199510. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aktagardin bázisos monokarboxamid-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 199510 B Megjegyzések a 3. táblázathoz 18 Megjegyzések a 2. táblázathoz 1) Közelítő értékek. 2) A sav-bázis titrálásokat vizes (métilcelloszolv=MCS:víz 4:1 térf./térf.) és nemvizes (piridin vagy ecetsav) oldószerben végeztük. A további bázisos funkciós csoportok PKmcs (pK2) értékeit MCS:H20 4:1 (térf./ /térf.) oldatban határozzuk meg, a vegyületek 0,01 n NaOH-dal végzett titrálásával. Az aktagardin szabad aminocsoportjának (pKwcs 6,3) jelenlétét a származékokban — a XIII. vegyület kivételével — 0,01 n HCl-val végzett titrálással igazoljuk. A XIII. vegyület nem mutatja ezt a pKa értéket, hanem pKa értéke 8,9—9,4 közötti. Az egyenértéksúlyokat (EW) hidroxi-tetrabutil-aminnal (HTBA) piridinben vagy perklórsavval (HC104) ecetsavban végzett titrálással határozzuk meg. 3) A megoszlási együtthatókat (logP) n-oktanol és víz között való megosztással határozzuk meg. A vegyületek koncentrációját az egyes fázisokban spektrofotometriásán (UV) határozzuk meg. 4) Mindegyik vegyület változatlanul tartalmazza az aktagardin ionizálható bázisos funkciós csoportját (pK«<.s is. Titrálás MCS: :H20 4:1 (térf./térf.) rendszerben 0,01 n HC1- -val. 5) Desztillált víz. 6) pH 3,0, 0,1 mól acetát puffer. 7) Az értékeket MCS:H20 4:1 (térf./térf.) rendszerben határozzuk meg 0,1 n NaOH-val vagy 1,1N HCl-val végzett titrálással. 8) Az aktagardin (sav-alak) nem oldható vízben. A megadott 10 logP érték n-oktanol és pH 7,3 0,1 mól foszfátpuffer közötti megosztásra vonatkozik. n.d.: nem határoztuk meg. 17 1) Az IR spektrumokat nujol pólya alkalmazásával, Perkin-Elmer 580 spektrofotométerrel vesszük fel. 2) Az UV spektrumokat metanolos oldatban 320 UV-VIS típusú Perkin-Elmer spektrofotométerrel vesszük fel. A találmány szerinti vegyületek in vitro és in vivo antibakteriális aktivitást mutatnak. Legaktívabbak a S. mitis, S. salivarius és S. pyogenes törzsekkel szemben, ideértve ezeknek a törzseknek a klinikai izolált alakjait is. Aktivitásuk általában magasabb, mint az aktígardiné. A minimális gátló koncentrációt (MIC) a kétszeres sorozat-hígításos módszerrel határozzuk meg Difco-f. agy-szív infúziós levesben. Ezt, streptococcusok vizsgálata esetén, 2% szarvasmarha szérummal egészítjük ki. Az inokulum értéke kb. 103 telepképző egység/ml (TKE/ml). A MIC értéket az a legalacsonyabb koncentráció képviseli, amely 1 éjjelen át tartó inkubálás után, 37°C-on, megakadályozza látható növekedés kialakulását. A szérum hatását S. aureus Tour-ral határozzuk meg oly módon, hogy a táptalajhoz 30% szarvasmarha szérumot adunk. Az inokulum nagysága (kb. 106 TKE/ml) és a 30% szarvasmarha szérum hozzáadása nem befolyásolja nagymértékben az antibakteriális aktivitást. A szérum jelenlétében talált MIC értékek általában alacsonyabbak, mint az anélkül mért értékek. A találmány szerinti vegyületeknek a vonatkozási vegyülettel (aktagardin) összehasonlítva bemutatott antimikrobiális aktivitását a 4. táblázat tartalmazza. 5 10 15 20 25 30 35 40 10
