199786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a magas vérnyomás kezelésére használható peptid-származékok előállítására
1 HU 199786 B 2 szer 2) lépésében leírt módon, és így 3-bróm-2-D- metil-propionsavat kapunk. A 3) lépésben a 2) lépés termékét tiobenzoesavval reagáltatjuk, és így 3-benzoil-merkapto-2-D-metil-propionsavat kapunk. E reakcióban tiobenzoesav helyett használhatunk tioecetsavat is. A 4) lépésben a 3) lépés termékét lúgos közegben, például metanol és ammónia elegyében kezelve 3- merkapto-2-D-metil-propionsavat állítunk elő. Az 5) lépésben Na-benzoil-fenil-alanint (Bz-Phe) N-hidroxi- szűkeinimiddel reagáltatunk a vegyes anhidrides módszerrel, majd a kapott terméket a fenti j) módszer 3) lépésében leírt módon, a jelen eljárásváltozat 4) lépésében kapott termékkel reagáltatjuk, és így 3-(Na-benzoil-fenil-alanil-merkapto)-2-D-metilpropionsavat kapunk. A 6) lépésben az 5) lépés termékét a vegyes anhidrides módszerrel N-hidroxi-szukcinimiddel reagáltatjuk, és a kapott terméket L-prolinnal a fenti j) módszer 5) lépése szerint reagáltatva, a kívánt végtermékhez jutunk. A 2) lépésben 3-amino-2-D-metil-propionsav helyett 3-amino- propionsavat vagy 2-amino-propionsavat használva, a megfelelő 3- merkapto-propionsavvagy 2-merkapto-propionsav-származékokhoz jutunk. Ha az 5) lépésben a Bz-Phe helyett valamely más, kívánt R-A-OH általános képletű vegyületet használunk, akkor a kívánt R- és A-csoportokat tartalmazó végtermékekhez jutunk. Amikor a 3-merkapto-2-metil-propionsav metil-oldalláncának D- konfigurációjáról beszélünk, ez egyenértékű azzal, hogy a metil- oldalláncot viselő szénatom konfigurációja S. A találmány szerinti vegyületek különféle szervetlen és szerves bázisokkal sókat képeznek; a sók előállítása szintén beletartozik a találmány oltalmi körébe. Ilyen sók például az ammóniumsók, alkálifém-sók, mint például nátrium- és kálium-sók (ezek előnyösek), alkáli-földfém-sók, mint például a kalcium- és magnézium-sók, továbbá a szerves bázisokkal képzett sók, így például a diciklohexil-aminnal, benzatinnal, N-metil-D- glukaminnal, hidrabaminnal képzett sók, valamint az aminosavakkal, például argininnel, lizinnel és más hasonlókkal képzett sók. Előnyösek a nem-toxikus, gyógyászatilag elfogadható sók, bár egyéb sókat is felhasználhatunk, például a termékek elkülönítésére és tisztítására, amint ezt a példákban a dicíklohexil-amin-sókkal szemléltetjük. A sókat önmagában ismert módon, úgy állítjuk elő, hogy a termék szabad sav formáját valamely olyan közegben, amelyben az adott só kevéssé, vagy nem oldódik, a megfelelő bázis egy vagy több egyenértéknyi mennyiségével reagáltatjuk, vagy pedig a reakciót vízben végezzük, és vizet fagyasztva szántással távolítjuk el. Ha valamely sót egy oldhatatlan savval, például valamely hidrogén-formában lévő kationcserélő gyantával (például valamely polisztirolszulfonsav-típusú gyantával, például Dowex 50-nel) reagáltatjuk, vagy valamely vizes savval, és ezután az elegyet szerves oldószerrel, például etil-acetáttal, diklór-metánnal vagy más hasonlókkal kirázzuk, akkor a termékek szabad sav formáját kaphatjuk, és ezt kívánt esetben valamely más sóvá alakíthatjuk. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban, az oltalmi kör szűkítése nélkül, példákkal szemléltetjük. Az egyszerűség kedvéért az egyes eljárásokat az N“-[3-(Na-benzoil-fenil- alanil-merkapto)-2-D-metilpropanoil]-L-prolin előállításának példáján mutatjuk be. A példákban a reagenseket egyenértéknyi mennyiségekben alkalmazzuk. A kitermelési értékek 1 és 42 % között vannak. 1. példa a) módszer 1. lépés Na-tercier-Butoxi-karbonil-L-fenil-alanin--tiofenil-észter 3,98 g Boc-L-Phe körülbelül 20 ml kétszer desztillált etanollal készült oldatához jég-szárazjég-metanol hűtőfürdőben -20 °C hőmérsékleten hozzáadunk 2,04 ml N-etil-morfolint, majd 2,04 ml klórhangyasav-izobutil-észtert, és az elegyet 3 percig -15 *C hőmérsékleten keverjük. Utána hozzáadunk 1,8 ml tiofenolt, és a reakcióelegyet további másfél órán át -15 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután az elegyet hagyjuk lassan szobahőmérsékletre melegedni, és ezen a hőmérsékleten további 2 órán át keverjük. Ezután hozzáadunk 20 ml etil-acetátot, és az elegyet jeges fürdőbe hűtve az etil-acetátos részt hideg vízzel háromszor, hideg 1 n citromsav-oldattal háromszor, ezután hideg, telített nátrium-klorid-oldattal háromszor, majd hideg 1 n nátrium- hidrogén-karbonát-oldattal szintén háromszor, és végül hideg, telített nátrium-klorid-oldattal ugyancsak háromszor kimossuk. Az etil-acetátos részt ezután vízmentes magméziumszulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk. A maradékot benzol és petroléter elegyéből kristályosítva, fehér színű, tűs kristályok formájában 3,68 g terméket kapunk, op.: 113,5-114,5 °C. A termék az infravörös, NMR-spektrum, az elemi analízis, papír elektroforézis és vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint a cím szerinti vegyület. 2. lépés Na-Benzoil-L-fenil-alanin-tiofenil-észter 1) 2,0 ml anizolhoz hozzáadunk 2 g, az 1. lépésben leírt módon kapott terméket, és az oldatot jég-aceton hűtőfürdőben hűtjük. Az Na-Boc-védőcsoport eltávolítása céljából az elegyet 4 ml vízmentes trifluorecetsavval keverjük szobahőmérsékleten, fél órán át. Ezután a trifluor-ecetsavat 30 °C hőmérsékleten, forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztílláljuk. A trifluor- ecetsavat és anizolt 30 ’C hőmérsékleten, nagymértékben csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a termék fehér színű, kristályos anyag. 2) A fenti termékhez hozzáadunk 10 ml 5,7 mólos etanolos sósav- oldatot, és az elegyet 10 percig szobahőmérsékleten keverjük. Utána hozzáadunk 15 ml vízmentes dietil-étert, és az elegyet fél órára jeges fürdőbe hűtjük. A kivált, kristályos anyagot kiszűrjük, és dietil-éterrel többször kimossuk. Ezután a terméket éjszakán át, csökkentett nyomáson, nátrium-hidroxid és foszfor- pentoxid mellett szárítjuk, ily módon fehér színű, 1,03 g kristályos anyagot kapunk, op.: 164,5- 165 ’C (bomlik). 3) 1,12 g fenti módon kapott L-fenil-alanin-tiofenil-észter- hidrokloridot 15 ml etil-acetátban szuszpendálunk, és erélyes keverés közben szobahőmérsékleten hozzáadunk 0,45 ml benzoil- kloridot. Ezután 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
