199563. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nebramicin és neomicin típusú antibiotikumok előállítására
1 HU 199563 A 2 A szűrt lé fémtartalma: 0,17 g/liter Az oldathoz 100 g trinátrium-foszfátot teszünk, így az olda pH- ját 9,0 értékre emelkedik. 80 ml 10 mólos nátrium-hidroxid oldattal a neomicin tartalmú szűrt lé pH-ját 10,35 értékre emeljük. Az oldatból jól ülepedő csapadék válik ki, melyet kiszűrünk. A kapott 10,13 liter lúgos szűrt lé hatóanyag tartalma 6600 pg/ml. A 10,88 pH értékű szűrt levet álló ágyban 2000 ml/óra sebességgel átvezetjük 1800 ml ammónium-ciklusban lévő Lewatit CNP-80 típusú gyantán. A gyanta ágyat összesen 6 liter ionmentes vízzel mossuk álló ágyban 2000 ml/óra sebességgel. Az oszlopból távozó szűrt lé és mosóvíz igen nagy mennyiségű színanyagot és minor komponenst tartalmaz. A gyantám megkötött hatóanyagot 2 %-os ammónium-hidroxid oldattal oldjuk le álló ágyban 200 ml/óra sebességgel (összesen 2500 ml szükséges). A neomicin tartalmú ammóniás eluátum térfogata 1350 ml és 38,52 g neomicin-bázist tartalmaz. Az eluátum pH-ja 11,40. Az ammónium-hidroxid tartalmú eluátum pH-ját 50 ml 5 mólos kénsavval 9,18 értékre állítjuk. Az oldatot álló ágyban 300 ml/óra sebességgel átvezetjük 1000 ml ammónium-ciklusban lévő Lewatit CNP-80 típusú gyantán. A gyantaágyat 2 liter ionmentes vízzel mossuk 300 ml/óra sebességgel 2 %-os ammónium-hidroxid oldattal eluáljuk le (összesen 2 liter szükséges). A neomicin tartalmú eluátumot (térfogata 1200 ml) vákuumban 40 'C-on bepároljuk és ammóniamentesítjük. A kapott sűrítmény 200 ml 18,8 % szárazanyag tartalmú, azaz összesen 37,60 g neomicin-bázist, valamint igen kevés színanyagot és minor komponenst tartalmaz. Az oldat jellemző paramétere: E18-8 %i cm (430 nm) - 0,980 A 200 ml-nyi sűrítmény pH-ját 18 ml 5 mólos kénsavval 6,60 értékre állítjuk (kialakítjuk a neomicin-szulfátot), majd 3 g aktív szénnel derítjük. A szénágyat 20 ml ionmentes vízzel mossuk. A szűrletet és a mosóvizet egyesítve 235 ml 24,6 % szárazanyag tartalmú oldatot kapunk, mely összesen 57,81 g neomicin-szulfátot tartalmaz. Az oldat jellemző paramétere: E24-6 *i cm (430 nm) - 0,120 A 235 ml-nyi neomicin-szulfát tartalmú oldatot ötszörös térfogatú (1175 ml) metanolba csorgatjuk. A kivált csapadékot szűrjük, kétszer 100 ml metanollal szuszpendáljuk, majd vákuumban 50 *C-on megszárítjuk. A kapott termék: 57,75 g neomicin-szulfát. A kinyert tennék minőségi jellemzői: Biológiai hatóérték szárazanyagra: 710 pg/ml Tisztasági vizsgálat: vékonyréteg kromatográfiásan vizsgálva a neamin tartalom 2 % alatt van. [cc]20D ” +58* (c - 0,5; 0,1 n kénsav) 10 10. példa Az 1. példa szerint fermentált 39 m3 nebramicin tartalmú fermentlevet (összaktivitása bioautográfiás értékméréssel 1850 E/ml) oxálsavval pH 2,0 értékre savanyítjuk, majd előréteges dobszűrőn szűrjük, közben a szűrőréteget vízzel mossuk. A szűrt lé pH-ját tömény ammónium-hidroxid oldattal (150 liter) 4,5 értékre állítjuk és az így kapott 66 m3 szűrt levet ismételt szűrés nélkül 3500 liter ammónium-ciklusban levő Lewatit CNP-80 típusú gyantára visszük álló ágyban 2500 1/óra sebességgel. A hatóanyag megkötése után az „A” és a „B” frakciót az 1. példa szerint választjuk el. A 22 m3 téérfogatú karbamoil-kanamicin és karbamoil- tobramicin tartalmú „B” frakciót vákuumban besűrítjük. A sűrítmény (299 liter) 35,6 % szárazanyagtartalmú, összesen 106,44 kg karbamoil-kanamicint, karbamoil-tobramicint, valamint sok minor komponenst és színanyagot tartalmaz. A 299 liternyi sűrítményt 75 kg nátrium-hidroxiddal 10 órán át 100 *C-on hidrolizáljuk. Hidrolízis után a hidrolizárumot 25 *C- ra hűtjük. 600 literre hígítjuk. A 13,52 pH-jú oldathoz 190 liter 5 mólos kénsavat adagolunk, s a pH-t 10,65 értékre állítjuk, majd az oldatot ionmentes vízzel 4000 literre hígítjuk. A hígított oldatot - melynek pH-ja 10,53, szárazanyagtartalma 6 % - az 1. példa szerint vezetjük át 300 Dóra sebességgel 3400 liter ammónium-ciklusba lévő Lewatit CNP-80 típusú gyantán. Ionmentes vizes mosás után összsen 8 m3 2 %-os ammónium- hidoxid oldattal oldjuk le a gyantán megkötött hatóanyagot. Az értékes hatóanyagot tartalmazó 5 m3-nyi eluátumot vákuumban pároljuk be és annóniamentesítjük. A kapott sűrítmény 217 liter 36,8 % szárazanyag tartalmú, azaz összesen 79,86 kg kanamicint, tobramicint, valamint, kevés minor komponenst és színanyagot tartalmaz. A 217 liternyi hidrolizátumot a továbbiakban az 1. példa szerint dolgozzuk fel. A kapott késztermék: 23,00 kg kanamicin-szulfát Kihozatal: 590,00 g/m3 A kinyert tennék fontosabb minőségi jelemzői: E4 %\ cm (295 nm) - 0,143 Tisztasági vizsgálat: VRK (idegen foltok együttes nagysága és intenzitása): 4 %, Rf(24 *C): 0,15 Biológiai hatóérték szárazanyagra: 628 mg/mg. A kapott másik késztermék: 19,89 kg tobramicinbézis hatóanyag. Kihozatal: 510,00 g/m3 A kinyert termék fontosabb minőségi jellemzői: E4 %\ cm (295 nm) - 0,125 Tisztasági vizsgálat: VRK (idegen foltok egyenkénti nagysága és intenzitása): 0,5 % Tisztasági vizsgálat: VRK (idegen foltok együttes nagysága és intenzitása): 1,5 % Biológiai hatóérték szárazanyagra: 985 pg/mg. [a]20D - +150* (c - 1, víz) A találmány szerinti megoldás alkalmazásával a nebramicin és neomicin típusú antibiotikumok gyártási eljárása az azonos típusú, ioncserés műveletek alkalmazása következtében egyszerűbbé és korszerűbbé válik. A technológiai sor kialakítása gazdagaságosabb, könnyebben és olcsóbban műszerezhető. A hatóanyagok nagyfokú tisztulása révén nő a rendszer kapacitása, jelentősen nő a kihozatal, felére csökken a fajlagos aktív szén felhasználás, lényegesen csökken az anyagköltség és energiafelhasználás. Az eljárás felhasználható a gyógyszertechnológiai előírásoknak megfelelő, a minőséggel szemben (for5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
