199860. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliozid-származékok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199860 B 2 36. példa A Gmi gangliozid peracilezett származéka 5 g (3,19 mM) Gmi gangliozid-nátriumsót 50 ml vízmentes piridinben oldunk, és 25 ml frissen desztillált ecetsavanhidridet adunk az oldathoz 25 'C-on. A reakcióelegyet 72 órán át keverjük szobahőmérsékleten. A reakció végén az oldatot vákuumban szárazra pároljuk, a maradékot pedig megoszlásnak vetjük alá 100 ml jéghideg víz és 200 ml etilacetát között. Az etilacetátot hideg 1,0 M sósav-oldattal, vízzel és 1,0 M nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk. A szerves oldatot nátriumszulfáton szárítjuk, vákuumban bepároljuk, a maradékot preparatív oszlopkromatográfiával tisztítjuk szilikagélen, eluálószerként diklórmetán, etilacetát és izopropanol 70:30:7 arányú elegyét használva. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat elegyítjük, szárazra pároljuk, a maradékot 20 ml etilacetátban oldjuk, és a terméket 100 ml n-hexánnal kicsapjuk. A kromatográfiás vizsgálatot szilikagél lemezeken végezve, oldószerként diklórmetán, etilacetát és metanol 70:30:10 arányú elegyét illetve etilacetát és izopropanol 95:5 arányú elegyét használva, a kimutatáshoz pedig Ehrlich-reagenst alkalmazva, a termék egységesnek bizonyul, az Rf-értéke 0,47 illetve 0,28. 37. példa Gangliozidkeverék peracilezett származéka A 2. példában leírt gangliozidkeverék nátriumsó alakjának 5 g mennyiségét 25 ml vízmentes piridinben oldjuk, és az oldathoz 25 ml ecetsavanhidridet adunk. A reakcióelegyet 72 órán át keverjük szobahőmérsékleten, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot megoszlásnak vetjük alá 100 ml jéghideg víz és 200 ml etilacetát között. Az etilacetátos oldatot hideg 1 N sósavval, vízzel és 1 M nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk. A szerves oldatot vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, vákuumban bepároljuk, a maradékot 20 ml etilacetátban felvesszük, és a terméket 100 ml n-hexánnal kicsapjuk. Ilyen módon 4,4 g cím szerinti terméket kapunk. A 40. példában ismertetett módon kivitelezett kromatográfiás vizsgálatonál a termék Rf-értéke 0,01- 0,46 illetve 0,01-0,35. 38 * * * * * 38. példa A Gmi gangliozid metilészterének peracetilezett származéka 5 g (3,17 mM) Gmi gangliozid-metilésztert 50 ml vízmentes piridinben oldunk, majd az oldathoz 25 "C-on hozzáadunk 25 ml frissen desztillált ecetsavanhidridet. A reakcióelegyet 72 órán át keverjük szobahőméréskleten. Ezután az oldatot vákuumban bepároljuk, a maradékot pedig megoszlásnak vetjük alá 100 ml jéghideg víz és 200 ml etilacetát között. Az etilacetátot hideg 1,0 M sósavval, vízzel és 1 M nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk. A szerves oldatot vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, vákuumban bepároljuk, és a maradékot preparatív kromatográfiával tisztítjuk szilikagél oszlopon, oldószerként diklórmetán, etilacetát és izopropanol 70:30:45 arányú elegyét használva. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat elegyítjük, bepároljuk, a maradékot 20 ml dietiléterben oldjuk, és a terméket 100 ml n- hexánnal kicsapjuk. Ilyen módon 4,5 g cím szerinti peracetilezett származékot kapunk. A kromatográfiás vizsgálatot szilikagél lemezeken végezve, oldószerként diklórmetán, etilacetát és metanol 70:30:10 arányú elegyét illetve etilacetát és izopropanol 95:5 arányú elegyét elegyét használva, s a kimutatásokhoz Ehrlich-reagenst alkalmazva, a termék egységesnek bizonyul, az Rf-értéke 0,47 illetve 0,28. 39. példa Gangliozidkeverék metilészterinek peracetilezett származéka A 2. példában leírt gangliozidkeverék metilészterei keverékének 5 g mennyiségét (lásd a 3. példát is) acetilezzük a 36. példában ismertetett módon. A termék tisztítását is a 36. példában leírtak szerint végezve, 5,4 g terméket kapunk, amely a 3. példa szerinti metilészterkeverék peracetilezett származéka. A kromatográfiás vizsgálatot a 38. példában megadott módon végezve, a termék Rf-értéke 0,23-0,54 illetve 0,01-0,52. 40. példa A Gmi gangliozid amidjának peracetilezett származéka 5 g (3,20 mM) Gmi gangliozid-amidot 50 ml vízmentes piridinben oldunk, és a 38. példában ismertetett módon acetilezzük. A tisztítást a 37. példában leírtak szerint végezzük, azonban a kromatografáláshoz oldószerként diklórmetán és izopropanol 95:5 arányú elegyét használjuk. 4,4 g tiszta, cím szerinti származékot kapunk. A 39. példa szerinti kromatográfiás vizsgálat során a termék egységesnek bizonyul, az Rf-értéke 0,43 illetve 0,48. 41. példa Gangliozidkeverék amidkeverékének peracetilezett származéka A 15. példában leírt gangliozid-amid-keverék 5 g mennyiségét 50 ml vízmentes piridinben oldjuk, és 25 ml ecetsavanhidriddel acetilezzük a 44. példában ismertetett módon. A tisztítást hasonló módon végezzük, mint a 38. példában. Ilyen módon 4,9 g cím szerinti peracetilezett száramzékot kapunk. A kromatográfiás vizsgálatot a 40. példában leírt módon végezve, a termék Rf-értéke 0,11-0,45 illetve 0,01-0,50. 42. példa A Gmi gangliozid fenil-etil-észtere A Gmi gangliozid fenil-éter-észterét hasonló módon állítjuk elő és különítjük el, mint a metilésztert az 1. példában, azonban a metilakohol és a nátriummetilát helyett fenil-etil-alkoholt és nátrium-feniletilátot használunk, a hevítést vízfürdőn végezzük, s a belső észter és az alkoholét között ugyanolyan mólarányt alkalmazunk, mint az 1. példában. A Dowex gyantát fenil-etil- alkohollal mossuk, s a szúrletet bepárlás utáni maradékot diklórmetán és fenil-etil-alkohol 1:1 arányú elegyének 50 ml mennyiségében oldjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15
