199877. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ANF-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199877 B 2 képletű vegyületekről ugyancsak úgy vélik, hogy az ANF-specifikus receptorokhoz kötődnek. Az (1) általános képletű vegyület in vitro kötési affinitását az ANF-aktív kötési helyekhez egy adott szövetben standard receptor kötési gyakorlatot és eljárást alkalmazva lehet meghatározni a szakirodalomban ismert eljárások alkalmazásával. Például alkalmazható a Napier és munkatársai (Proc. Nat. Sei. Acad. Sei., USA, 81; 5496 — 50, 1984), és a Buck és munkatársai (Science, 226; 987 — 89, 1984) közleményében leírt eljárás. Például homogenizált szövet preparátumot különféle koncentrációjú (1) általános képletű vegyület és annyi jóddal (12^I) jelzett rANF5.28 jelenlétében inkubáljuk, amennyi rANF5_28 körülbelül egyező a nagy affinitású specifikus ANF kötőhelyek disszociációs konstansával (KD). Különféle koncentrációk mellett mérhető, hogy az (1) általános képletű vegyület milyen mennyiségű 125I- rANF5_28 vegyületet szorít ki az ANF-specifikus kötéshelyekről. Ezt az egyensúlyi helyzetben a szövethez megkötötten maradó 12^I mennyiség mérésével végezhetjük. Ezeknek az adatoknak alapján kiszámítható a Ki érték az (1) vegyületre az adott vizsgált szövetre vonatkozóan. Általában a Ki fordítottan arányos a vizsgált vegyület kötési helyhez való affinitásával. Azok az (1) általános képeltű vegyületek, amelyek kisebb, mint 500 nM Ki értékkel rendelkeznek, bármely ANF-specifikus receptorra vonatkoztatva általában előnyösnek tekintendők. Azok az (1) általános képletű vegyületek, amelyek bármely ANF- specifikus receptor esetén kisebb, mint körülbelül 50 nM Kj értékkel rendelkeznek, a találmány szerint különösen előnyös vegyületek. Természetesen ebben beleértett, hogy a receptor megkötődési tesztvizsgálat eredménye számos tényező, mint például a tesztvizsgálati rendszer hőmérséklete, az alkalmazott pH, a vizsgált vegyület vizsgálati rendszerben való oldhatósága, az inkubálási idő, az alkalmazott 125I-ANF koncentráció, az alkalmazott természetes ANF peptid minősége, a tesztvizsgálat típusa, a szövetforrás és hasonló tényezők függvénye. Általában előnyösen a szakirodalomban leírt standard gyakorlatot és eljárást alkalmazó tesztvizsgálatokat alkalmazunk. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (1) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben Részletesebben a találmány tárgya eljárás olyan (I) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben Rl jelentése H-Ser-Ser-NH-csoport, Xi és X3 jelentése metiléncsoport, Ag jelentése Phe, A9 jelentése Gly, A10 jelentése Gly, Au jelentése Arg, Aj2 jelentése Ile, Aí3 jelentése Asp, Aj4 jelentése Arg, A13 jelentése Ile, Árjelentése Gly, Ai7 jelentése Alá, Aig jelentése Gin, Árjelentése Ser, Árjelentése Gly, A2i jelentése Leu, A22 jelentése Gly, A^ jelentése Asn, Aa jelentése Ser, A2£ jelentése Phe, Árjelentése Arg, A2g jelentése Tyr, Y jelentése -NH2, ahol az -Ag-A9-Ai0-, -A^*Ai6‘Air» Ai6*AirAi8-> -AtrAi8‘Ai9-. -A2<r -A2rA22- vagy az -A24-A25-A26-csoport közül valamelyik, vagy az -A8-A9-A10-, -A17-A18-Aig-, "A20‘A21"A22*> -A24-A25-A26-csoP°rtok egy két* vegyértékű (41) általános képletű csoporttal vannak helyettesítve, ahol Z jelentése 5-9 szénatomszámú alkilén-csoport; azzal jellemezve, hogy 1) a megfelelő védett aminosavat hordozó gyantához kapcsoljuk; 2) ezt követően a többi, védett aminosavat kapcsoljuk a növekvő peptid lánc amino-végcsoportjához, miközben az alfa-aminocsoport védőcsoportját eltávolítjuk; 3) majd a pepiidről a hordozó-gyantát és az oldallánc védőcsoportokat lehasítjuk, majd 4) a lineáris pepiidet oxidativ kapcsolásnak vetjük alá. (Elsőbbsége: 1987. 05.21.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (1) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben A8-A22, A27, A28, Rj, Y, Xj és X3 jelentése az 1. igénypontban megadott, az A24*A25'A26_csoPort a kétvegyértékű amino-oktánsav gyökkel van helyettesítve, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk. (Elsőbbsége: 1987. 05. 21.) 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (1) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben Au -A28, Rj, Y, X! és X3 jelentése az 1. igénypontban megadott, az Ag-Á9- -Ajo-csoport a kétvegyértékű amino-oktánsav gyökkel van helyettesítve, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk. (Elsőbbsége: 1987.05. 21.) 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (1) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben Ag-Ajg, A20—A28> Rt. Y, Xj és X3 jelentése az 1. igénypontban megadott, az AirAi8'Ai9'csoPort a kétvegyértékű amino-oktánsav gyökkel van helyettesítve, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk. (Elsőbbsége: 1987.05.21.) 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (1) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben Ag-Ai9, A24 —A28> Rl* Y, Xj és X3 jelentése az 1. igénypontban megadott, az A20'A2rA22*csoPort 8 kétvegyértékű amino-oktánsav gyökkel van helyettesítve, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk. (Elsőbbsége: 1987.05.21.) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
