalmazó metilén-kloridot alkalmazva, és ily módon 104 mg sárga, hab alakú terméket kapunk. 3C. BocPheHis-2,2-difluor-ciklohexilSta-etil-észter 99 mg BocPheHis(imBoc)-2,2-difluor-ciklohexil- Sta-etil-észtert 1,5 ml jégecet-víz (4:1) tf elegyben oldunk, és 25 "C hőmérsékleten 18 órán át keverünk. Az elegyet ezután vákuumban bepároljuk, dietil-éterrel újra bepároljuk, majd súlyállandóságig szárítjuk, és ily módon 87 mg színtelen, hab-alakú terméket kapunk. Hasonló módon, etil-5-ciklohexil-(S)-4-terc-butoxi-karbonil-amino-(S)-3-hidroxi-2,2-dífluor-pentanoátból kiindulva, és a 3A- 3C. eljárások szerint eljárva BocPheHis-2,2-difluor-epi-ciklohexilSta-etil-észtert állítunk elő. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
