200366. lajstromszámú szabadalom • Eljárás módosított higromicin rezisztencia gén előállítására
1 HU 200366 B 2 ai) a pIT125 plazmid előállítására a pIT123 plazmidot BamHI-gyel és BglII-vel emésztjük, és a keletkezett 1,3 kb nagyságú BamHI/BglII restrikciós fragmenst ligáljuk a pIA7A4Al plazmid 4,5 kb nagyságú BamHI/BglII restrikciós fragmensével, vagy a2) a pIT144 plazmid előállítására pIT123 plazmid 1,3 kb nagyságú BamHI/Bgin restrikciós fragmensét ligáljuk a pUC7 plazmid BamHI fragmensével, vagy a3) a pIT208 plazmid előállítására a pIT123 plazmid 1,3 kb nagyságú BamHI/BglII restrikciós fragmensét ligáljuk a pIT207 plazmid BamHI fragmensével, vagy M) a pIT212 plazmid előállítására a pIT123 plazmid 1,3 kb nagyságú BamHI/BglII restrikciós fragmensét ligáljuk a pRB5 plazmid BamHI helyére, majd kívánt esetben a4.i) a pIT213 plazmid előállítására a pIT212 plazmid Smal helyére a pN659x plazmid 1,7 kb nagyságú PvuII restrikciós fragmentumát ligáljuk, a4. l. l) a pIT215 plazmid előállítására a BamHI enzimmel hasított pIT213 plazmidot a pIT118 plazmid 750 bázispár hosszúságú BamHI/BglII restrikciós fragmensével ligáljuk, vagy a4.1.2) a pIT217 plazmid előállítására a BamHI enzimmel hasított pIT213 plazmidot a pIT120 plazmid 1 kb nagyságú BamHI/BglII restrikciós fragmensével ligáljuk, vagy a4.t.3) a pIT219 plazmid előállítására a BamHI enzimmel hasított pIT213 plazmidot a pIT143 plazmid 230 bázispár hosszúságú BamHI fragmensével ligáljuk, vagy b) a pKC307 plazmid előállítására a Hphl enzimmel hasított pIT104 plazmidot ligáljuk a Hindi enzimmel emésztett pUC8 plazmiddal, majd kívánt esetben bt) a pKC308 plazmid előállítására a pKC307 plazmidból kivágjuk az 1,7 kb nagyságú Hindffl fragmenst, vagy c) a pIT207 plazmid előállítására a pIT118 plazmid 750 bázispár hosszúságú BamHI/BglII fragmensét ligáljuk a pMC1587 plazmid BamHI restrikciós helyére, vagy d) a pIT143 plazmid előállítására a pIT141 plazmid 958 bázispár hosszúságú Clal/HincII fragmensét Mbo- II restrikciós enzimmel emésztjük, az egyszálú részeket BamHI linkereket kapcsolva megszüntetjük, és a linkért tartalmazó fragmenst a pUC8 plazmid BamHI restrikciós helyére ligáljuk. (Elsőbbsége: 1984. 07. 20.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás a pIT125, pIT144, pIT207, pIT208, pKC307 és pKC308 plazmidok előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelő plazmidokból indulunk ki. (Elsőbbsége: 1983. 07. 22.) 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás a pIT143, pIT212, pIT213, pIT2l5, pIT217 és pIT219 plazmidok előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelő plazmidokból indulunk ki. (Elsőbbsége: 1983. 09. 26.) 5 10 15 20 25 20