200452. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kinolin-származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
19 HU 200452 B 20 A vizsgált vegyületek antibakteriális hatását in vitro az 1. táblázatban ismertetjük. Az adatok a szabad bázis formára szá- 5 mitott minimális gáltó koncentráció értékeket jelölik, pg/ml-ben. A minimális gátló koncentrációt kétszeres agar-higitásos módszerrel határozzuk meg, a Japan Society of Chemotherapy [Chemotherapy, 29 (1), 76 (1981)] ál- 10 tál javasolt módon, Muller—Hinton agart használva. A vizsgált mikroorganizmus Muller-23. példa-Hinton tápfolyadékos 1 éjszakás tenyészetéből 1 kacsnyit Petri-csészóben lévő 10 ml, vizsgálandó vegyületet tartalmazó agar-rétegre oltunk. A baktérium-inokulum közel 106 telepképzó egységnyi baktériumot tartalmaz. A lemezeket 37 °C-on 20 órán át inkubáljuk, majd kiértékeljük a baktériumok szaporodását. A minimális gátló koncentráció alatt azt a legalacsonyabb hatóanyag-koncentrációt értjük, amelynek jelenlétében már vizuálisan nem észlelhető bakteriális szaporodás. 1. táblázat: In vitro antibakteriális aktivitás Mikroorganizmus törzs Minimális gátló koncentráció (ug/ml) 1. 2. 3. 4. vegyület 5. 6. A. Gram-pozitív S. aureus 209P JC-1 0.025 0.05 0.05 0.1 0.05 0.025 0.2 S. aureus No. 50774 0.0125 0.025 0.05 0.05 0.025 0.0125 0.2 S. aureus No. 80 0.0125 0.0125 0.05 0.025 0.025 0.0063 0.2 S. epidermidis No. 8 0.025 0.025 0.05 0.05 0.05 0.025 0.39 B. subtilis PCI 219 0.05 0.05 0.1 0.1 0.1 0.025 0.39 Gram-negativ Ac. calcoaceticus P-6901 0.0125 0.0125 0.05 0.025 0.0125 0.0063 0.2 E. coli P-51213 0.025 0.05 0.1 0.1 0.05 0.05 0.39 Al. faecalis P-7001 0.1 0.2 0.2 0.2 0.2 0.05 0.78 P. aeruginosa No. 12 0.1 0.2 0.2 0.2 0.39 0.2 0.78 M. bovis P-7101 0.2 0.39 0.39 0.39 0.39 0.1 3.13 24. példa A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek in vivo hatását egérben okozott szisztémás fertőzés ellen a 2. táblázatban ismertetjük. A vizsgálandó vegyületeket ionmentes vizben oldjuk. Az egyes oldatokat orálisan adagoljuk az egyes vizsgált organizmusokkal az alább ismertetett módon fertőzött egereknek. A közepes hatásos dózist (EDso) probit-analizis módszerrel számoljuk ki. A 2. táblázatban ismertetett EDso (mg/kg) értékeket a szabad bázis formára adjuk meg. Kísérleti körülmények: Kisérleti állat: közel 20 g testtömegű, hím egér (ddY-S) Fertőzés: Staphylococcus aureus 50774: intravénás fertőzés sóoldatban szuszpendált 5x10® sejttel egerenként 40 Streptococcus pneumoniae 1 Neufeld: intraperitoneális fertőzés agy-sziv infúziós tápközegben szuszpendált 3xl03 sejttel egerenként 45 Streptococcus pyogenes A65: intraperitoneális fertőzés agy-sziv infúziós tápközegben szuszpendált 3xl07 sejttel egerenként 50 Pseudomonas aeruginosa 12: intraperitoneális fertőzés 4% mucint tartalmazó triptoszója tápközegben szuszpendált közel 5xl03 sejttel egerenként 55 Kezelés: négy alkalommal, a fertőzés után azonnal, 6 órával, 24 órával és 30 órával a Sterptococcus pneumoniae 1 esetén; és a többi 60 mikroorganizmus esetén két alkalommal, a fertőzés után azonnal és 6 órával. Megfigyelés: a Staphylococcus aureus 50774 és Strepto- 65 coccus pneumoniae esetén 14 napon át, a többi mikroorganizmus esetén 7 napon át. 12
