199490. lajstromszámú szabadalom • Eljárás perorálisan hatásos foszfonil-hidroxi-acil-prolin-származékok előállítására
3 HU 199490 B mény hatásosan alkalmazható emlős fajok kezelésére, ha 30—600 mg, előnyösen 30— 330 mg közötti mennyiségű (I) általános képletű hatóanyagot és 15—300 mg, előnyösen 15—200 mg közötti mennyiségű vizelethaj - tót tartalmaz. A találmányunk szerinti hatóanyagokkal együtt, kombinációban hatásosan alkalmazható vizelethajtók képviselői a tiazidtípusú vizelethajtók, például a klórtiazid, hidroklórtiazid, flumetiazid, hidroflumetiazid, bendroflumetiazid,, metil-klotiazid, triklórmetiazid, politiazid, vagy benztiazid, valamint az etakrinsav, tikrinafén, klórtalidon, furoszemid, muszolimin, bumetanid, triamterén, amilorid, spironolakton és sóik. A (I) képletű hatóanyag vérnyomáscsökkentő kezelés esetén, orális alkalmazáshoz tabletta, kapszula vagy folyadék formában, parenterális alkalmazáshoz steril oldat vagy szuszpenzió formában szerelhető ki megfelelő készítményben. 10—500 mg közötti mennyiségű (I) általános képletű hatóanyagot keverhetünk össze fiziológiailag elfogadható oldószerrel, hordozóanyaggal, kötőanyaggal, töltőanyaggal, tartósítószerrel, stabilizálószerrel, ízesítőanyaggal és egyéb anyagokkal, a gyógyászati gyakorlatban elfogadott egység adag formák valamelyike szerint kiszerelve. Ezekben a készítményekben az alkalmazott hatóanyag az előzőekben ismertetett mennyiségtartomány szerinti. A következő példák találmányunk részletesebb bemutatására szolgálnak. A hőmérsékletet Celsius fokokban adtuk meg. 1. példa (S)-l- [6-Amino-2- [ [hidroxi-(4-fenil-butil) -foszfinil] -oxi] -1-oxo-hexil]-L-prol in-dil ítiumsó a) (4-Fenil-butil)-foszfonsav-dibenzil-észter 1,01 g (20,8 mmól) nátrium-hidrid 50%-os olajos diszperziót adtunk 30 ml vízmentes dimetil-formamidban oldott 5,25 g (20,0 mmól) dibenzil-foszfit oldathoz argongáz alatt. A kapott elegyet szobahőmérsékleten kevertük egy órán át, majd 40°C-on (fürdő hőmérséklet) 30 percig. A kapott, áttetsző, sárga oldatot hagytuk szobahőmérsékleten hűlni, majd 3 ml dimetil-formamidban oldott, 4,0 g (23,7 mmól) 4-fenil-butil-kloridot adtunk hozzá. A kapott elegyet szobahőmérsékleten 18 órán át, majd 40°C-on 2 órán át kevertük. Az elegyet ezután etil-acetáttal és 1%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal kiráztuk. A szerves fázist sorban mostuk, kétszer vízzel, kétszer telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és kétszer telített nátrium-klorid oldattal, maid nátrium-szulfáton szárítottuk, és bepároltuK. A kapott maradékot flash-kromatográfiásan tisztítottuk (szilikagél, 100 g LPS-1), eluálőszerként 3:7 arányú etil-acetát és hexán elegyet használtunk, és így színtelen, meglehetősen viszkózus, olaj formájú (4-fenil-butil)-foszfonsav-dibenzil - észtert kaptunk. b) I-[(S)-2-{ [(4-Fenil-butil)-(benziloxi)-foszfinil] -oxi}-6-{[(benziloxi—karboníl] -amino}-! -oxo-hexil] -L-prol in-benzil-észter 320 g (1,54 mmól) foszfor-pentakloridot adtunk 3,0 ml vízmentes benzolban oldott 595 mg (1,51 mmól) (4-fenil-butil)-foszfonsav-dibenzil-észter oldathoz. A kapott elegyet szobahőmérsékleten argongáz atmoszférában 30 percen keresztül, majd 60°C-on (fürdő hőmérsékleten) folytattuk a keverést 45 percig Az oldatot bepároltuk (60°C, 6,6 Pa), benzolban oldottuk, majd újra bepároltuk. Ezt az eljárást kétszer megismételtük. A nyers foszfonsav-kloridot 5,0 ml vízmentes metilén-kloridban oldottuk, majd hozzáadtunk 50 ml vízmentes metilén-kloridban oldott 0,72 g (1,54 mmól) 1- [ (S)-6-{[benziloxi-karbonil]-amino}-2-hidroxi-l-o.xohexil] -L-prolin—benzil—észtert, 0,35 ml (2,53 mmól) trietil-amint és40mg dimetil-amino-piridint, és szobahőmérsékleten argongáz atmoszférában kevertük. 4 óra múlva az elegyet etil-acetáttal és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal kiráztuk. A szerves fázist sorban mostuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és telített nátrium-klorid oldattal, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítottuk, és bepároltuk. Ehhez a nyers termékhez egy második adag foszfonsav-kloridot adtunk az előzőekben leírt körülmények között. Az előzőek szerint készítve és flash-kromatográfiásan tisztítva (szilikagél, 100 g LPS-1), eluálószerként aceton és hexán 3:7 arányú elegyét alkalmazva 428 mg tömegű, viszkózus olajformájú 1 - ( (S)-2-{ [ (4-fenil-butil)- (benzil oxi) -foszfinil] -oxi] -6-{[ (benziloxi—karbonil] -amino}-l - -oxo-hexil] -L-prolin-benzil—észtert kaptunk. TLC (szilikagél; metanohmetilén-klorid, 5:95) R/= 0,45. TLC (szilikagél; aceton:meti!én-klorid, 2:8) két foltot mutat (izomerek a foszfornál, megközelítőleg 1:1) R/ = 0,54 és 0,49. c) (S)-l-[6-Amino-2-{[hidroxi-(4-fenil-butil)-foszfinil] -oxi}-!-oxo-hexil] -L-prolin-dilítiumsó A b) pont szerint készített benzil-észterből 428 mg (0,57 mmól) mennyiséget oldottunk 15 ml metanol, 3 ml víz és 0,27 trietil-amin elegyében, és 10 g 10% palládiumot tartalmazó szénkatalizátort adtunk hozzá, és hidrogén-atmoszférában kevertük 3 órán át. Az elegyet ezután Celiten keresztül szűrtük, majd a katalizátort alaposan átmostuk metanollal. Az egyesített szűrletekhez 0,85 ml (1,7 mmól) 2n lítium-hidroxid oldatot adtunk, és szárazra pároltuk. A maradékot vízben oldottuk, leszűrtük (Millipore) és liofilizáltuk. A nyersterméket HP-20 kolonnán tisztítottuk (250 ml ágytérfogat, kolonnaátmérő 24,5 mm), eluálószerként víz —»acetonitril (90%) gradiens rendszert használtunk, az áramlási sebesség 5 ml/perc volt, és összesen 5 ml termék tartalmú frakciót gyűjtöttünk 4 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 05
