199879. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hexapeptidek és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199879 B 2 GABA-Arg-Pro-Trp-Pgl-Leu-Oet Ah-Arg-Pro-Trp-Pgl-Leu-OMe Gh-Arg-Pro-T rp-Pgi-Lcu-OMc Gp-Arg-Pro-Trp-Pgl-Leu-OEt H-D-Arg-Arg-Pro-T rp-Pgl-Leu-OMe Ah-Arg-Pro-T rp-Ile-Leu-OMe H-D-Lys-Arg-Pro-Trp-Pgl-Leu-OEt H- D-Arg- Lys- Pro-Tr p- Pgl- Le u-OMe H-D-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu-OMe H-D-Lys-Arg-Pro-T rp-Ile-Leu-OH H-D-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu-OEt H-D-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu-OEt H-D-Lys-Lys-Pro-Trp-Ile-Leu-OMe H-(Me)Arg-Arg-Pro-Trp-Tle-Leu-Ome H-(Me)Arg-Arg-Pro-Trp-Tle-Leu-OH (Me^Arg-Arg-Pro-Trp-Tle-Leu-OH H-(Me)Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OH (Me^Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OH H-(Me)Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OEt H-D-Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OEt H-(Me)Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OMe H-(Me)Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OnPr Bz-D-Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OEt H-(Me)Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OBn Bz-D-Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OH Gb-Arg-Pro-T rp-Pgl-Leu-OH Ah-Arg-Pro-T rp-Pgl-Leu-OH H-D-Arg-Lys-Pro-Trp-Tle-Leu-OH H- D- Lys- Lys- Pro-Trp-Tle- Le u-O H. Az (I) általános képletű hexapeptidek előállítása során a találmány értelmében önmagában ismert módon járunk el. A védett peptid szintézise megvalósítható a szokásos folyadékfázisú vagy szilárd fázisú módszerrel. Az aminosavak oidalláncbeli funkciós csoportjait előnyösen védőcsoporttal védjük és az utolsó lépésben valamennyi védőcsoportot eltávolítjuk. Az aminosavak oidalláncbeli funkciós csoportjainak védésére bármely ismert védőcsoport felhasználható, példaként említhető a tozilcsoport (Tos), a nitrocsoport (NO2), a benzilcsoport (Bzl), a terc-butil-csoport (Bu1), a benzil-oxi-karbonil-csoport (Z), a terc-butoxi-karbonil-csoport (Boc) és a 4-metoxi-2,3,6-trimetil-benzol-szulfonil-csoport (Mtr). Az aminosav alfa-aminocsoportjának védésére bármely ismert védőcsoport felhasználható. Az alfa-amino-védőcsoportját előnyösen a függő funkciós csoport védőcsoporttal kombináljuk és így szelektív eliminálást teszünk lehetővé. így például, az alfa-amino-csoportot terc-butoxi-karbonil-csoporttal védjük, míg a függő funkciós csoportot benzilcsoporttal vagy benzil-oxi-karbonil-csoporttal védjük, vagy az alfa-amino-csoportot benzil-oxi-karbonil-csoporttal, és a függő funkciós csoportot terc-butil-csoporttal vagy terc-butoxi-karbonil-csoporttal védjük. Ha az N-terminális aminosav dialkilezett aminocsoportot tartalmaz, védőcsoport alkalmazására nincs szükség. A racemizálás elkerülése érdekében előnyösen úgy járunk el, hogy a védett polipeptid szintézisét a lépcsőzetes módszerrel az amino&avaknak a C-terminálisból kiindulva egymás után történő megkötésével, vagy Pro pozíciójú vagy bármely más tetszőleges pozíciójú fragmens konedenzációval végezzük. Az (I) általános képletű hexapeptidek akár szilárd fázisú, akár folyadékfázisú módszerrel előállíthatók az A reakcióvázlatban ábrázolt reakciósorozat többszöri megismétlésével, amelynek során védett polipeptidet kapunk, a védőcsoportokat lehasítjuk és a kapott pepiidet tisztítjuk, a képletekben X1 és X2 jelentése hidrogénatom vagy alkilcsoport, Y1 és Y2 jelentése függő funkciós csoport, R’ és R” jelentése védőcsoport vagy peptid maradék. A peptid szintézist a folyadékfázisú módszer alapján ismertetjük. (1) A peptidlánc kialakítása A peptidlánc kialakítása megvalósítható bármely ismert kondenzációs módszerrel. Általában úgy járunk el, hogy a (II) általános képlet savkomponens karbonilcsoportját a szokásos módon, így az azid-módszerrel, a diciklohexil-karbodiimid (DCC) módszerrel, vegyes anhidrid módszerrel vagy aktív észter módszerrel aktiváljuk, és az aktivált savkomponenst a (III) általános képletű amin-komponenssel reagáltatjuk. A reakciókörülmények (így oldószer vagy hőmérséklet) a karboxilcsoport aktiválására alkalmazott módszertől függnek. A kondenzáláshoz legelőnyösebben alkalmazható vegyes anhidrid-módszert ismertetjük közelebbről. Ennek során a (II) általános képletű savkomponcnst először aprotikus oldószerben, így dimetil-formamidban, tetrahidrofuránban vagy etil-acetátban oldjuk, majd mintegy - 20 °C hőmérsékletre hűtjük. Ekvimoláris mennyiségben N-metil-morfolint és klór-hangyasav-etilésztert adunk hozzá. 5 perc elteltével ekvimoláris mennyiségben hozzáadjuk a (III) általános képletű amin-komponenst. A kapott reakcióelegyet 2 — 5 órán keresztül —15 és 0 °C közötti hőmérsékleten keverjük, majd a szokásos módon kezelve (IV) általános képletű védett peptidet kapunk. (2) Az alfa-amino-védőcsoport eltávolítása A védőcsoport eltávolítása bármely szokásos módon megvalósítható. Előnyösen alkalmazható a katalitikus redukció, a savas lehasítás, a lúgos lehasítás vagy a hidrazinos lehasítás. A megfelelő módszert az adott alfa-amino-védőcsoporttól függően választjuk ki. A lehasításra példaként említhető a benzil-oxi-karbonii-csoport katalitikus redukciója és a terc-butoxi-karbonil-csoport trifluor-ecetsavas eltávolítása. Ez utóbbi módszert részletesen ismertetjük. 1 g R” helyén Boc csoportot tartalmazó (IV) általános képletű alfa-N-butoxi-karbonil-pcptidhez 0,5 ml anizolt és 5 ml trifluor-ecetsavat adunk jeges hűtés közben, a reakcióelegyet 60 percen keresztül keverjük, majd éterrel kezelve az (V) általános képletű peptid difluor-ecetsavas sóját kapjuk. A sót megfelelő oldószerben oldjuk, aminnal, így trietil-aminnal semlegesítjük és a következő lépéshez felhasználjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
