200457. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált beta-karbolin-származékok, valamint az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 200457 B 2 A találmány tárgya eljárás új, szubsztituált /3-karbolin-származékok és azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A találmány szerinti vegyületek értékes farmakológia! tulajdonságokkal rendelkeznek. Különösen a központi idegrendszerre fejtenek ki hatást és így pszichofarmakonként alkalmazhatók. Az új (I) általános képletü ß-karbolin-származékok a 3-helyzetben szubsztituált (1.2.4 )-oxadiazol-5-il-csoporttal vagy alkil-oxi-karbonil-csoporttal szubsztituáltak, és a szubsztituens az oxadiazolcsoporton és az oxi-karbonil-csoporton egyaránt legfeljebb 3 szénatomos rövidszénláncú alkílcsoport. Példaként említjük a metil-, etil-, propil- és izopropilcsoportot. A 4-helyzetben az új 0-karbolin-származékok vagy hidrogénatomot, rövidszénláncú alkilcBoportot, Így metil- vagy etilcsoportot, vagy rövidszénláncú alkoxi-metil-csoportot tartalmaznak. RA jelentése 4-12 szénatomos, egy kettőskötést tartalmazó cikloalkenilcsoport; 4-8 szénatomos cikloalkilcsoport, melyek adott esetben egy oxocsoporttal lehetnek helyettesítve; 2-10 szénatomos, legfeljebb 2 kettőskötést tartalmazó alkenilcsoport, mely adott esetben 4-8 szénatomos cikloalkilcsoporttal lehet helyettesítve; 1-8 szénatomos alkilcsoport, mely adott esetben 4-8 szénatomos cikloalkilcsoporttal vagy formilcsoporttal lehet helyettesítve; fenilcsoport; fenil-(l-4 szénatomos alkil)-csoport; hidroxil- vagy 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal helyettesített tetrahidrofuranil-csoport. Az RA szubsztituens az 5- vagy 6-helyzetben, előnyösen a 6-helyzetben található. Ismert, hogy gerincesek központi idegrendszerében bizonyos helyek nagy specifikus affinitással kötnek meg 1,4- és 1,5-benzodiazepin-származékokat [(Squires, R. P. and Braestrup, C. Nature (London) 266, 734 (1977)]. Ezeket a helyeket benzodiazepin-receptoroknak nevezik. Azt találtuk, hogy a találmány szerinti szubsztituált ű-karbolinszármazékok, bár kémiai szerkezetük nagy mértékben különbözik a benzodiazepinekétöl, meglepő módon nagy affinitással és specifitásBal kötődnek a benzodiazepin-receptorokhoz, és eközben a jelzett, radioaktív Flunitrazepamot kiszorítják ezekről a benzodiazepin-receptorokról. A találmány szerinti vegyületek kiszorítási aktivitását az alábbi táblázatban ICso-és EDso-értékek formájában adjuk meg. Az ICso-érték megadja azt a koncentrációt, amely 0,55 ml össztérfogatú agymembrán-szuszpenziókkal, például patkányéval, végzett kísérletekben a specifikusan kötött 3H-Flunitrazepam (1,0 nM, 0 °C) 50%-át kiszorítja. A kiszorítási aktivitást in vitro tesztben a következőképpen határozzuk meg: 0,5 ml,' 25 mM KHzPOí-oldattal, pH=7,l, készített kezeletlen patkánynagyagy-szuszpenziót 0 °C- on 40-60 percig 3H-diazeparamal (fajlagos aktivitás 14,4 Ci/mMol, 1,9 nM) vagy 3H-flunitrazepammal (fajlagos aktivitás 87 Ci/mMol, 1,0 nM) inkubálunk. Inkubálás után a szuszpenziót üvegfritten szűrjük, a maradékot hideg pufferoldattal kétszer mossuk és szcintillációs számlálóban mérjük az aktivitást. A kísérletet azután megismételjük, mégpedig oly módon, hogy a jelzett, radioaktív benzodiazepin hozzáadása előtt meghatározott mennyiségben vagy feleslegben adagoljuk azt a vegyületet, amelynek a kiszorítási aktivitásét meg kell határozni. A kapott értékek alapján kiszámítjuk az ICso-értéket. Az EDso-érték a kísérleti anyagnak azt a dózisét jelenti, amely élő agyban a benzodiazepin-receptorhoz specifikusan kötött flunitrazepamnak a kontroli-érték 50%-ra való csökkenését okozza. Az in vivo tesztet a következőképpen kivitelezzük: Egerek csoportjaiba különböző dózisokban kísérleti anyagot injektálunk szubkután. 15 perc elteltével az egereknek 3H-flunitrazepamot adunk intravénásán. További 20 perc eltelte után az egereket megöljük, eltávolítjuk az elülső agyhártyát és radioaktivitásét szcintillációs berendezéssel mérjük. Az EDso-értéket a dózis-hatásgörbék segítségével határozzuk meg. A farmakológiai tesztek eredményeit az alábbi táblázat tartalmazza. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 3
