199509. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teikoplanin-származékok és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
kiszűrjük. A szűrt oldatot ezután 50°C-on, csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot (súlya kb. 19 g), amely szervetlen sókat és kb. 50% mennyiségben a cím szerinti termék és a megfelelő 35,52-didehidro-származék keverékét tartalmazza (mint ez UV, differenciális^ titrálás és 'H-NMR spektroszkópia segítségével megállapítható), 6:4 arányban, újra feloldjuk 126 ml 37%-os sósav és 400 ml dimetilformamid hideg (0—5°C) elegyében. 33 g Zn por .hozzáadása után a kapott elegyet 1 órán át 20—22°C-on keverjük. Ezen idő alatt a 35,52-didehidro-származék teljesen átalakul egy lipofilebb jellegű származékká, míg a cím szerinti vegyület változatlan marad. Az oldhatatlan anyagokat kiszűrjük és a szűrt-oldathoz 1,5 liter vizet adunk. 1,5 liter n-butanollal való extrakció után a szerves réteget kétszer 500 ml vízzel mossuk, majd pH-ját 1 n nátriumhidroxiddal 6-ra állítjuk be és kis térfogatra (kb. 100 ml) töményítjük be, 45°C-on, csökkentett nyomáson. A tömény zavaros butanolos oldatot erőteljes keverés közben beleőntjük 1 liter CH3CN:víz 2:8 (térf./térf.) arányú elegybe, a kapott oldat pH-ját 0,1 n sósavval 3-ra állítjuk be és felvisszük egy olyan oszlopra, amely 1,4 kg szilanizált szilikagélt (0,063—0,2 mm; Merck) tartalmaz ugyanebben az oldószerelegyben (2:8 — térf./térf. — CH3CN:víz). Az oszlopot ezután lineáris grádienssel fejlesztjük ki (20—70% acetonitril 0,001 n sósavban, 20 óra alatt; áramlási sebesség kb. 400 ml/óra) és 20 ml-es frakciókat szedünk eközben, amelyeket HPLC-vel követünk. A tiszta 1—5 komponenst vagy ezek keverékeit tartalmazó frakciókat összeöntjük és két térfogatnyi n-butanollal hígítjuk. A kapott keveréket kis térfogatra (kb. 100 ml) töményítjük be, 35°C-on, csökkentett nyomáson és a maradékhoz 300 ml etilétert adunk. Szilárd anyag válik ki, amelyet szűréssel összegyűjtünk, 200 ml etiléterrel mosunk és szobahőmérsékleten egy éjjelen át vákuumban szárítunk. Az l(a-e). vegyület hidrokloridját kapjuk; kitermelés 0,79 g (kb. 8,5%). Ha úgy járunk el, hogy az la, lb, 1c, Id és le. komponenst külön-külőn fogjuk fel az előbbiekben ismertetett fordított fázisú oszlopkromatográfiás eljárás végrehajtása során, vagy a komplex helyett a teikoplanin A2 valamelyik (1—5) komponenséből indulunk ki, tiszta alakban a megfelelő egyedi komponenseket — azaz az la, Ib, le. ld vagy le vegyületet — kapjuk.. 2. példa A 2. vegyület előállítása a) Teikoplanin A2-ből (A2 eljárás) 10 g (kb. 5 mmól) teikoplanin Á2-t 200 ml 1:1 (térf./térf.) DMF:CH3CN elegyben oldunk és az oldathoz keverés közben hozzáadunk — 0—5°C-on — 75 g nátrium-bórhidridet (kb. 0,4 g súlyú pelletek, Aldrich). A reakcióelegyet 3 órán át 5—10°C-on, majd 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük, ezután keverés és 35 10—15°C-ra való hűtés közben beleöntjük 150 ml jégecet 1 liter metanollal képezett oldatába. A kapott oldatot kb. 200 ml térfogatra töményítjük be, 45°C-on csökkentett nyomáson és a képződő csapadékot kiszűrjük. 100 ml víz hozzáadása után a szűrletet — amely a HPLC elemzés tanúsága szerint lényegében a cím szerinti'vegyületből áll — szobahőmérsékleten és normál nyomáson 30 percen át hidrogénezzük 5 g 5%-os Pd/C jelenlétében (kb. 200 ml H2 abszorpciója mellett). Ezután 5 g ugyanilyen katalizátort adunk az elegyhez és a hidrogénezést folytatjuk, az előbbi körülmények között, kb. 40 percen át (ekkor további 220 ml H2 abszorbeálódik). A katalizátort kiszűrjük, 20 g súlyú Celite BDH-545 blokk mint szűrést elősegítő agyag alkalmazásával, és a szürletet 50°C-on, csökkentett nyomáson kis térfogatra (kb. 50 ml) töményítjük be. 450 ml etilacetát hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet összegyűjtünk, 200 ml éterrel mosunk és újra feloldunk 200 ml 1! (térf./térf.) CH3CN:víz elegyben. 50 g szilanizált szilikagél (0,063—0,2 mm; Merck) ét 800 ml víz erőteljes keverés közben történő hozzáadása után a kapott szuszpenziót felvisszük egy oszlop tetejére, amely 1,4 ke; ugyanilyen szilikagélt tartalmaz, vízben. A/ oszlopot lineáris grádienssel fejlesztjük ki ( 10%-CH3CN 0,001 N HCl-ben — 60% CH3CN 0. 01 N HCl-ben), 10 óra alatt, 600 ml/óra sebességgel, miközben 25 ml-es frakciókat szedünk; ezeket HPLC-vel elemezzük. A cím szerinti tiszta vegyületet tartalmazó frakciókat összeöntjük és csökkentett nyomáson, 25°C-on betöményítjük — megfelelő mennyiségű n-butanol hozzáadása után. így kb. 60 ml térfogatú zavaros, száraz butanolos oldatot kapunk. Kb. 240 ml etiléter hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet szűréssel összegyűjtünk, 100 ml éterrel mosunk és vákuumban egy éjjelen át 40°C-on szárítunk. 0,76 g cím szerinti vegyületet kapunk, hidroklorid alakjában. A 2 vegyületből további mennyiségeket állítunk elő oly módon, hogy az ezt kevésbé tiszta alakban tartalmazó frakciókat összeöntjük és lényegében az előbbiek szerint feldolgozzuk. Ha az lb, 1c, ld és le komponenst külön-külön fogjuk fel az előbbiekben leírt kromatográfiás eljárás során, a fordított fázisú oszlopról, és az előbbiek szerint feldolgozzuk, az egyedi lb, le ld és le komponenst kapjuk. Bármelyik teikoplanin A2 komponensből kiindulva a megfelelő tiszta származékot kapjuk, azzal az eltéréssel, hogy ilyen reakciókörülmények között a teikoplanin A2 I. komponens bői mindig az le. vegyület állítható elő. b) Az I közti termékből (B eljárás) 3,4 g (kb. 2 mmól) I közti terméket (1. az 1. előállítási eljárást) 300 ml 7:3 (térf./térf.) CH3CN:0,04N HCl-ben oldunk és az oldatot szobahőmérsékleten és normál nyomáson 1,5 g 5%-os Pd/C jelenlétében hidrogénezzük. 30 perc alatt kb. 57 ml H2 abszorbeálódik. 36 19 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
