200202. lajstromszámú szabadalom • Inokuláló készülék
1 HU 200202 A 2 Találmányunk tárgya új szerkezeti felépítésű, a korábbi készülékeknél előnyösebben alkalmazható inokuláló készülék, melynek alkalmazásával a megkívánt, célszerűen nagyszámú, előnyösen 16—36 mikroorganizmus törzs vihető fel egyidőben a Petri csészékben elhelyezett antibiotikum tartalmú táptalajok felületére, mégpedig minden esetben azonos térfogatban. A készülék mikrobiológiai laboratóriumokban végzendő inokuláláshoz, azonos térfogatú baktérium szuszpenzió folyékony, vagy szilárd táptalajra való átoltásához egyaránt alkalmas. Az agar hígításos technikák esetén az antibiotikum hígítási sorok elkészítése után nagyszámú baktérium törzzsel dolgoznak a laboratóriumokban, melyeket egyenként fel kell vinni a Petri csészékbe ill. egyéb alkalmas edényekben elkészített táptalajok felületére a MIC (minimális gátló koncentráció) meghatározások céljából. Ilyen esetekben igen nagy jelentősge van a pontosság szempontjából annak, hogy a felvitt térfogatok egymással a lehető legnagyobb mértékben megegyezzenek, mert az inokulum szám (a meghatározott térfogatban lévő baktériumok száma) a vizsgált eredmények pontosságát nagymértékben befolyásolja. A felvitelek számos technikája kialakult, közéjük tartoznak a pipettás ill. az automata-pipettás eljárások, valamint a külön e célra elkészített berendezések alkalmazása is. Ezen berendezések közé tartozik például az 517.632 lajstromszámú szovjet szabadalmi leírás által ismertetett készülék is. A szabadalom szerinti készülék fő elemei szerint, a korongban rögzített tűk oly módon vannak kiképezve, hogy azok alsó, az inokulummal érintkeő részei seprűkre emlékeztetnek, míg felső végeik derékszögben hajlítottak és két korong közé vannak beszorítva. A berendezés fogóval van ellátva és nem tartozik hozzá stabü és egyenletes átoltást biztosító vezető henger. A találmány szerinti seprűszerűen kialakított kacsvégek éppen az átoltásra kerülő telepek eltérő állaga következtében nem alkalmasak azonos mennyiségű oltóanyag átvitelére. A készülék célszerű felhasználási módja a mikroorganizmusok agárról agarra történő átoltása. További készülék került ismertetésre az Antibiotics and Chemotherapy IX., 5., 307-311 (1959) számában. Az ismertetett készülék egy csúsztatható, a teflon oltólemez helyzetének beállítására szolgáló tartóból áll, melyen 36 inokulum trtó helyezkedik el, és megtalálható egy másik lemez is, mely az inokulálandó közeget tartalmazza: tartalmaz továbbá egy alumínium fejet, melybe 36 speciálisan elhelyezett inokuláló rúd került beillesztésre olyan elrendezésben, mely megfelel az inokulum tartók elrendezésének; tartalmaz továbbá dugattyút, rugót, hengert, megfelelő háromszögletű lemezhez csatlakoztatva. A dugattyú normál helyzetében megemelt állapotban van, melyet a hengerben elhelyezett rugó korlátozott extenziója határoz meg. A háromszögletű lemez segítségével szabályozható a rudak olyan mozgása, mely lehetővé teszi, hogy a rudak ne károsítsák az agar közeget. Ez az állíthatóság lehetővé teszi a dugattyú olyan maximális lenyomását, mellyel teljes lenyomáskor sem sérül az agar felülete. beépített segédeszközzel lehetséges az oltólemezek és az inokulum edények precíz helyzetének beállítása, figyelembe véve a fej inokuláló rúdjait is. Az ismertetett inokuláló eljárások és berednezések számos hátránnyal rendelkeznek. A pipettázási, illetve automata pipettát alkalmazó eljárások rendkívül időigényesek. Az automata-pipettával felvitt térfogatok általában nagyobb felületen oszlanak el, ily módon egy Petri csészére általában legfeljebb 6 mikroorganizmus törzset lehet inokulálni. A megnevezett szovjet szabadalomban leírt inokuláló készülék egyrészt nem alkalmas folyadék kultúrák átoltására, másrészt nagyfokú bizonytalanság jár együtt az alkalmazásával, melyek közé többek között az agar felületének megsértése és az átvitt mennyiségek nagy pontatlansága is tartozik. Az említett folyóiratcikk szerinti készülék lényegesen fejlettebb és szakszerűbben alkalmazható, mint a pipettákat alkalmazó eljárások. Jelentős hátránya viszont ezen készüléknek, hogy inokuláló rudakat tartalmaz. A rudak felületét nem lehetséges oly módon kiképezni, hogy azok a megfelelő folyadék kultúrából mindig azonos térfogatú anyagmennyiséget vegyenek fel és oltsanak át a szilárd táptalajra, ezért a vizsgálat inkább tájékoztató jellegűnek tekinthető ezen készülék alkalmazásával. Találmányunk szerinti berendezés kidolgozásánál főként ezen hiba kiküszöbölését tűztük ki célul. Az általálunk továbbfejlesztett berendezéssel az inokulálásokkor minden egyes oltókaccsal azonos térfogatot lehet átoltani, tehát a táptalajra felvitt inokulum mennyisége a készülék alkalmazásával pontosan kiszámítható. Találmányi bejelentésünk szerinti célt oly módon érjük el, hogy az inokuláló rudak helyett, hitelesített azonos térfogat felvételére és leadására alkalmas kacsokat, előnyösen Takátsy féle kacsokat alkalmazunk. A találmányunk, az 1., la. és 2. ábra szerinti — az 1. ábra szerinti asztal kialakítás — inokuláló készülék, mely folyékony mikroorganizmus kultúrák átoltására alkalmas és mely fő részeiben 8 asztalból 12 hengerformájú oszlopból, 1 kacstartóból, 2 kacsokból, továbbá 4 inokul álócsőtartóból, 19 Petri csésze tartóból áll, a célt oly módon érjük el, hogy a 8 asztalba két 6 vezetősín, 5 pozíció jelző és 7 vízszint beállítására alkalmas lábak vannak építve és amelyhez az ozíció jelzővel ellentétes oldalon 12 hengerformájú oszlop van szilárdan beépítve, mely 12 hengerformájú la vezetőhengerből, 11 vágálláshatárolókból, 13 rugóból, összekötő hengerből (17) és fejből áll és amely 12 hengerformájú oszlophoz a 18 fej magasságában önmagában ismert 1 kacstartó került hozzáépítésre és amely 1 kacsatartóba cserélhető módon azonos térfogatú folyadékok felvitelére és leadására alkalmas 2 kacsok kerületek behelyezésre. Találmányunk szerinti készülék 6 síneken csúsztatható 19 Petri csésze tartóból és speciális beosztású, szintén csúsztatható 4 inokulumcső tartóból áll, amely utóbbiakban célszerűen 36 mm magasságú és 10 mm átmérőjű inokulumot tartalmazó 3 inokulum csövek helyezhetők el. A 6 sínek a 8 asztalba vannak építve, mely 8 asztal vízszint beállításra alkalmas 7 lábakon áll. A 8 asztal proximális oldalához 5 pozíció jelző van építve, mely a 9 oszloporsó 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2