199809. lajstromszámú szabadalom • Eljárás amino-metil-4,5-dihidroizoxazol-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199809 B 2 szerének megfelelőén kb. 4-6 ekvivalens ezüst- nitrátot adunk kis részletekben az alkén-szubsztráthoz és a diklór-formaldoxim-reagenshez. A kiindulási alkén teljes átalakulása után metilén-kloridot adunk az elegyhez, majd celiten szűrjük és bepároljuk. A termék elkülönítése és tisztítása a fentiek szerint történik. A találmány szerinti (IX) általános képletű vegyületek transzglutamináz-gátló hatásúak. Az egyes vegyületek ilyen hatását in vitro kísérletekben, marhaepidermális- transzglutamináz, illetőleg tengerimalacmáj-transzglutamináz alkalmazásával vizsgáltuk; az inhibitor-hatáserősséget a K másodrendű sebesség-állandó és az inhibitor-koncentráció viszonya alapján, mól/liter/perc egységekben határoztuk meg (nagyobb számérték erősebb hatást mutat). BET- LTG-gátlás -gátlás 5-[N-(benzil-oxi-karbonil)-aminometil]-3-klór-4,5-dihidroizoxazol 736±42 5-[N-(benzil-oxi-karbonil)-aminometiI]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol 1720±54 13801214 5-[N-(terc-butoxi-karbonil)-aminometil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol 5-aminometil-3-bróm4,5-dihidro-izoxazol 234+26 173110 BET : marha-epidermális-transzglutamináz LTG: tengerimalac-máj-transzglutamináz A találmány szerinti eljárás előnyös kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik. 1. példa N-(terc-Butoxi-karbonil)-allil-amin 22 ml allil-amin 400 ml metilén-kloriddal készült oldatához szobahőmérsékleten, keverés közben, részletekben 64 g di(terc- butil)-dikarbonátot adunk. A reakcióelegyet egy éjszakán át állni hagyjuk, majd bepároljuk. Az olajos maradék állás közben megszilárdul. IR(KBr): 3340, 2962, 1690, 1509 cm * ’H NMR (80 NHz, CDC13): delta 1,45 (s, 9H, tere- butil), 3,6-3,9 (m, 2H, -CH2N-), 4,34-4,8 (széles, s, 1H, - NH-), 5,0-5,3 (m, 2H, CH2=C-), 5,6-6,1 (m, 1H, -CH=C). Az N-(benzil-oxi-karbonil)-allil-amint hasonló módon, klór- hangyasav-benzil-észterből trietil-aminból 0 *C-on állítjuk elő. 2 2. példa 5-[N-(terc-Butoxi-karbonil)-aminometil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol 20 g N-(terc-butoxi-karbonil)-allil-amin 700 ml etil-acetáttal készült és 65 g nátrium-hidrogén-karbonátot, valamint 50 ml vizet tartalmazó oldatához szobahőmérsékleten és erőteljes keverés közben 80 g dibróm-formaldoximot adunk részletekben. A reakció befejeződése után a szerves részt 2 alkalommal 100-100 ml vízzel, 100 ml 5 %-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, 100 ml telített nátrium-kloridoldattal mossuk, majd vízmentes magnézium- szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékként kapott olajat kovasavgélen kromatográfiásan tisztítjuk, így a kívánt terméket olaj formájában kapjuk, amely állás közben megszilárdul. Hozam: 77 %. IR(KBr): 3322, 2988, 1680, 1529 cm*1. >H NMR (80 MHz, CDCI3): delta 1,45 (s, 9H, tere- butil), 2,8-3,5 (m, 4H, -CH2CHO-, -CH2N), 4,6-5,1 (széles s, amely egy multipletten helyezkedik el, 2H, -NH, -CHO- ). Az N-(terc-butoxi-karbonil)-allil-amint N-(benziloxi-karbonil)- allil-aminnal helyettesítve a következő vegyületeket állítjuk elő: 5-[N-(benzil-oxi-karbonil)-aminometil]-3-klór-4.5- dihidroizoxazol, op.: 81-83 “C; 5-[N-(benzil-oxi-karbonil)-aminometil]-3-bróm-4.5- dihidroizoxazol, op.: 75-77 °C. Ezek az új vegyületek hatásos transzglutaminázgátlók. 3. példa 5-Aminometil-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol 20 g 5-[N-(terc-butoxi-karbonil)-amino-metil]-3- bróm4,5- dihidroizoxazolt 400 ml, 20 % trifluorecetsavat tartalmazó metilén-kloridban 0 'C-on feloldunk. 14 óra elteltével az elegyet bepároljuk. A kapott olajat 5 %-os nátrium-karbonát-oldatban felvesszük és a bázikus oldatot 5 alkalommal 40-40 ml metilén- kloriddal extraháljuk. A szerves extraktumokat egyesítjük, 30 ml vízzel és 30 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. így halvány sárga olajat kapunk. Hozam: 30 %. >H NMR (80 MHz, CDCI3): delta 1,2-1,4 (széles s, 2H, -NH2), 2,7-3,5 (m, 2H, -CH2CHO-), 3,1 (dd, 2H, J=8 Hz, -CH2N-), 4,65-4,9 (m, 1H, -CHO-). A borkősavas só spektruma: >H NMR (80 Hz, D20): delta 3,0-3,8 (ABX, 2H, - CH2CHO-), 3,25 (széles d, 2H, j=6,5 Hz, -CH2N), 4,5 (s, 2H, a borkősav -CH-ja), 4,8-5,2 ppm (m, 1H, -CHO-). 13C NMR(20 MHz, D20): delta 179,1 (-CO-), 143,4 (BrC=N-), 80,43 (-CHO-), 75,6 (a borkősav -CHO-ja), 47,2 (- C02-), 44,6 ppm (-CH2-). ^ Ugyanilyen módon állítjuk elő a következő aminokat: 5-aminometil-3-metoxi-4,5-dihidroizoxazol, 5-aminometil-3-(etil-tio)-4,5-dihidroizoxazol, 5-aminometil3-(etil-szulfonil)4,5-dihidroizoxazol. Az -S(0)2R csoportot tartalmazó vegyületeket 3-(alkil-tio)- 4,5-dihidroizoxazolokból meta-klór-perbenzoesavval vagy kálium- permanganáttal végzett oxidációval állíthatjuk elő; az utóbbi vegyületcsoportot a későbbiekben ismertetett cikloaddíciós reakcióval is megkaphatjuk. 4. példa Az 5-aminometil-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol rezolválása A cím szerinti vegyületet mandulasavval alkotott sója formájában rezolváljuk. így az 5-aminometil-3- bróm-4,5-dihidroizoxazolt etanolban feloldjuk és ehhez 1 ekvivalens d-mandulasav metanolos oldatát adjuk. Az etanol és víz elegyéből végzett kristályosítás első kivált terméke csak az 5-aminometil-3-bróm-4,5- dihidroizoxazol egyik izomerjének mandulasavas sóját tartalmazza. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
