199876. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-metil-4,5-dihidro-orotil-hisztidil-prolin-amid és ezt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199876 B 2 A találmány szerinti eljárást az alábbi példákon szemléltetjük. A példák kizárólag szemléltető jellegűek, és a találmány oltalmi körét nem korlátozzák. 1. példa 1,03 g l-metil-L-4,5-dihidroorotsavat és 760 mg N-hidroxi-szukcinimidet 20 ml dimetil-formamidban oldunk, és 0 °C hőmérsékleten 1,4 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. A reakciókeveréket ugyanezen a hőmérsékleten keverjük 1,5 órán keresztül. 2,8 g L-hisztidil-L-prolinamid-dihidrobromidot és 2 ml trietil-amint adunk hűtés közben a keverékhez és 0—15 °C hőmérsékleten kevertetjük 2 napon keresztül. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson betöményítjük a dimetilformamid eltávolítása céljából. A bepárlási maradékot hígított sósavban oldjuk, és az oldhatatlan anyagot kiszűrjük. A szűrletet kloroformmal mossuk, nátrium-hidrogén-karbonáttal meglúgosítjuk, és sztirol-divinilbenzol kopolimer gyantával töltött oszlopon engedjük át (a "MIC GÉL CHP-20P" röviden "CHP-20P gyanta" a Mitsubishi Chemical Industries Ltd. gyártmánya). Miután az oszlopot 300 ml vízzel mossuk, a kívánt termék a vízzel eluálódik. A Pauly-reakcióra pozitív frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk. A kapott terméket vízzel kristályosítjuk és vízből átkristályosítjuk. A kristályos anyagot csökkentett nyomáson, 60 °C hőmérsékelten szárítjuk 3 napon keresztül. 1 g (l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinamid-víz(l/2)-et kapunk. Op.: 158-160 °C (bomlik). [a]25D= —16,4 (c = 1,H20). 2. példa (1) 1,56 g l-metiI-L-4,5-dihidroorotsavat és 1,15 g N-hidroxi-szukcinimidet 30 ml dimetil-formamidban oldunk, és 0 °C hőmérsékleten 2,06 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. A reakciókeveréket szobahőmérsékleten keverjük 2 órán keresztül. Az így kapott oldatot az alábbiakban "A" oldatnak nevezzük. 3,43 g benzil-L-hisztidil-L-prolinát-dihidrokarbonátot oldunk dimetil-formamidban és 1,67 g trietil-amint adunk hozzá. A reakciókeveréket 20 percen át kevertetjük 0 °C hőmérsékleten, és a nem oldódó anyagot kiszűrjük. A szűrletet az "A" oldathoz adjuk, és a reakciókeveréket 4 órán keresztül keverjük 0 °C hőmérsékleten, majd egy napon át 10 °C hőmérsékleten. A nem oldódó anyagot kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson, 40 °C hőmérsékleten bepároljuk a dimetil-formamid eltávolítása céljából. A bepárlási maradékot vízben oldjuk, és a nem oldódó anyagot kiszűrjük. A szűrlet kémhatását nátrium-hidrogén-karbonáttal pH = 8 értékre állítjuk, majd CHP-20P gyantaoszlopon engedjük át. Az oszlopot egymást követően 500 ml vízzel, 500 ml 20%-os metanollal és 300 ml 50%-os metanollal mossuk. A kívánt terméket 70%-os metanollal eluáljuk. A Pauly-reakcióra pozitív frakciókat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepárolva, 3,65 g benzil-(l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinátot nyerünk olajos termék alakjában. IR „kloroformmax (cm4): 3300,1725,1680. A fenti termékből 650 mg-ot 1 n sósavban oldunk, majd az oldatot fagyasztva szárítjuk, 690 mg benzil-(l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinxHClxH20 vegyületet nyerve por alakjában. M22n=-39,8°(= 0,5, HzO). IR t/kToroforramax (cm4): 1720,1640-1680. JH-NMR (DMSO-d6, 5): 1,7-2,4 m, 4H), 2,90 (s, 3H), 2,4-3,9 (m, 6H), 3,9-4,2 (m, 1H), 4,3-4,5 (m, 1H), 4,6-5,0 (m, 1H), 5,09 (s, 2H), 7,2-7,5 (m, 5H), 8,96 (s, 1H). Tömegspektrum (m/e): 496 (M + ). (2) 700 mg benzil-(l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinátot 20 ml metanolban oldunk és 20 mg palládiumkormot adunk hozzá. A keveréket szobahőmérsékleten keverjük hidrogéngáz alatt 3 órán keresztül. 20 ml vizet adunk a reakciókeverékhez, és a katalizátort kiszűrjük. A szűrletből elpároljuk az oldószert, és a bepárlási maradékot metanolból kikristályosítva 290 mg (l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolin-víz(5/4)-et kapunk. Op.: 233 — 236 °C (bomlik). H2°d = —17,2° (c = 0,5; H20). IR *nuJolmax (cm4): 1715,1680,1630. NMR (D20, 6): 1,7-:2,4 (m, 4H), 2,6-3,9 (m, 6H), 3,03 (s, 3H), 4,0-4,45 (m, 2H), 4,95 (t, 1H), 7,27 (s, 1H), 8,57 (s, 1H). (3) 4,29 g (l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinból, 1,15 g N-hidroxi-szukcinimidből, 2,26 g ciklohexil-karbodiimidből és 30 ml dimetil-formamidból készült reakciókeveréket 40 percen keresztül 0 °C hőmérsékleten, 80 percen át szobahőmérsékleten keverünk. 0 °C hőmérsékleten 30 ml 15% ammóniát tartalmazó metanolt adunk a reakciókeverékhez, és 30 percen át 0 °C hőmérsékleten, egy órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A nem oldódó anyagot kiszűrjük, a szűrletből bepárlással eltávolítjuk a dimetil-formamidot. A bepárlási maradékot 20 ml vízben oldjuk, és a nem oldódó anyagot ismét kiszűrjük. A szűrlet kémhatását nátrium-hidrogén-karbonáttal pH= 8 értékre állítjuk be, és CHP-20P gyantával töltött oszlopon engedjük át. Miután az oszlopot' 2 liter vízzel mostuk, a kívánt terméket 10%-os metanollal eluáljuk. A Pauly-reakció szerint pozitív frakciókat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A bepárlási maradékot 10 ml vízben oldjuk, és az oldatot hagyjuk hűtőszekrényben állni. A kristályos anyagot szűréssel összegyűjtjük, vízzel mossuk és egy napig 25 °C hőmérsékleten szárítjuk, 3,3 g (l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolin-amid-víz(7/2)-et kapunk. Op.: 72- — 75 °C 1; h2o). IR vru)°‘ (cm4): 3400, 3250, 1710, 1660, 1610,1540. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
