199870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusellenes hatású purin-arabinozid származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199870 B 7 egység purin-foszforilázt és 75600 egység purin* nuklcozid-foszforilázt adunk az elegyhez. Hét nappal később a reakcióelegyet szűrjük és a szűrlelet Dowex-l-hidroxid gyantát tartalmazó oszlopon kromatografáljuk (2,5x8 cm-es oszlop). Az oszlopot 90 térfogat%-os vizes metanollal eluáljuk, a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban bepároljuk. A maradékot 30 térfogat%-os vizes normál propanolban oldjuk és BioRad P —2 oszlopon (5x90 cm-es) kromatografáljuk. A terméket 30 térfogat%-os vizes n-propanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban lepároljuk, llymódon 0,363 g 6- -étoxi-purin-9-/?-D-arabino-furanozidot kapunk, amely az elemzés szerint 0,3 hidrátot tartalmaz. Elemanalízis a C^H^HjOsO x 3H2O összegképletre: számított: C: 47,78, H: 5,55, N: 18,57%, talált: C: 47,99, H: 5,54, N: 18,40%. 2, példa 9-/t-D-Arabino-furanozil-6-jód-9H-purin előállítása 1 g (4 mmól) 6-jód-purint (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA terméke) 15 ml 1,2-dimetoxi-etánban melegítés közben oldunk. 50 ml 10,1 mmólos uracil-arabinozid oldatot adunk az elegyhez 0,04% kálium-azidot tartalmazó H) mmólos kálium-foszfátban 7,4 pH-nál. Tisztított uridin-foszforilázt (6800 nemzetközi egységet) és purin-nukleozid-foszforilázt (12000 nemzetközi egységet) adunk az elegyhez és 30 °C-on kevertetjük. 21 nap elteltével újabb 4800 egység uridin-foszforilázt és 20000 egység purin-nukleozid-foszforilázt adunk hozzá. 90 nappal később a reakcióelegyet szűrjük és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 100 ml vízben oldjuk, gőzzel melegítjük, majd szűrjük. A szűrlelet XAD — 2 gyantát tartalmazó oszlopon kromatografáljuk (5x35 cm-es oszlop). Ezt az oszlopot 2 liter vízzel, majd 2 liter etanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 30 térfoga)%-os vizes n-propanolban oldjuk és BioRad P-2-t tartalmazó oszlopon kromatografáljuk (5x90 cm-es) kromatografáljuk. A terméket 30 térfogat%-os vizes n-propanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 30 térfogat%-os vizes n-propanolban oldjuk és Spehadex G — 10-es oszlopon kromatografáljuk (5x90 cm-es). Ezt az oszlopot azután 30 térfogat%-os vizes n-propanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószer vákuumban történő lepárlása után 0,253 g 6-jód-purin-9-/?-D-arabino-furanozidot kapunk, amely az elemzés szerint 5 vízmolekulát köt meg. Elemanalízis a C10HHIN4O4 x 5H2O összegképletre: számított: C: 29,65, H: 3,48, N: 13,83, j. 32% talált:. C: 39,4*3, H: 3,53, N: 13,66, I: 31,20%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. Op.: 174 °C. 3. példa 9-/?-D-Arabino-furanozil-2-amino-6-i6d-9H-purin előállítása 6,75 g (25,5 mmól) 2-amino-6-jód-purint (Sigma Chemicals St. Louis, MO, USA terméke) és 15,1 g (61,9 mmól) uracil-arabinozidot összekeverünk 0,31 liter 0,02% kálium-azidot tartalmazó 10 mmólos kálium-foszfáttal pH = 6,9 értéknél. Tisztított purin-nukleozid-foszforillázt (17000 egységet) és uridin-foszforillázt (2000 egységet) adunk az oldathoz és 37 °C-on kevertetjük. 18 nap elteltével további 5700 egység uridin-foszforillázt adunk a reakcióelegyhez. 57 nappal később a reakcióelegyet szűrjük és a szűrletet XAD —2 gyantát tartalmazó oszlopon kromatografáljuk (8x11 cm-es). A terméket különböző összetételű vizes etanollal eluáljuk a következők szerint: 0,35 liter 10 térfogat%-ossal, 1 liter 20 térfogat%-ossal, 1 liter 50 térfogat%-ossal, végül 0,2 liter 95 térfogat%-ossal. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az etanolt vákuumban lepároljuk. A maradékot 30 térfogat%-os vizes n-propanolban oldjuk és BioRad P - 2 gyantát tartalmazó 7,5x90 cm-es oszlopon kromatografáljuk. A folyamat végén 1,1 g 2-amino-6-jód-purin-9-/?-D-arabino-furanozidot kapunk 0,5 hidrát formájában. Elemanalízis a C1oH12N504I x 5H2O összegképletre: számítolt: C: 29,87, H: 3,26, N: 17,41%, talált: C: 29,86, H: 3,29, N: 17,39%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. Op.: 175 °C. 4. példa 9-/3-D-Arabino-furanozil-2-klór-6-metil-amino-9H-purin előállítása 5,29 g (10 mmól) 2,6-diklór-2’,3’,5’-tri-0-benzil-9-(/J-D-arabino-furanozil)-purin (F. Keller és munkatársai: J. Org. Chem. 32, 1644 /1967/; J. A. Montgomery és K. J. Hewson: J. Med. Chem. 12, 498 /1967/) 35 ml benzollal készített oldatát (a benzol 10 ml-enként 0,6 g metil-amint is tartalmaz) szobahőmérsékleten lezárt reaktorban 4 napig állni hagyjuk. A reaktort gondosan jéggel lehűtjük, nyitjuk és a tartalmát szűrjük, hogy a metil-amin-hidrokloridot eltávolítsuk. Az oldószert ezután vákuumban lepároljuk, olajos maradékot kapunk, amelyet azonos léptékű, de 125 °C-on végzett hasonló reakcióból kapott olajjal egyesítünk. Az összes tömeg 11,4 g. A vékonyrétegkromatográfia szerint az anyag a kiindulási anyag, mono- és dimetil-amino-vegyületek keveréke. Az olajat 285 g szilikagélen kromatografáljuk, 30 térfogat% acetont és 70 térfogat% ciklohexánt alkalmazunk. A kiindulási anyag alatt futó komponenst összegyűjtjük (vékonyrétegkromatográfia, szilikagél, aceton/ciklohexán 3:7 arányú keveréke) és az oldószert vákuumban lepároljuk. 4,8 g 2-klór-6-metil-amino-2\3\5’-trí-0- -benzil-9-(/?-D-arabino-furanozil)-purint kapunk, amely olaj. Ebből az olajból 1,1 g-ot 40 ml 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
