199559. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A 10255 antibiotikum komplex és faktorai, valamint ezeket tartalmazó készítmények előállítására
HU 199559 B A10255C faktor: Nem kristályos, fehér, sárgás-fehér por, ami dimetil-szulfoxidban, dimetil-formamidban, piridinben, metilén-klorid/metanol, 1:1 térfogatarányú elegyében és tetrahidrofurán/ /víz, 4:1 térfogatarányú elegyében oldódik. Elemanalízis-C: 49,18, H: 3,86, N: 17,89,0:18,28 és S:6,46% (átlag). A gyors atom bombázású (FAB) tömegspektrometriával meghatározott látszólagos molekulatömeg: 1174 dalton. Viszonyító anyagként cézium-jodidot használva, a pontos tömeg: 1175,35 (M+H). A 66%-os vizes dimetil-formamid oldatban végzett elektrometrikus titrálás szerint (kezdő pH= 7,29) a C faktor két titráIható, csoporttal rendelkezik, melyek pKa értéke 2,9 (bizonytalan), illetve 12,0. A 6n sósavban végzett hidrolízis után az aminosavanalízis 7,429 mmól/mg ammóniáról és 758 mmól/mg treoninról tanúskodik. A kromatogrammon egy nagy, nem azonosított csúcs jelenik meg a hisztidin csúcs előtt. Semleges, savas és lúgos metanolban felvett ultraibolya elnyelési spektrumban az Ä'/nax == 245 nm (e = 63000). Az infravörös-spektrumát (KBr) a 2. ábrán mutatjuk be. A spektrum legjellemzőbb elnyelési maximumai: 3375, 2973, 2932, 2876, 1661,1597, 1494, 1427, 1345, 1305, 1249, 1111, 1083 , 984,933 és 894 cm'1. A perdeuterált dimetil-szulfoxidban 360 MHz-en felvett proton magmágneses rezonanciaspektrum csúcsai: delta 10,51, 10,08, 9,84, 9,57, 9,10, 8,88, 8,03, 7,94, 7,53, 5,15 (az eddigiek D20-val mind cserélhetők), 8.67, 8,59, 8,51, 8,49, 8,38, 8,25, 8,24, 6,57, 6,52 6,38, 6*11, 5,91, 5,78, 5,74, 5,70, 5,65, 5,63, 5,44, 5,15, 4,79, 4,67, 4,63, 4,23. 2,21, 1,62, 1,11 és 1,01. A10255E faktor: Nem kristályos, fehér, sárgás-fehér por, ami oldható dimetil-szulfoxidban, dimetil-formamidban, piridinben, kloroform/metanol elegyében és tetrahidrofurán/víz, 4:1 térfogatarányú elegyében. Elemanalízis: C: 48,03, H: 3,91, N: 15,76, O: 17,09, S: 5,63% (átlag). A gyors atom bombázású (FAB) tömegspektrometriával meghatározott látszólagos molekulutömeg: 1258 dalton. Viszonyító anyagként cézium-jodidot használva a pontos tömege: 1259,55 (M-fH). A 66%-os vizes dimetil-formamid oldatban végzett elektrometrikus titrálás alapján az A10255E faktor három titrálható csoporttal rendelkezik, melyek pKa értékei: 4,85, 11,1, illetve 13,2. A 6n sósavas hidrolízis után végzett aminosav analízis 8,580 mmól/mg ammóniáról és 7,16 mmól/mg, treoninról tanúskodik. A kromatogrammon egy nagy, nem azonosított csúcs jelenik meg a hisztidin csúcsa előtt. 5 4 Semleges, savas és lúgos metanolban felvett ultraibolya elnyelési spektrumában Xffiax = 245 nm (e = 77000). Az infravörös elnyelési spektrumát (KBr) a 3. ábrán mutatjuk be. A spektrum legjellemzőbb elnyelési maximumai: 3367, 3361, 2966,1664, 1501, 1389,1254, 1102 és 889 cm-1. A perdeuterált dimetil-szulfoxidban 270 MHz-nél felvett proton magmágneses rezonanciaspektrumának csúcsai: delta 10,54, 10,00, 9,94, 9,81, 9,60, 9,56, 9,45, 8,89, 8,84, 8,66, 8,59, 8,50, 8,47, 8,39, 8,25, 8,22, 8,10, 6,53, 6,50, 6,24, 5,95, 5,86, 5,84 , 5,77, 5,64, 5.55, 5,52, 5,44, 5,10, 4,80, 4,66, 4,64, 4,22, 2,78, 1,60, 1,11 és 1,00. A10255F faktor: Nem kristályos, fehér, sárgás-fehér por, ami dimetil-szulfoxidban, dimetil-formaraidban, piridinben, metilén-klorid/metanol, 1:1 térfogatarányú elegyében, tetrahidrofurán/ /víz, 4:1 térfogatarányú elegyében oldódik. p lAtTlíinS 117 ic • C: 49,65, H: 4,23, N: 17,11,0: 22,08, S: 7,78% (átlag). A térdeszorpciós (FD) tömegspektrometriával meghatározott látszólagos molekulatömeg: 1188 dalton. 66%-os vizes dimetil-formamid oldatban végzett elektrometriásan titrálás szerint (kezdő pH = 7,08) az A10255F faktor egy titrálható csoporttal rendelkezik pKa = 12,5 értékkel. A 6n sósavas hidrolízis után végzett aminosavanalízis 7,226 mmól/mg ammóniáról és 735 mmól/mg treoninról tanúskodik. A kromatogrammon egy nagy, nem azonosított csúcs jelenik meg a hisztidin csúcs előtt. Semleges, savas és lúgos metanolban felvett ultraibolya elnyelési spektrumban A.««—245 nm (e=71.500). Az infravörös elnyelési spektrumot (KBr) a 4. ábrán mutatjuk be. A legjellemzőbb elnyelési maximumok: 3369, 2943, 2907, 2846, 1663, 1588, 1519, 1493, 1425, 1337, 1288, 1251, 1151, 1110, 1083, 995, 927, 890, 807, 776 és 751 cm"1. A perdeuterált dimetil-szulfoxidban, 360 MHz-nél felvett proton magmágnses rezonanciaspektrum csúcsai: delta 10,51, 10,17, 9,88, 9,77, 9,54 , 9,10, 8,90, 8,88, 8,66, 8,59, 8,51, 8,49, 6,38, 8,25, 8,24 , 8,06, 7,94, 7,53, 6.56, 6,51, 6,27, 6,23, 6,12, 6,12, 5,96, 5,77, 5,76, 5,71, 5,71, 5,64, 5,62, 5,47, 5,14, 4,77, 4,65, 4,62 , 4,20, 2,77, 2,48, 2,48, 1,58, 1,08, 0,98 és 0,98. A10255G faktor: Nem kristályos fehér, sárgás-fehér por, ami dimetil-szulfoxidban, dimetil-formamidban, piridinben, kloroform/metanol elegyében, tetrahidrofurán/víz, 4:1 arányú elegyében oldódik. P]pm ana1Í7Íc* C: 51,46, H: 3,82, N: 17,62, O: 19,38, S:7,03% (összesen: 99,31%). 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
