199873. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vankomicin típusú antibiotikumok kinyerésére
1 HU 199873 B 2 2. példa 1 liter regenerált Dow XFS-43278.00 gyantát adunk a 45,4 g vankomicin aktivitással rendelkező teljçs fermentléhez. Miután hat órán át kevertük szobahőmérsékleten, a gyantát egy 100 mesh-számú szitán elválasztjuk! a fermentlétől. Meggyőződtünk, hogy a fermentlé már nem tartalmaz jelentős mennyiségű antibiotikumot, és az üres fermentlevet eldobjuk. Az antibiotikumot hordozó gyantát tisztított vízzel mossuk, és adagonként eluáljuk oly módon, hogy a gyantazagy kémhatását nátrium-hidroxid-oldattal pH = 10,5 értékre állítjuk be, és két órán keresztül keverjük, mialatt a kémhatást az adott pH-értéken tartjuk. Az eluált gyantát vákuumszűréssel elválasztjuk, és tisztított vízzel mossuk. Az eluátumot és a mosóvizeket egyesítjük, a kémhatást sósavval pH = 3,1 értékre állítjuk be, hogy az oldat stabilitását biztosítsuk. A vizsgálatok szerint 37,1 g vankomicinnek megfelelő aktivitást nyerünk ki. Az eluált gyanta regenerálásához a gyantazagy kémhatását sósavval pH = 2,0 értékre állítjuk be, és 20 percen át kevertetjük. Tisztított vízzel kimossuk a savat, újabb 20 percen keresztül nátrium-klorid-oldatban kevertetve a gyantát, visszaállítjuk Na + formává. Tisztított vízben áztatva a gyanta mellől eltávolítjuk a felesleges sóoldatot. Ezzel szemben, azonos mennyiségű teljes fermentléből az eddig ismert, kémhatás beállítást és szűrést alkalmazó legjobb eljárással csak 23,2 g vankomicinnek megfelelő aktivitást találtunk a gyanta eluátumában. 3. példa Az M43A antibiotikumot a 4.548.925. számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás 2. példája szerint nyerjük ki, azzal a különbséggel, hogy a (B) szakaszból elhagyjuk a teljes fermentlé szűrését és a szűrlet kationcserélővei való kezelését. Ehelyett a teljes fermentléhez regenerált Dow XSF-43278.00 gyantát adunk, a keveréket 6 órán át szobahőmérsékleten keverjük, és szitán a gyantát a fermentlétől elválasztjuk. Az antibiotikumot a 2. példában leírtak szerint eluáljuk a gyantáról. Az M43A antibiotikum tisztítását a 4.548.925. sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás 2. példájának (C) szakasza szerint végezzük. 4. példa Az aktaplanint a 4.322.406. sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás 1. példája szerint állítjuk elő, azzal a különbséggel, hogy a (C) szakaszból elhagyjuk a következő elválasztási lépéseket: 1) szűrési adalékanyag hozzáadása; 2) a teljes fermentlé leszűrése; 3) a kiszűrt anyag vízben történő szuszpendálása; 4) a vizes szuszpenzió kémhatásának pH » 10,5 értékre történő beállítása; 5) szűrés. Ehelyett Diaion SK-102 gyantát adunk a teljes fermentléhez és a 2. példában leírtak szerint kinyerjük az aktaplanin komplexet. Az aktaplanin Bj, B2, Bj, C1#, C3 és E] faktorait az említett szabadalom 1. példájának (D) és (F) szakasza szerint választjuk el. 5. példa Teikoplanint a 4.239.751. sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint állítunk elő, azzal a különbséggel, hogy elhagyjuk a következő lépéseket: a fermentlé szűrése; a szűrlet kémhatásának beállítása; az oldat extrahálása butanollal; a kiszűrt micélium mosása pH = 3,5 kémhatású savas vízzel; csökkentett nyomáson való szárítása; vizes acetonnal történő extrahálása; az acetonos extraktum betöményítése; kémhatásának beállítása; butanolos extrahálás. Ehelyett a 2. példában leírtak szerint nyerjük ki a teikoplanin komplexet. 6. példa Az 1. példában leírt módon előállított A82846 antibiotikumot a leírtaktól eltérően a 2. példában leírtak szerint nyerjük ki, elhagyva az A82846 komplex izolálásából az alábbi lépéseket: kémhatás beállítása; szűrési segédanyag hozzáadása; szűrőprésen való szűrés; a kiszűrt anyag vízzel történő mosása; az egyesített szűrlet és mosóié kémhatásának beállítása. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás vankomicin típusú antibiotikumok kinyerésére fermentlevekből, azzal jellemezve, hogy az antibiotikumot tartalmazó teljes fermentlevet 2% vagy annál kisebb mértékben térhálósított mikroporózus szulfonált polisztiroldivinil-benzol-gyantával hozzuk össze; a gyantát elválasztjuk! a közegtől; az antibiotikumot leoldjuk a gyantáról. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a gyantát úgy hozzulk össze a fermentlével, hogy a fermentlevet a gyantára folyatva adszorbeáltatunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a fermentléhez szakaszosan adjuk hozzá a gyantát. 4. Az 1 — 3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy eluensként pH * 9-12 kémhatású vizes oldatot használunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
