199498. lajstromszámú szabadalom • Eljárás netilmicin előállítására
HU 199498 B A találmány tárgya tökéletesített eljárás szizomicin átalakítására netilmicinné vagyis 1 -N-etil-szizomicinné. Közelebbről a találmány tárgya eljárás szelektíven védett szizomicin átalakítására 1-N-imin-származékká, majd az imint redukálva 1-N-etil-származékká (netilmicinné) olyan reakciókörülmények között, amelyek az előállítani kívánt terméket nagy kitermeléssel eredményezik, igen kevés zavaró melléktermék képződése mellett. Az (A) képletű netilmicin jól ismert amino-glükozid antibiotikum. Az antibiotikumot és előállítását a 4 002 742, 4 029 882, 4 230 847 és 4 337 335 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások ismertetik. A netilmicint eredetileg ügy állították elő, hogy szizomicin-szulfátot redukáló körülmények között acetaldehiddel reagáltattak. Mivel azonban a szizomicinnek öt aminocsoportja van, ez az eljárás szokatlanul nagy százalékos mennyiségű nem kívánatos termék képződéséhez vezetett, és az összes kitermelés csak körülbelül 10— 11 % volt. A 4 230 847 számú amerikai egyesült államokbeli leírás szerinti eljárás lényeges javulást jelentett: réz-komplexek alkalmazásával a szizomicin 3,2’ és 6’ aminocsoportjait szelektíven megvédték. Ennek a köztiterméknek az alkilezése acetaldehiddel redukálószer jelenlétében, a kitermelés jelentős javulásához vezetett (60% laboratóriumban, 49% üzemi gyártásban). Ennek a javított eljárásnak a során is képződtek azonban jelentős százalékos menynyiségben nem-kívánatos termékek, amelyek az összes kitermelést csökkentették. A nem-kívánatos legnagyobb mennyiségű melléktermék az 1,1-N-dietil-szizomicin volt. A fent említett eljárásban alkalmazott reakciókörülmények között, vagyis az acetaldehiddel redukálószer jelenlétében végzett reakció során, úgy látszott, hogy a nem reagált vagy feleslegben lévő acetaldehid a már képződött 1-N-etilezett szizomicinnel reagál, és így keletkezik az 1,1-dietilezett termék. A találmány a fenti eljárás tökéletesítésére vonatkozik, amely kevesebb mellékreakciót és ennek megfelelően nagyobb kitermelést eredményez. A találmány szerint úgy járunk el, hogy egy szelektíven védett (I) általános képletű szizomicin-származékot — a képletben X egy (a) általános képletű organoszililcsoport, amelyben R1, R2 és R3 egymástól függetlenül rövidszénláncú alkil-, fenilvagy fenil-rövidszénláncú-alkilcsoport, X’ hidrogénatom vagy egy fenti definíciójú organoszililcsoport, Y amino-védőcsoport, és Y’ hidrogénatom vagy amino-védőcsoport — iners aprotikus szerves oldószerben, vízmentes körülmények között acetaldehiddel reagáltatunk, és így a megfelelő 1-N-etilidén-származékot képezzük; a reakciókeverékben feleslegben lévő vagy nem reagált acetaldehidet előnyösen vízmen-2 1 tes körülmények között fémhidriddel redukáljuk; az 1-N-etilidéncsoportot vizes vagy vízmentes körülmények’ között a reakcióelegy pH-értékét 7—12 közé állítva etil-aminocsoporttá redukáljuk; valamennyi védőcsoportot eltávolítjuk; és a netilmicint szabad bázis vagy savaddíciós formájában izoláljuk. A szizömicin-származékot a 3,2’, 6’ és adott esetben a 3” helyzetben az aminocsoportot védő vegyületekkel reagáltatjuk. Előnyös amino-védő szubsztituensek az acetil-, formil-, propionil- és aroilcsoportok, ezek közül kiváltképpen előnyös az acetil-szubsztituens. Az eljárásokat, amelyekkel az acetil-, propionil- és aroilcsoportok a szizomicinhez adhatók, a 4 337 335 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás ismerteti. A formil szubsztituenst úgy vihetjük be, hogy a szizomicint nem-szimmetrikus hangyasav-anhidriddel reagáltatjuk. A 3,2’, 6’-tri-N-acetil-szizomicin (II képletű vegyület) előállítását szizomicinből a 4 230 848 és 4 136 254 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások ismertetik. Mindkét leírás 16C (1) példája ismerteti a réz(II)-acetát-hidrát reakcióját szizomicinnel, majd a reakciót ecetsavanhidriddel és ezután hidrogén-szulfid gázzal. A terméket hidroxid-ciklusban lévő ioncserélő gyantáról izolálják. A specifikus példát bejelentésünkbe beépítjük. A 3,2’,6’-tri-N-acetil-szizomicin előállításának egy második módja szizomicinből a következő: réz(lI)-acetátot N,N-dimetiI-formid és víz körülbelül 6:2 arányú keverékében szuszpendálunk, és a szizomicin-koncentrátumot hozzáadjuk. A pH-értéke't trietil-amin hozzáadásával 8,5—10,5-re beállítjuk. A szuszpenziót körülbelül 5°C-ra lehűtjük és ecetsavanhidrid N,N-dimetil-formamidos oldatát 0—10°C-on, erélyes keverés közben fokozatosan hozzáadjuk. A reakciókeverék pH-értékét trietil-amin további szükségszerű hozzáadásával 8,5— 10,5-ön tartjuk. Ügy is eljárhatunk, hogy először az N,N-dimetil-formamidos ecetsavanhidrid-oldatnak körülbelül 90%-át adjuk a fentiek szerint a szuszpenzióhoz, a maradék 10% oldatot körülbelül hat térfogat N,N-dimetil-formamiddal hígítjuk és ezután ezt is hozzáadjuk. A reakció lefolyását vékonyréteg-kromatográfiával ellenőrizzük. Ha a reakció nem tökéletes, akkor még adunk N,N-dimetil-formamidos ecetsavanhidrid-oldatot a reakciókeverékhez, s így a reakciót teljessé tesszük. Amikor a reakció befejeződött; a keveréket csökkentett nyomáson koncentráljuk. A koncentrátumot vízzel hígítjuk, körülbelül négy órára 0—10°C-ra lehűtjük és a szilárd anyagokat kiszűrjük. A terméket részleges ammónium-ciklusban lévő ioncserélő gyantáról izoláljuk. 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
