199561. lajstromszámú szabadalom • Eljárás S-657 jelű heteropoliszaharid előállítására és a heteropoliszaharidot tartalmazó kútfúró folyadék
HU 199561 B 19 20 Koncentráció a végső tápközegben (ppm) H3B03 0.05 B+3 MnCI2.4H20 0.5 Mn+2 FeS04 0.5 Fe+2 CuCl2 0,01 Cu+2 ZnCl2 0,02 Zn+2 CoCI2.6H20 0,01 Co+2 Na2Mo04.2H20 0,01 Mo+6 Nátrium-tartarát 1,8 Amint az eredmények mutatják, a legjobb növekedést a 3 tömeg% hidrolizált keményítőt és HoLe-sókat tartalmazó tápközeg esetén kapjuk. 2. példa Nagy mennyiségű S-657 heteropoliszacharid fermentációs előállítását a következőképpen végezzük. 100 ml YM tápközeget (Difco) tartalmazó 500 ml-es Erlenmeyer lombikot beoltunk egy oltókacsnyi, tápagarról vett 48 órás tenyészettel. A lombikot 24 óra hosszat 30°C-on inkubáljuk egy 400 ford/perc sebességgel mozgó rázógépen. Két 500 ml-es Erlenmeyer lombikban 1 tömeg%-os inokulumot készítünk 100 ml oltó-tápközeggel. Az oltó-tápközeg összetétele: Glükóz 3 tömeg% K2HP04 0,5 tömeg% NH4N03 0,09 tömeg% MgS04.7H20 0,01 tömeg% Promosoy 100 0,05 tömeg% HoLe-sók 1 ml/liter A tápközeget csapvízzel készítjük. HoLe-sókat úgy készítjük, hogy a következő komponenseket adjuk 1 liter ionmentes vagy desztillált vízhez: H3BO3 285 mg MnCI2.4H20 1800 mg FeS04 1360 mg CuCl2 26,9 mg ZnCl2 20,8 mg CoCl2 40,4 mg Mg2Mo04.2H20 25,2 mg Na-tartarát 1770 mg 5 A lombikokat 30°C-on 24 óra hosszat inkubáljuk egy 400 ford/perc sebességgel mozgó rázógépen, majd egy 3000 ml ugyanolyan tápközeget tartalmazó 5 1-es fermentor beoltására használjuk. A fermentálást 30°C-on 10 1 l/perc levegőztetési sebesség mellett végezzük. A keverést 400 ford-perc sebességgel kezdjük, és addig emeljük, amennyi a jó keveredést biztosítja. 24 óra múlva 2,5 liter kivett oltóanyaggal beoltunk egy, 50 liter kö- 15 vetkező tápközeget tartalmazó 70 literes fermentort: glükóz 3,0 tömeg% K2HP04 0,05 tömeg% NH4N03 0,09 tömeg% 20 MgS02.7H20 0,01 tömeg% Promosoy 100 0,05 tömeg% HoLe-sók 1 ml/1 Fe++ 1 ppm Sag 5691 0,005 tömeg% 25 (habzásgátló, Union Carbide gyártmánya) A hőmérsékletet 30°C-on tartjuk, a levegőztetést 25 óra hosszat 10 l/perc sebességgé} gél, majd 20 l/perc sebességgel végezzük a fermentáció befejeztéig. A pH-t 6,0 fölött tartjuk KOH (40 tömeg%-os) adagolásával automatikus pH-szabályozó rendszerrel. A keverést 300 ford/perc sebességgel kezdjük, 35 majd 25 óra múlva 550 ford/perc sebességre, és a fermentáció 48. órájától 70 ford/perc sebességre, a 72. órától pedig 800 ford/perc sebességre emeljük, és ezt a sebességet tartjuk a fermentáció befejeztéig. A fermentá- 40 ció eredményeit az 5. táblázatban foglaljuk össze. 5. táblásé' Idő ( óra ) pH Permentié viszkozitásé (Pa-s) Polimer kitermelés (g/100 ml) Meredek szénforrás (tömeg%) 0 7,0 0,00 5 ND 3,0 25 6,5 0,230 0,51 ND 48 6,2 0,560 0,80 1,27 72 6,3 3250 1,22 0,70 116 6,2 3550 1,64 0,24 141 7,1 4,000 1,63 0,17 Megjegyzés: ND = nincs adat 11